【正文】 錄 Ⅴ B） 試驗(yàn)，吸取上述三種溶液各 10μl ， 分別點(diǎn)于同一硅膠 GF254薄層板上，以氯仿－丙醇 (75:25)為展開(kāi)劑，展開(kāi)后，晾干，置紫外光燈 (254nm)下檢視。供試品溶液如顯雜質(zhì)斑點(diǎn)，與對(duì)照溶液 (2)的主斑點(diǎn)比較，不得更深 ；如有 1點(diǎn)超過(guò)時(shí)，應(yīng)不深于對(duì)照溶液 (1)的主斑點(diǎn)。 LOGO 中國(guó)藥科大學(xué) 藥物分析教研室 有關(guān)物質(zhì)檢查 遇光不穩(wěn)定－光化學(xué)歧化作用 N O 2NC O O C H 3C H 3C H 3H 3 C OON ONC O O C H 3C H 3C H 3H 3 C OO4 ( 2 硝 基 苯 基 ) 2 , 6 二 甲 基 吡 啶 3 , 5 二 羧 酸 二 甲 酯 4 ( 2 亞 硝 基 苯 基 ) 2 , 6 二 甲 基 吡 啶 3 , 5 二 羧 酸 二 甲 酯硝 苯 吡 啶 衍 生 物 亞 硝 苯 吡 啶 衍 生 物HPLC法檢查 (A) (B) 三、硝苯地平中的有關(guān)物質(zhì)檢查 LOGO 中國(guó)藥科大學(xué) 藥物分析教研室 HPLC法檢查 硝苯地平中的有關(guān)物質(zhì)檢查 ?避光操作 ? 取本品，精密稱(chēng)定，加甲醇分別制成每 1ml中含 1mg和 ，作為供試品溶液 Ⅰ 和 Ⅱ 。 ? 取硝苯地平有關(guān)雜質(zhì)對(duì)照品 A和 B各 10mg， 精密稱(chēng)定，置 50ml量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，作為對(duì)照品溶液 Ⅰ 。分別精密量取供試 品溶液 Ⅱ 和對(duì)照品溶液 Ⅰ 各 1ml， 置100ml量瓶中，加流動(dòng)相稀釋至刻度，作為對(duì)照品溶液 Ⅱ 。 ? 照高效液相色譜法（附錄 Ⅴ D） 試驗(yàn)，用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以甲醇 水(3:2)為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為 235nm。 取對(duì)照品溶液 Ⅱ 20μl注入液相色譜儀，調(diào)節(jié) 檢測(cè)靈敏度，使雜質(zhì) A和 B成分色譜峰的峰高為滿(mǎn)量程的 20％；雜質(zhì) A和 B之間，雜質(zhì) B與硝苯地平之間的分離度均應(yīng)符合規(guī)定。 ? 取供試品溶液 Ⅰ 和對(duì)照品溶液 Ⅱ 各 20μl， 分別注入液相色譜儀。記錄色譜圖至主成分峰保留時(shí)間的 2倍。供試品溶液 Ⅰ 如出現(xiàn)與對(duì)照品溶液 Ⅱ 中雜質(zhì) A和 B相對(duì)應(yīng)的峰，其峰面積不得大于對(duì)照品溶液 Ⅱ 中雜質(zhì) A和 B的面積；如出現(xiàn)除雜質(zhì) A和 B以外的其他雜質(zhì)峰，其峰面積不得大于對(duì)照品溶液 Ⅱ 中硝苯地平的峰面積； 各雜質(zhì)總量不得大于 ％。供試品溶液 Ⅰ 中小于對(duì)照品溶液 Ⅱ 中硝苯地平峰面積的 10％ 以下的雜質(zhì)峰忽略不計(jì)。 LOGO 中國(guó)藥科大學(xué) 藥物分析教研室 第二節(jié) 喹啉類(lèi)藥物 硫酸奎寧 硫酸奎寧丁 鹽酸環(huán)丙沙星 (quinine sulfate) (quinidine sulfate) (ciprofloxacin hydrochloride) NH OHNHHH C C H 2H 3 C O , H 2 S O 4 , 2 H 2 ONHH ONHH C C H 2H 3 C O , H2 S O 4 , 2 H 2 OH2 2NFNOO HOH N, H C l , H 2 O結(jié)構(gòu)特點(diǎn)：含有吡啶與苯稠合而成的喹啉雜環(huán)，環(huán)上雜原子的反應(yīng)性能基本與吡啶相同。 LOGO 中國(guó)藥科大學(xué) 藥物分析教研室 主要化學(xué)性質(zhì) ? 堿 性： 喹啉環(huán)上的 N原子具有堿性，與強(qiáng)酸成鹽 ? 環(huán)丙沙星： 鹽酸； ? 奎寧、奎尼丁： 二元酸－硫酸（喹核堿含脂環(huán)氮，堿性強(qiáng)） ? 奎寧 (左旋體 )： pKb1為 pKb2為 ，飽和水溶液 pH為 ，易溶 于氯仿－無(wú)水乙醇 (2:1) ? 奎尼丁 (右旋體 )： pKb1為 pKb2為 10，易溶于沸水或乙醇。 ? 旋 光 性： 硫酸奎寧 (左旋體 )，比旋度為 237176。至 244176。 硫酸奎寧丁 (右旋體 )，比旋度為 +275176。至 +290176。 鹽酸環(huán)丙沙星，無(wú)旋光性 ? 熒光特性： 硫酸奎寧和硫酸奎寧丁在稀硫酸中顯藍(lán)色熒光，鹽酸環(huán)丙 沙星無(wú)熒光。 LOGO 中國(guó)藥科大學(xué) 藥物分析教研室 鑒別試驗(yàn) 一、綠奎寧反應(yīng)（ Thalleioquin） 用于奎寧和奎尼丁的鑒別 NH ONH OC lC l 2C l2NOC l C lN H 3N NNO N H 4O鑒別方法 ：取本品約 20mg， 加水 20ml溶解后，分取 5ml， 加溴試液 3滴與氨試液 1ml ， 即顯翠綠色。 硫酸奎寧和硫酸奎尼丁的 反應(yīng)機(jī)理 如圖 取其水溶液加溴試液 2～ 3滴和氨試液 1ml，即顯翠綠色；加酸至中性顯藍(lán)色；酸性則呈紫紅色；翠綠色可轉(zhuǎn)溶于醇、氯仿中不溶于醚。 LOGO 中國(guó)藥科大學(xué) 藥物分析教研室 鑒別試驗(yàn) 二、光譜特征 ?紫外吸收光譜 －鹽酸環(huán)丙沙星：取本品，加，照分光光度法 (附錄 Ⅳ A)測(cè)定，在 277nm與 315nm的波長(zhǎng)處有最大吸收。 ?熒光光譜 －硫酸奎寧：取本品約 20mg， 加水 20ml溶解后，分取溶液 10ml， 加稀硫酸使成酸 性，即顯藍(lán)色熒光。 LOGO 中國(guó)藥科大學(xué) 藥物分析教研室 鑒別試驗(yàn) ?硫酸 奎寧、 硫酸 奎尼丁 → 硫酸根－氯化鋇＝白色沉淀 ?鹽酸 環(huán)丙沙星 → 鹽酸根－硝酸銀＝白色沉淀 三、無(wú)機(jī)酸鹽 LOGO 中國(guó)藥科大學(xué) 藥物分析教研室 特殊雜質(zhì)檢查 一、硫酸奎寧中的特殊雜質(zhì)檢查 ? 酸度－酸性雜質(zhì) 取本品 ， 加水 20ml溶解后，測(cè)定 pH值應(yīng)為 ～ 。 ? 氯仿－乙醇不溶物 取本品 2g， 加氯仿－無(wú)水乙醇 (2:1) 的混合液 15ml， 在 50℃ 加熱 10min后，用稱(chēng)定重量的垂熔坩堝濾過(guò)，濾渣用上述混合液分 5 次洗滌，每次10ml ， 在 105 ℃ 干燥至恒重，遺留殘?jiān)坏眠^(guò) 2mg。 ? 其他金雞納堿（ TLC） 取本品，加稀乙醇制成每 1ml 含 10mg的溶液，作為供試品溶液；精 密量取適量，加稀乙醇稀釋制成每 1ml 中含 50μg 的溶液，作為對(duì)照溶液。照薄層色譜 法（附錄 Ⅴ B） 試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各 5μl， 分別點(diǎn)于同一硅膠 G薄層板上，以氯 仿－丙酮－ 二乙胺 (5:4:)為展開(kāi)劑，展開(kāi)后，微熱使展開(kāi)劑揮散，噴以碘鉑酸鉀試 液使顯色。供試品溶液如顯雜質(zhì)斑點(diǎn)，與對(duì)照溶液的主斑點(diǎn)比較，不得更深。 LOGO 中國(guó)藥科大學(xué) 藥物分析教研室 特殊雜質(zhì)檢查 二、鹽酸環(huán)丙沙星中特殊雜質(zhì)檢查 ? 酸 度 取本品，加水制成每 1ml中含 25mg的溶液，測(cè)定 pH值應(yīng)為 ～ 。 ? 溶液的澄清度和顏色 取本品 ， 加水 10ml溶解后，溶液應(yīng)澄清；如顯色，與黃色或黃綠色 4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)比色液 (附錄 Ⅸ A)比較，不得更深。 ? 有關(guān)物質(zhì)（ HPLC） ODS色譜柱；以 (82:18)用三乙胺調(diào)節(jié) pH值至 ；檢測(cè)波長(zhǎng)為 277nm。 理論板數(shù)按鹽酸環(huán)丙沙星峰計(jì)算應(yīng)不低 于 2022，鹽酸環(huán)丙沙星峰與相鄰雜質(zhì)峰的分離度應(yīng)符合規(guī)定。 測(cè)定法 取本品適量，加水制成每 1ml中含 ，取 20μl注入液相色譜儀，調(diào)節(jié)檢測(cè)靈敏度 和記錄儀衰減，使主成分的峰高為記錄儀滿(mǎn)量程的 2～ 4倍，記錄時(shí)間應(yīng)為主成分峰保留時(shí)間的 2倍。按面積 歸一化法計(jì)算，雜質(zhì)總量不得過(guò) ％。 LOGO 中國(guó)藥科大學(xué) 藥物分析教研室 第三節(jié) 托烷類(lèi)藥物 O HOOHNC H 32, H 2 S O 4 , H 2 OONC H 3OHH OO, H B r , 3 H 2 O 硫酸阿托品 氫溴酸東莨菪堿 (atropine)