重組dna技術(shù)1(已改無錯(cuò)字)
2022-12-30 23:21:28 本頁面
【正文】 ） 轉(zhuǎn)移到濾膜 （ 5） 變性解鏈 （ 6） DNA探針及雜交 （ 7） 洗脫 （ 8） 放射自顯影 （ 9） 比較分析 轉(zhuǎn)化子的分析 —— Southern雜交 鑒定克隆 Southern分子雜交 ? Southern雜交分析示例 A. DNA體外重組實(shí)驗(yàn) B. 抗生素篩選轉(zhuǎn)化子細(xì)胞 C. 培養(yǎng)突變株細(xì)胞 D. Southern雜交實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示 ， 外源目的基因已經(jīng)轉(zhuǎn)入突變株細(xì)胞中 ? 1973年 ， 由美國(guó)斯坦福大學(xué)教授 Cohn和美國(guó)加州大學(xué)教授Boyer帶領(lǐng)各自的研究組幾乎同時(shí)分別完成了 DNA體外重組 ，一舉打開了基因工程學(xué)大門 。 The Human Genome Project ? 1988年，美國(guó)國(guó)家衛(wèi)生院和能源部 迄今為止在生命科學(xué)領(lǐng)域最宏大的研究計(jì)劃 — 人類基因組計(jì)劃 ? 主要內(nèi)容是完成人體 23對(duì)染色體的全部基因的遺傳作圖和物理作圖，完成 23對(duì)染色體上 30億個(gè)堿基的序列測(cè)定 ? 以美國(guó)為主、包括英國(guó)、法國(guó)、日本和中國(guó)多國(guó)科學(xué)家參加的國(guó)際合作計(jì)劃 人類基因組計(jì)劃 基因組 ?細(xì)胞內(nèi)染色體的總和，基因組亦稱染色體組 國(guó)際合作計(jì)劃 ?美國(guó)，英國(guó)，法國(guó)，德國(guó)，日本共同參加人基因組的大規(guī)模測(cè)序 ?中國(guó) 1999年 7月正式承擔(dān)人基因組的1%的測(cè)序工作。 研究目標(biāo) 擬在 15年內(nèi)至少投入 30億美元，完成對(duì)人基因組 30億個(gè)堿基對(duì)的順序分析，完成對(duì)人基因組中全部堿基定位，并開展模式生物基因組研究。 基因組大小 生物 1013kb 大腸桿菌 酵母菌 線蟲 97 果蠅 160 小鼠 3000 人 3000 繪制 4張圖 ? 經(jīng)典遺傳圖 ? 物理圖 ? DNA序列圖 ? 基因轉(zhuǎn)錄圖 ?基因交換導(dǎo)致基因重組 重組率 ?染色體上各基因間的重組率與基因位點(diǎn)間的距離成正比 ?三點(diǎn)測(cè)交法 遺傳學(xué)圖 重組頻率 Y w v m 0 m,v % m,y % V, w % W,y % ? 人類基因組計(jì)劃主要應(yīng)用了 4方面相互配合與補(bǔ)充的研究方法和技術(shù)： 1. 用 RFLP等標(biāo)記出包含大約1 Mb的超大片段進(jìn)行
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