【正文】 No.： SOP 標(biāo)準(zhǔn) 操作 程序 STANDARD OPERATION PROCEDURE 名稱：分析方法驗證管 理程序 頁碼 Page: Page 5 of 21 Title: Analytical Method Validation Procedure 禁止 復(fù) 印 DO NOT COPY 成路線 有新 的已知雜質(zhì) —— 對新的已知雜質(zhì)全部驗證 工藝 /處方明顯變化 是 —— 工藝 /處方小的變化 —— 根據(jù)情況 質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)變化 根據(jù)變化情況確定 HPLC 法的流動相種類 是 —— 樣品準(zhǔn)備方法 根據(jù)變化情況確定 中間精密度 樣品溶液穩(wěn)定性 儀器或軟件平臺 —— LOQ（儀器變化） 術(shù)語 分析方法 指進(jìn)行分析的方式，應(yīng)詳細(xì)描述進(jìn)行每個分析實驗所必需的步驟。它包括但不局限于：樣品、對照品、試劑、溶液配制、儀器使用、計算公式運用等 。 系統(tǒng) 適 用性 指 在分析樣品前的一系列進(jìn)樣，為了確保色譜系統(tǒng)能準(zhǔn)確檢測。 溶液穩(wěn)定性 指溶液可儲存的環(huán)境和時間。 儲備 /工作對照品和樣品溶液的穩(wěn)定性決定其儲存時間。在儲存期內(nèi)，被分析物在溶液中保持穩(wěn)定，對照品溶液使用有效，樣品溶液能被分析或再次分析。如果沒有對照品和樣品溶液穩(wěn)定性的數(shù)據(jù)，其它驗證項目的結(jié)果不應(yīng)被認(rèn)可。 濾膜影響實驗 指試驗中使用到的濾膜對于被分析物準(zhǔn)確可靠測定的影響。 專屬性 指在其他組分（如雜質(zhì)、降解產(chǎn)物、輔料等）可能存在的情況下，分析方法能準(zhǔn)確地測出被測組分的特性。原料藥物中常含有雜質(zhì)，如合成的原料、中間體、副產(chǎn)物以及降解產(chǎn)物等，制劑中則含有輔料、雜質(zhì)，如活性藥 物中存在的雜質(zhì)、降解產(chǎn)物、活性藥物與輔料相互作用的產(chǎn)物、輔料或生產(chǎn)過程中的殘留溶劑、容器密封系統(tǒng)或生產(chǎn)過程中的濾出物或提取物等。分析方法的專屬性高，就可以排除這些干擾組分的影響，準(zhǔn)確地測定被測組分。 線性與范圍 線性是指在指定范圍內(nèi)由該分析方法得到的結(jié)果與被分析物樣品的濃度（量）成正比的關(guān)系。線性通常用來表示回歸曲線的斜率與被分析物不同濃度的樣品測試結(jié)果的偏差。驗證范圍是由線性和準(zhǔn)確度的范圍確定的。 準(zhǔn)確度 指用該方法測得的結(jié)果與真實值或認(rèn)可的參考值之間的接近程度。 精密度 指規(guī)定條件下對均質(zhì)樣品多次 取樣進(jìn) 行一系列檢測結(jié)果的接近程度（離散程度）。精密度可從以下三個層次考慮： 編號 No.： SOP 標(biāo)準(zhǔn) 操作 程序 STANDARD OPERATION PROCEDURE 名稱：分析方法驗證管 理程序 頁碼 Page: Page 6 of 21 Title: Analytical Method Validation Procedure 禁止 復(fù) 印 DO NOT COPY 重復(fù)性 指 對同一均勻樣品多次取樣，在一定條件下進(jìn)行多次測定所得結(jié)果之間的接近程度。 中間精密度 指考察實驗室內(nèi)不同人員用不同儀器 ，在不同時間 分析時，對方法精密度及準(zhǔn)確度的影響。 重現(xiàn)性 指考察不同實驗室分析時，對方法精密度及準(zhǔn)確度的影響。 檢測限 (LOD)指樣品中被分析物能被檢測到的最低量，但是在規(guī)定實驗條件下不需定量到一個準(zhǔn)確值 ，通過 S/N≈ 3 來確定 。它經(jīng)常被應(yīng)用于制劑中有關(guān)物質(zhì)微量水平的分析。這些限度指標(biāo)用于制劑中與放行和穩(wěn)定性有關(guān) 的雜質(zhì)檢測方法。 定量限 (LOQ)它被用于雜質(zhì)或降解產(chǎn)物的微量檢測。分為方法的 LOQ 和儀器的LOQ。方法的 LOQ 指 能夠定量檢測到被分析物的最低濃度，并在該濃度點上具有合適的精密度、準(zhǔn)確度和靈敏度。方法的線性范圍應(yīng)包含該濃度點。 儀器的 LOQ 則用 S/N≈ 10確定，用 于評估 具體使用的 分析儀器的靈敏度。 耐用性 指測定條件發(fā)生小的變動時，測定結(jié)果不受影響的程度，同時也是分析方法在正常使用時的可靠性指標(biāo)。 4 職責(zé) RESPONSIBILITIES 分析方法部門負(fù)責(zé)起草驗證方案和報告 。 實驗室負(fù)責(zé)人及相關(guān)部門負(fù)責(zé)人負(fù)責(zé) 審核驗證方案和報告。 QA 負(fù)責(zé)人負(fù)責(zé)審核和批準(zhǔn)驗證方案和報告。 5 程序 PROCEDURE 產(chǎn)品研發(fā)不同階段的方法驗證 對于一個研發(fā)的產(chǎn)品來說，每個階段都要求有大量的信息來保證準(zhǔn)確的鑒別、質(zhì)量、純度和劑量。方法分析和方法驗證的信息量隨著研究階段的不同而變化，如表 51 所示 。 編號 No.： SOP 標(biāo)準(zhǔn) 操作 程序 STANDARD OPERATION PROCEDURE 名稱：分析方法驗證管 理程序 頁碼 Page: Page 7 of 21 Title: Analytical Method Validation Procedure 禁止 復(fù) 印 DO NOT COPY 表 51：產(chǎn)品開發(fā)不同階段方法驗證的要求 開發(fā)階段 方法驗證要求 工藝 /處方篩選 初始開發(fā) 工藝 /處方確定 繼續(xù)開發(fā) 試生產(chǎn) 和放大批次 繼續(xù)開發(fā) ，預(yù)驗證，和正式 驗證 DMF/ANDA 申報批、 BE 批工藝驗證 方法最后確定和完全驗證 /確認(rèn) 穩(wěn)定性考察 穩(wěn)定性指示特性驗證項目完成 批準(zhǔn)后 如果需要，重新驗證 /確認(rèn) 成立驗證小組 分析方法驗證實施前，首先成立驗證實施小組，小組成員至少包括實施部門的相關(guān)成員和 QA，并有實施部門負(fù)責(zé)人指定一名有經(jīng)驗人員作為驗證小組組長，負(fù)責(zé)組織協(xié)調(diào)驗證方案和驗證報告的撰寫，以及協(xié)調(diào)解決驗證中可能出現(xiàn)的各種偏差。 方法驗證的名稱和編號 方法驗證文件的名稱要正確描述所驗證的產(chǎn)品的全稱和內(nèi)容，驗證文件分方案和報告，方案和報告共用一個驗證編號，在編號的后面用（ P）表示方案和（ R）表示報告。驗證方案經(jīng)過批準(zhǔn)后 才能實施，驗證報告批準(zhǔn)后才能生效。 實驗開始前 成功的方法驗證開始于方法的有效開發(fā)。分析部門和各相關(guān)部門須按照方法的應(yīng)用目的評估方法的適用性。 在開始驗證研究前，應(yīng)根據(jù)方法的目的和驗證要求寫出一個準(zhǔn)備充分的驗證方案。本 SOP 中沒有明確描述試驗所要求的驗證，而由分析部門推薦。設(shè)計驗證實驗時盡量在一個實驗中包含多個驗證參數(shù)。方案中應(yīng)詳細(xì)地描述操作步驟，并應(yīng)包括預(yù)定的接受標(biāo)準(zhǔn)。方法草案完成時， 初期的方法驗證，尤其是正被討論的或不是很了解的參數(shù)，如專屬性應(yīng)盡快確定。 驗證方案的變更 若驗證已經(jīng)開始執(zhí)行，方案若需 要變更，須經(jīng) QA 批準(zhǔn)并附在方案后。任何沒有經(jīng)過 編號 No.： SOP 標(biāo)準(zhǔn) 操作 程序 STANDARD OPERATION PROCEDURE 名稱：分析方法驗證管 理程序 頁碼 Page: Page 8 of 21 Title: Analytical Method Validation Procedure 禁止 復(fù) 印 DO NOT COPY 批準(zhǔn)的方案變更要被當(dāng)作偏差處理，并在驗證報告中說明。會對驗證產(chǎn)生影響的任何變更情況均應(yīng)指明，包括偏差和所有其它能影響驗證工作質(zhì)量和真實性的各種環(huán)境因素。 驗證數(shù)據(jù)的管理 為了跟蹤所有的驗證活動，最好分配一個相應(yīng)的文件夾來說明產(chǎn)生數(shù)據(jù)的類型和位置，所有的驗證數(shù)據(jù)，包括紙質(zhì)版和電子版數(shù)據(jù)應(yīng)該被正確并完整的記錄、文件化、引用。 實驗 完成 驗證方案執(zhí)行完成后，在驗證總結(jié)報告中分析數(shù)據(jù)的結(jié)果、結(jié)論和偏差 。 驗證報告一旦批準(zhǔn)，根據(jù) 報告中的建議，方法最終被確定下來，然后發(fā) 布和使用。 對于已完成的驗證，需要實行再驗證或補充驗證，或者需要對原驗證文件進(jìn)行修改，具體操作見驗證管理制度 SOP G004. 6 各驗證項目的具體要求 DETERMINATION AND ACCEPTANCES 以下各驗證項目僅 以 液相 色譜 方法驗證為例給出驗證的實驗方法和可接受標(biāo)準(zhǔn) ， 其它分析方法如 氣相色譜方法、 紫外方法 ， 可根據(jù)方法本身 的特點 適當(dāng)設(shè)置 驗證 要求。除另有規(guī)定外，驗證方案也應(yīng)根據(jù)本規(guī)定起草。 系統(tǒng)適用性 API 系統(tǒng)適 用 性具體內(nèi)容及要求詳見 SOP QC013，制劑系統(tǒng)適 用 性具體內(nèi)容及要求詳見 SOP C047。 溶液穩(wěn)定性 溶液穩(wěn)定性 試驗 應(yīng)根據(jù)試驗方法而 設(shè)計 ，因為很多試驗是利用自動取樣器整夜運行，并且在試驗完成之前樣品在實驗室環(huán)境下已放置多個小時。 如 方案 無特殊規(guī)定， 穩(wěn)定性所需的時間最低要求 為 大于 24 小時。 實驗 方法 對照品或樣品溶液的穩(wěn)定性經(jīng)常用新配制的對照品溶液來檢驗，根據(jù)試驗方法在特定試驗條件下在規(guī)定時間點定量測定對照品或樣品溶液中的被分析物。 若 有其他要求，可根據(jù)方案進(jìn)行測定 ，如儲備溶液的穩(wěn)定性考察 。 編號 No.： SOP 標(biāo)準(zhǔn) 操作 程序 STANDARD OPERATION PROCEDURE 名稱：