食品微生物檢驗實驗室操作技術(shù)要求(已改無錯字)
2022-12-11 09:48:42 本頁面
【正文】 間歇滅菌方 法 ，某些物質(zhì)經(jīng)高壓蒸氣滅菌容易破壞，可用此法滅菌 。 （ 1）將欲滅菌物品置于鍋內(nèi)，蓋上頂蓋，打開排水口，使器內(nèi)余水排盡。 （ 2）關(guān)閉排水口，打 開進氣門，根據(jù)需要消毒 10～ 20min。 （ 3）滅菌完畢關(guān)閉進氣門，取出物品待冷至室溫溫度，放入 37℃ 溫箱過夜，次日仍按上述方法 消 毒，如此三次，即可達到滅菌目的。 2．血清凝固器使用方法，培養(yǎng)基中含有血清或雞蛋特殊成份時，因高熱會破壞其營養(yǎng)成份，故用低溫，可使血清凝固，又可達到滅菌目的 。 (1) 在使用該法滅菌的血清等分裝時，需嚴格遵守?zé)o菌操作，試管、平皿也經(jīng)滅菌后使用 。 (2)將培養(yǎng)基按要求使成斜面或高層，加足水后，接上電源，升溫 75～ 90℃ 1h 滅菌，放 37℃ 溫箱過夜，再如此滅菌三次 。 3． 煮沸消毒：可用 煮鍋或煮沸消毒器，水沸騰后再煮 5～ 15 min，也可在水中加入 2﹪石炭酸煮沸 5 min，加入 ﹪甲醛 , 80℃ 煮 60 min 均可達到滅菌目的 , 但選用煮沸消毒的增消劑時 , 應(yīng)注意對物品的腐蝕性 . 4． 滅菌處理 :滅菌后物品 ,按正常情況已屬無菌 ,從滅菌器中取出應(yīng)仔細檢查放置 ,以免再度污染 。 (1) 物品取出 ,隨即檢查包裝的完整性 ,若有破壞或棉塞脫掉 ,不可作為無菌物品使用 。 (2) 取出的物品 ,如為包裝有明顯的水浸者 ,不可作為無菌物品使用 。 (3) 培養(yǎng)基或試劑等 ,應(yīng)檢查是否符合達到滅菌后的色澤或狀態(tài) ,未達 到者應(yīng)廢棄 。 (4) 啟閉式容器 ,在取出時應(yīng)將篩孔關(guān)閉 。 (5) 取出的物品掉落在地或誤放不潔這處 ,或沾有水液 ,均視為受到污染 ,不可作為無菌物品使用 。 (6) 取出的合格滅菌物品 ,應(yīng)存放于貯藏室或防塵柜內(nèi) ,嚴禁與未滅菌物品混放 。 (7) 凡屬合格物品 ,應(yīng)標有滅菌日期及有效期限 。 (8) 每批滅菌處理完成后 ,記錄滅菌品名、數(shù)量、溫度、時間、操作者。 四、有毒有菌污物處理要求 微生物實驗所用實驗器材、培養(yǎng)物等未經(jīng)消毒處理，一律不得帶出實驗室。 1. 經(jīng)培養(yǎng)的污染材料及廢棄物應(yīng)放在嚴密的容器或鐵絲筐內(nèi)，并 集中 存放在指定地點，待統(tǒng)一進行高壓滅菌 。 2. 經(jīng)微生物污染的培養(yǎng)物，必須經(jīng) 121℃ 30min 高壓滅菌。 3. 染菌后的吸管，使用后放入 5﹪煤酚皂溶液或石炭酸液中，最少浸泡 24h（消毒液體不得低于浸泡的高度）再經(jīng) 121℃ 30 min 高壓滅菌。 4. 涂片染色沖洗片的液體，一般可直接沖入下水道，烈性菌的沖洗液必須沖在燒杯中，經(jīng)高壓滅菌后方可倒入下水道，染色的玻片放入 5﹪煤酚皂溶液中浸泡 24 h 后，煮沸洗滌。做凝集試驗用的玻片或平皿，必須高壓滅菌后洗滌。 5. 打碎的培養(yǎng)物，立即用 5﹪煤酚皂溶液或石炭酸液噴灑和浸 泡被污染部位，浸泡半小時后再擦拭干凈。 污染的工作服或進行烈性試驗所穿的工作服、帽、口罩等，應(yīng)放入專用消毒袋內(nèi)，經(jīng)高壓滅菌后方能洗滌。 五、培養(yǎng)基制備要求 培養(yǎng)基制備的質(zhì)量將直接影響微生物生長。因為各種微生物對其營養(yǎng)要求不完全相同，培養(yǎng)目的的不同，各種培養(yǎng)基制備要求如下： 1．根據(jù)培養(yǎng)基配方的成分按量稱取，然后溶于蒸餾水中，在使用前對應(yīng)用的試劑藥品應(yīng)進行質(zhì)量檢驗。 2． PH 測定及調(diào)節(jié)： PH 測定要在培養(yǎng)基冷至室溫時進行，因在熱或冷的情況下，其 PH 有一定差異，當(dāng)測定好時，按計算量加入堿或酸混勻后，應(yīng)再測試一次 。培養(yǎng)基 PH 值一定要準確，否則會影響微生物的生長或影響結(jié)果的
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