第十一章生物素-親合素放大技術(shù)-文庫(kù)吧
2025-08-25 13:08 本頁(yè)面
【正文】 羥基丁二酰胺 碳二亞胺 生物素羥 基琥珀酰 亞胺酯（ BNHS ） 如何減小空間位阻？ ?長(zhǎng)臂活化生物素 （ BCNHS）： 生物素和 N羥基丁二酰亞胺之間添 加了兩個(gè) 6氨基已糖分子基團(tuán)，形 成連結(jié)臂，生物素與大分子基團(tuán)的 距離 標(biāo)記蛋白質(zhì)醛基的活化生物素 生物素酰肼 (BHZ)： 水合肼與生物素的合成物 主要用于標(biāo)記偏酸性糖蛋白 肼化生物胞素 (BCHZ) ：生物素與賴氨酸連接 后，再與無(wú)水肼反應(yīng)而成。 除醛基外， BCHZ還可標(biāo)記氨基 標(biāo)記蛋白質(zhì)巰基的活化生物素 馬來(lái)酰亞胺 丙酰 生物胞素（ MPB) 能特異地與蛋白質(zhì)巰基結(jié)合的活化 生物素 標(biāo)記核酸的活化生物素 ?光生物素 (photobiotin) 側(cè)鏈上連接的芳香基疊氮物基團(tuán) , 經(jīng)光照后 , 變?yōu)榉枷? 基硝基苯，可直接與腺嘌呤氨基結(jié)合 , 形成 B核酸探針 ?生物素脫氧核苷三磷酸 （ BiodUTP） 作為 TTP的結(jié)構(gòu)類(lèi)似物，可采用缺口移 位法摻入到雙鏈 DNA中。 ?BNHS和 BHZ 可直接標(biāo)記核酸， 但對(duì) 堿基配對(duì) 有影 響。 ? 活化生物素通過(guò)側(cè)鏈與蛋白分子連接； ? 一個(gè)蛋白分子可被多個(gè)生物素標(biāo)記－多價(jià)性； ? 對(duì) BNHS多標(biāo)記抗體 , BHZ則多標(biāo)記微酸性抗原； 抗原、抗體標(biāo)記后活性不變； ? 可對(duì)標(biāo)記材料（如酶）標(biāo)記：堿性磷酸酶標(biāo)記后 活性將降低； 二、生物素標(biāo)記蛋白質(zhì) ? 選擇活化生物素： 依抗原或抗體分子所帶可標(biāo)記基團(tuán) 的種類(lèi)（氨基、醛基或巰基）以及分子的酸堿性； ? 控制生物素： 蛋白質(zhì)比例 生物素： IgG 用量比 (mg/mg)宜為 2:1, IgG應(yīng)用濃度
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