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正文內(nèi)容

灰霉aur1基因的必需性分析-文庫(kù)吧

2025-04-20 03:15 本頁(yè)面


【正文】 上游 (以后簡(jiǎn)稱為 P端 )序列與下游 (以后簡(jiǎn)稱為 T端 )序列。 pepB基因阻斷質(zhì)粒的構(gòu)建 PCR產(chǎn)物 P端先用 T4DNA聚合酶削平,再用 Sal1酶切 ,載體 pMW1先用 HindIII酶切,Klenow補(bǔ)平后再用 Sal1酶切。將處理后的 P端克隆到上述載體,得到 pMW1P。 PCR產(chǎn)物 T端同樣用 T4DNA聚合酶削平,克隆到 pMW1P的 Sma I位點(diǎn)。獲得含 pepB阻斷基因的 pMW1pepB (圖 1) ,分別用Pst1和 EcoR1, Sal 1和 BamH 1雙酶切,Hpa 1單酶切,均獲得與預(yù)期相同的酶切片段,證明構(gòu)建正確。 pepB基因阻斷質(zhì)粒的結(jié)構(gòu)示意圖 黑曲霉 pepB基因缺失株的篩選及PCR檢測(cè) 為了通過(guò)同源重組構(gòu)建 p
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