《chap核酸類藥物》ppt課件-文庫吧
2024-12-21 03:22 本頁面
【正文】 母 減少環(huán)境污染，降低糧食消耗 （ 4） RNA的提取實例 啤酒酵母是提取 RNA的很好的資源。 取 100g壓榨啤酒酵母（含水 70％ ），加入 230ml含 NaOH 3g的水， 20℃ 以下攪拌 30min。用 6mol/L HCl調至 pH7，攪拌 15分鐘，離心得上清液 255ml。冷至 10℃ 以下，6mol/L HCl調 ，置冷過夜，離心等 （純度 80％）。 （二） DNA的提取與制備 DNA的提取 取新鮮冷凍魚精 20kg，用絞肉機粉碎 2次成漿，加入等體積水，攪拌均勻，傾入反應鍋內，緩慢攪拌，升溫至100 ℃ ，保溫 15分鐘，迅速冷卻至 20～ 25 ℃ ，離心去除魚精蛋白等沉淀物，共獲得 35L含熱變性 DNA溶液。加乙醇沉淀，可得到固體 DNA產品。 DNA的制備 動物內臟加 4倍量生理鹽水經組織搗碎機搗碎 1分鐘，勻漿于 2500rpm離心 30分鐘，沉淀用同樣體積的生理鹽水洗滌 3次，每次洗滌后離心，將沉淀懸浮于 20倍量的冷生理鹽水中，再搗碎 3分鐘，加入 2倍量 5％十二烷基磺酸鈉，并攪拌 2～ 3小時，在 0 ℃ 2500rpm離心，在上層液中加入等體積的冷乙醇，離心即可得纖維狀DNA，再用冷乙醇和丙酮洗滌，減壓低溫干燥得粗品DNA。 二、
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