呋喃妥因代謝物ahdelisa檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)(已改無(wú)錯(cuò)字)
2023-04-23 13:45:16 本頁(yè)面
【正文】 和需用板條的溫度回升至室溫（2025℃）。使用之后立即將所有試劑放回28℃。在ELISA分析中的再現(xiàn)性，很大程度上取決于洗板的一致性，正確的洗板操作是ELISA測(cè)定程序中的要點(diǎn)。在所有恒溫孵育過(guò)程中，避免光線照射，用蓋板膜蓋住微孔板。操作步驟：將所需試劑從冷藏環(huán)境中取出，置于室溫（2025℃）平衡30min以上，注意每種液體試劑使用前均須搖勻。取出需要數(shù)量的微孔板，將不用的微孔板放入自封袋，保存于28℃。洗滌工作液在使用前也需回溫。編號(hào)：將樣本和標(biāo)準(zhǔn)品對(duì)應(yīng)微孔按序編號(hào)，每個(gè)樣本和標(biāo)準(zhǔn)品做2孔平行，并記錄標(biāo)準(zhǔn)孔和樣本孔所在的位置。加標(biāo)準(zhǔn)品/樣本：加入標(biāo)準(zhǔn)品/樣本50ml 到對(duì)應(yīng)的微孔中，然后加入抗體工作液50ml/孔，輕輕振蕩混勻，用蓋板膜蓋板后置37℃避光環(huán)境中反應(yīng)30min。洗板：小心揭開(kāi)蓋板膜，將孔內(nèi)液體甩干，用洗滌工作液（見(jiàn)配液8）250ml/孔，充分洗滌4－5次，每次間隔10s，用吸水紙拍干（拍干后未被清除的氣泡可用未使用過(guò)的槍頭戳破）。加酶標(biāo)二抗：加入酶標(biāo)二抗100ml/孔，輕輕振蕩混勻，用蓋板膜蓋板后置37℃避光環(huán)境中反應(yīng)30min，取出重復(fù)洗板步驟6。顯色：加入底物液A液50ml/孔，再加底物液B液50ml/孔，輕輕振蕩混勻，用蓋板膜蓋板后置37℃避光環(huán)境中反應(yīng)15min（見(jiàn)注意事項(xiàng)8）。測(cè)定：加入終止液50ml/孔，輕輕振蕩混勻，設(shè)定酶標(biāo)儀于450nm處（建議用雙波長(zhǎng)450/630nm檢測(cè)，請(qǐng)?jiān)?min內(nèi)讀完數(shù)據(jù)），測(cè)定每孔OD值。(若無(wú)酶標(biāo)儀，則不加終止液用目測(cè)法可進(jìn)行判定)。十、結(jié)果判定結(jié)果判定有兩種方法，粗略判定可用第1種方法，定量判定用第2種方法。注意樣本吸光值與呋喃妥因代謝物的含量成負(fù)相關(guān)。用樣本的平均吸光度值與標(biāo)準(zhǔn)值比較即可得出其濃度范圍(ppb)。，標(biāo)準(zhǔn)品吸光度值分別是： ；； ； ； ； 。；。定量分析（1）百分吸光率的計(jì)算，標(biāo)準(zhǔn)品或樣本的百分吸光率等于標(biāo)準(zhǔn)品或樣本的百分吸光度值的平均值（雙孔）除以第一個(gè)標(biāo)準(zhǔn)（0標(biāo)準(zhǔn)）的吸光度值，再乘以100%，即百分吸光度值（%）＝ B 100% B0 B—標(biāo)準(zhǔn)溶液或樣本溶液的平均吸光度值B0—0ppb標(biāo)準(zhǔn)溶液的平均吸光度值（2）標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制與
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