抗體效價(jià)的elisa測(cè)定-文庫(kù)吧
2025-04-19 22:49 本頁(yè)面
【正文】 s will bind to the HIV antigens on the 。如果病人是艾滋病毒 +，那么這個(gè)血清含有艾滋病毒抗體，這些抗體可以綁定到病毒抗原板 Antihuman immunoglobulin coupled to an enzyme. This is the second antibody, and it binds to human 。這是繼抗體，并結(jié)合人類(lèi)抗體 substrate which changes color when cleaved by the enzyme attached to the second antibody. 基板而改變顏色，當(dāng)裂解酶附二抗體 HIV (human immunodeficiency virus) detection positive negative P o s i t i v e Co n t r o l Ne g a t i v e Co n t r o l P a t i e n t A P a t i e n t B P a t i e n t C As s a y Co n t r o l 1 . 6 8 9 0 . 1 5 3 O. 0 5 5 0 . 4 1 2 1 . 9 9 9 0 . 1 2 3 Protein protein interactionELISA 1. Direct elisa different epitope Coat with prey protein Incubate with bait protein Pimary Ab anti bait protein 直接酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)不同表位 外套與獵物蛋白 孵化與誘餌蛋白 原發(fā)性抗體抗誘餌蛋白 elisa same epitope Coat with bait pr Incubate with primary antibody anti bait pr and various concentration prey protein(競(jìng)爭(zhēng)同一表位。 外套與誘餌蛋白 培養(yǎng)初級(jí)抗體抗誘餌蛋白及不同濃度的獵物蛋白 ) 4. 操作方法 包被特異性抗原 :固體抗原 (如蛋白質(zhì) )用包被液稀釋至 10Oμ g/ml，每凹孔加 100μ L， 加蓋置 4℃ 過(guò)夜 (37 ℃ 2h)， 次日傾去凹孔內(nèi)液體 ，用滴管取洗滌液在每孔中加 3～ 4滴 ， 靜置 3min后傾去 ， 重復(fù) 3次 ， 將反應(yīng)板扣放在濾紙上 ， 以除凈液體 。 封閉 : 每孔中加入 200－ 400μ L封閉液 ， 加蓋或用封口膜封板 ， 置37℃ 恒溫箱 60min， 傾去孔內(nèi)液體 ， 按上法洗滌 3次 。 加待測(cè)血清 (內(nèi)含抗體 )、陰性血清 (無(wú)抗體 )及稀釋液(PBS/Tween): 待測(cè)血清按倍比法用稀釋液稀釋 (1:100、 1:200等 )，陰性血清也稀釋成 1:100，取不同稀釋度的待測(cè)血清，陰性血清及稀釋液 (PBS/Tween)各 1OOμ L加至相應(yīng)的凹孔中，加蓋或封板，置 37℃ 恒溫箱 1h， 使抗體與固相抗原進(jìn)行特異性結(jié)合，反復(fù)洗滌 3次。 1 2 3 4 5 6 7 8 PBS/Tween 1:100陰性血清
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