第十一章動物細胞大規(guī)模培養(yǎng)教學內(nèi)容(已改無錯字)
2022-12-06 13:59:09 本頁面
【正文】 gG 14 20 86 2 IgM 70 127 295 3 IgG 9 10 73 4 IgG 28 30 100 5 IgG 60 76 260 6 IgM 20 25 112 7 IgG 30 38 200 8 IgG 120 100 350 圖 113 中空纖維反應器示意圖 細胞 培養(yǎng)基入口 培養(yǎng)基出口 中空纖維管生物反應器 中空纖維管生物反應器如圖 113所示 ， 它的 用途較廣 ， 既可培養(yǎng)懸浮生長的細胞 ， 又可培養(yǎng)貼壁依賴性細胞 ， 細胞的密度最高可達 109/ml數(shù)量級 。 如果控制系統(tǒng)不受污染 ， 能長期運轉(zhuǎn) 。 已用這種反應器培養(yǎng)過的細胞型和生產(chǎn)的分泌產(chǎn)物如表 1110所示 。 生長的細胞型 雜交瘤細胞、淋巴細胞、肝癌細胞、結腸癌細胞、胚胎細胞、乳腺組織細胞、小鼠細胞、大鼠細胞、成纖維細胞、垂體腫瘤細胞、CHO細胞、 BHK2細胞、肺細胞等 分泌的產(chǎn)物 IgG、 IgM、 IgA、干擾素、激素、尿激酶、蛋白質(zhì) C、病毒蛋白、乙型肝炎表面抗原、 T抑制因子、促細胞生長素、白細胞介素等 空氣與 CO2出口 空氣與 CO2入口 中空纖維管生物反應器已進入工業(yè)生產(chǎn) ， 主要用于 培養(yǎng)雜交瘤細胞生產(chǎn)單克隆抗體 。 （ 重點掌握 ） 通氣攪拌反應器 通氣攪拌反應器有哪些型式？ 問題 流化床生物反應器 流化床生物反應器的基本原理類似于流態(tài)床化學反應器 ， 不同的是 ， 流態(tài)化的固體是帶有 細胞 的微粒 。 培養(yǎng)液通過反應器垂直向上循環(huán)流動不斷提供給細胞必要的營養(yǎng)成分 ， 使細胞得以在微粒中生長；同時 ， 不斷地加入新鮮的培養(yǎng)液 ， 并不斷地排除培養(yǎng)產(chǎn)物或代謝產(chǎn)物 。 圖 117為生產(chǎn)用 CFIMMOTM流化床生物反應器的示意圖 ， 這種反應器的傳質(zhì)性能很好 ， 并在循環(huán)系統(tǒng)中采用 膜氣體交換器 ， 能快速提供給高密度細胞所需的氧 ， 同時排除代謝產(chǎn)物；反應器中的液體流速足以使細胞微粒懸浮卻不會損壞脆弱的細胞 。 由于流化床生物反應器滿足了高密度細胞培養(yǎng) 、 使高產(chǎn)量細胞長時間停留在所應器中 、 優(yōu)化細胞生長與產(chǎn)物合成的環(huán)境等細胞培養(yǎng)的要求 ， 流化床生物反應器既可用于貼壁依賴性細胞的培養(yǎng) ， 又可用于非貼壁依賴性細胞的培養(yǎng) 。 表 1111為流化床生物反應器達到的細胞密度 。 氣體交換 氧氣 回流 收獲 營養(yǎng)液 泵 反應塔 加熱器 PH 傳感器 T DO CO2 圖 117 生產(chǎn)用 CFIMMOTM流化床生物反應器示意圖 無泡沫攪拌生物反應器（ 了解 ） 表 1111流化床生物反應器與其它方法培養(yǎng)達到的細胞比較 培養(yǎng)類型 細胞類型 細胞密度（個 /ml） 流化床 雜交瘤 *108 貼壁依賴性細胞 *108 恒化器 雜交瘤 2*106 微載體攪拌釜 貼壁依賴性細胞 *1072*107 四、動物細胞培養(yǎng)技術 動物細胞無論是貼壁培養(yǎng)或是懸浮培養(yǎng) ， 均可分為 分批式 、 流加式 、 半連續(xù)式 、連續(xù)式 等多種培養(yǎng)方式 。 分批式培養(yǎng) 定義 分批式培養(yǎng)是指先將細胞和培養(yǎng)液一次性裝入反應器內(nèi)進行培養(yǎng) ， 細胞不斷生長 ， 同時產(chǎn)物也不斷形成 ， 經(jīng)過一段時間的培養(yǎng)后 ， 終止培養(yǎng) 。 在細胞分批培養(yǎng)過程中 ， 不向培養(yǎng)系統(tǒng)補加營養(yǎng)物質(zhì) ， 而只向培養(yǎng)基通入氧 ， 能夠控制的參數(shù)只有 PH、 溫度和通氣量 ， 因此細胞所處的生長環(huán)境隨著營養(yǎng)物的消耗和產(chǎn)物 、 副產(chǎn)物的積累時刻都在發(fā)生變化 ， 不能使細胞自始至終處于最優(yōu)的條件下 ， 因而分批培養(yǎng)并不是一種很好的培養(yǎng)方式 。 分批培養(yǎng)過程的持征如圖 118所示 。 0 時間 分批 圖 118 分批式培養(yǎng)過程的特征 營養(yǎng)物 廢產(chǎn)物 PH、溫度、 DO 0 培養(yǎng)時間（ d） 細胞密度 圖 119分批式培養(yǎng)的生長曲線 對數(shù)生長期 減速期 平穩(wěn)期 衰退期 延滯期 為什么說采用分批式培養(yǎng)細胞效果不佳？ 問題 細胞分批式培養(yǎng)的生長曲線如圖 119所示 。 在分批式培養(yǎng)過程中 ， 細胞的生長可分為延滯期 、 對數(shù)生長期 、 減速期 、 平穩(wěn)期和衰退期等五個階段 。 流加式培養(yǎng)（ 補料分批式 ） 定義 流加式培養(yǎng)是指先將一定量的培養(yǎng)液裝入反應器 ， 在適宜的條件
教學課件相關推薦
鄂ICP備17016276號-1