【正文】 的第一條人類自身染色體的全序列測定。 本章摘要 1． 該質(zhì)粒 比較小 ， 可以插入一段較長的 DNA片段 。 基因組大小 生物 1013kb 大腸桿菌 酵母菌 線蟲 97 果蠅 160 小鼠 3000 人 3000 繪制 4張圖 ? 經(jīng)典遺傳圖 ? 物理圖 ? DNA序列圖 ? 基因轉(zhuǎn)錄圖 ?基因交換導(dǎo)致基因重組 重組率 ?染色體上各基因間的重組率與基因位點(diǎn)間的距離成正比 ?三點(diǎn)測交法 遺傳學(xué)圖 重組頻率 Y w v m 0 m,v % m,y % V, w % W,y % ? 人類基因組計(jì)劃主要應(yīng)用了 4方面相互配合與補(bǔ)充的研究方法和技術(shù)： 1. 用 RFLP等標(biāo)記出包含大約1 Mb的超大片段進(jìn)行定位作圖 2. 用 RFLP把超大片段分割成10多個包含 100 kb的大片段 ，做出它們的物理圖 3. 用酵母人工染色體 (YACs）或其他載體構(gòu)建包含其中小片段的一系列重疊的克隆 ，約 ～ Mb 4. 對小片段逐個進(jìn)行測序 ，進(jìn)而實(shí)現(xiàn)對整個染色體的測序和作圖 ? 1992年，酵母 3號染色體 DNA的全部 315 357個堿基序列的測定，這是人類完成的第一條真核生物染色體 DNA的全序列。 ? 聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng) （ PCR） ?變性、退火、延伸三步曲 ?變性 ： 雙鏈 DNA解鏈成為單鏈 DNA ?退火 ： 部分引物與模板的單鏈 DNA的特定互補(bǔ)部位相配對和結(jié)合 ?延伸 ： 以目的基因?yàn)槟０澹铣苫パa(bǔ)的新 DNA鏈 ? 聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng) （ PCR） ?每一輪聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)可使目的基因片段增加一倍 ?30輪循環(huán)可獲得 —— 230（ 109)個基因片段 PCR(多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng) ) ? PCR技術(shù)的發(fā)明 ? PCR的發(fā)明是 DNA操作技術(shù)的革命 ? 美國 Mullis教授 開汽車時的聯(lián)想 逶迤崎嶇的山路 —— DNA雙螺旋 行駛的汽車 —— 一小段 DNA引物 …… 1988年發(fā)明了 PCR技術(shù) 1993年獲得諾貝爾獎 ? 基因重組和克隆操作最重要的工具是：