【正文】 AT序列。 ? TATA框的主要作用 ：是使轉錄精確地從起始位點開始，其他的上游啟動子元件： 主要調控轉錄起始頻率和維持基因轉錄，特別是 CAAT框的作用相對較大。 ?基因轉錄還需要 RNA聚合酶與啟動子的相互作用。在轉錄開始之前，首先要形成 RNA聚合酶和啟動子的 轉錄起始復合物 。絕大多數(shù) 真核生物的細胞有 3種類型 RNA聚合酶 ，即RNA聚合酶 Ⅰ 、 RNA聚合酶 Ⅱ 和 RNA聚合酶 Ⅲ 。 ?其中 RNA聚合酶 Ⅱ 負責作用于多種基因的轉錄。在細胞核中存在一些 轉錄調節(jié)蛋白因子為 RNA聚合酶與啟動子結合所必需 ，如果 缺乏這些因子 ，純化的 RNA聚合酶 Ⅱ 并不能識別啟動子序列， 轉錄只能起始于任意位置。 ?從不同動物細胞，甚至從酵母細胞分離的基本轉錄因子具有相似的活性。 基本轉錄因子負責識別啟動子序列中 TATA框 ，并與 RNA聚合酶 Ⅱ 一起形成轉錄起始復合物，進而起始轉錄。 ?已經經過鑒定的 普通轉錄因子 有 TFⅡ D、 TFⅡ B、 TFⅡ F、TFⅡ A等。按一定順序參與形成轉錄起始復合物。 ? RNA聚合酶 Ⅰ 和 RNA聚合酶 Ⅲ 分別負責 18S、 28S核糖體RNA和 5S核糖體 RNA， tRNA基因的轉錄，也需要多種蛋白因子參與，這些轉錄因子也必須與啟動子結合。 ?增強子 (enhancer)指增加同它連鎖的基因轉錄頻率的 DNA序列。增強子是通過啟動子來增加轉錄的。 ?有效的增強子可以位于基因的 5’端，也可位于基因的 3’端，有的還可位于基因的內含子中。 ?增強子的效應很明顯，一般能使基因轉錄頻率增加 10～200倍，有的甚至可以高達上千倍。 ?增強子的作用同增強子的取向 (5’3’或 3’5’)無關，甚至遠離靶基因達幾千 kb也仍有增強作用。 ?有一類增強子對基因的轉錄起抑制作用，稱為 沉默子(suencer)。當轉錄因子與沉默子結合時可抑制順式調控元件相連的啟動子的轉錄。 增強子的分類 ?同一增強子在有的細胞中是 順式調控元件 ，但在其他細胞中可能是 沉默子 ，這是 由細胞中其他轉錄因子決定 的。 ?由于增強子中有的能夠 調節(jié)基因表達的時間 ； ?有的能夠 調節(jié)基因表達的組織和細胞特異性 ； ?有的 具有前述兩種功能 ； ?還有的增強子 與激素或其他分子相關 。 ?根據(jù)增強子的 功能特征 可以將其分為以下幾類。 (1)時間特異性增強子 ?在胚胎發(fā)育中存在一種時間特異性增強子。 ?在 兩棲類 胚胎發(fā)育中存在最典型的基因活性的時間開關，即 囊胚中期轉換 (MBT)。 MBT類型的基因由于含有一種時間特異性增強子，在囊胚中期被特異性激活。兩棲類的這種增強子位于 MBT基因閱讀框 5’末端上游約 700bp。 ?人 β珠蛋白基因的時間特異性增強子，位于 3’末端 ，AATAAAA序列下游 600900bp之間。 ?通常 γ珠蛋白基因在 人胚胎時期轉錄 ，如果把含有 β珠蛋白基因的時間特異性增強子的 DNA片段移到 γ珠蛋白基因的附近，在 β珠蛋白基因的時間特異性增強子的作用下，γ珠蛋白基因 可在成體中表達 。 (2)組織特異性增強子 ?調節(jié) β珠蛋白基因 表達的增強子，除了 3’末端的臨時性特異性增強子 之外，還有其他 兩種增強子 ，由它們 調節(jié) β珠蛋白基因表達的 組織特異性 。 ?其中一種增強子位子 β珠蛋白基因的第三個內含子序列內，其作用使 β珠蛋白基因的轉錄只能在紅細跑發(fā)生 。 ?另一種增強子事實上是 “主”增強子 ，所有位于第 11號染色體上的人 β珠蛋白基因家族的轉錄都由它調控。如果 缺失此增強子區(qū)將引起所有 β珠蛋白基因家族的基因沉默 。 “主”增強子的功能可能是使整個轉錄調節(jié)因子區(qū)域打開。 (3)胰腺增強子 ?有時基因的活性在不同類型的相鄰細胞中由不同的增強子所調控。 ?如 胰腺外分泌蛋白 胰凝乳蛋白酶、淀粉酶、胰蛋白酶基因的增強子，與 內分泌蛋白 胰島素基因的增強子，雖然都位于各自基因 5’末端旁的序列中，卻是不相同的兩類增強子。 ?利用報道基因可對某一特定增強子的功能進行研究。 氯霉素乙配轉移酶 (CAT)的基因活性很容易檢測，同時在哺乳動物中不表達，可作為哺乳動物的報道基因。 (3)胰腺增強子 ? Walker等 (1983)分別構建這些基因 5’末端旁序列和 cat的重組基因，再將不同的重組基因分別轉人 3種受體細胞 ： ?①不產生胰島素和胰凝乳蛋白酶的卵巢細胞； ?②分泌胰島素的胰腺細胞系； ?③一種產生外分泌蛋白的胰腺細胞系。 ?說明胰腺外分泌細胞和內分泌細胞的基因表達 由不同的增強子調控 。 受體細胞 外分泌蛋白基因 5’末端旁序列 + cat 內分泌蛋白基因 5’末端旁序列 + cat 卵巢細胞 不表達 不表達 分泌胰島素 的胰腺細胞系 不表達 表達 產生外分泌蛋 白的胰腺細胞系 表達 不表達 (4)卵黃蛋白增強子 ?果蠅卵黃蛋白是在雌性成體果蠅的特殊細胞中才大量合成的一種蛋白。果蠅有兩種卵黃蛋白基因， yp1和 yp2，他們在 DNA上的位置鄰近但是轉錄的方向相反。 ?在卵巢和脂肪體中卵黃蛋白基因都轉錄，但是他們能用限制性內切酶分解，在共同的 5’末端分開。如果將這兩種基因分別與報道基因一起構建表達質粒，再導入果蠅 DNA，可以檢測他們轉錄的性別和時間特異性。 ?卵黃蛋白基因僅在成體的雌性果蠅中表達。同時 yp2的mRNA僅在 卵巢組織 中檢測到，而 yp1得 mRNA僅在 脂肪體 中表達。 ?說明 卵黃蛋白基因有兩個增強子 ，而且都位于 5’末端，分別負責在卵巢和在脂肪體中的轉錄，使兩個基因在兩種細胞中正常轉錄。增強子對于基因表達的特異性有決定性作用。 脂肪體 卵巢組織 （三）轉錄因子 ?轉錄因子是 基因調控的反式作用因子 ，是能與啟動子和增強子結合的蛋白質。 ?轉錄因子既含有 特異性 DNA結合域 ，又含有能與啟動子或增強子結合并刺激基因轉錄的 結構域 。通過相互作用使任何一種細胞中只有很少的一部分啟動子發(fā)生轉錄。 ?轉錄因子可分為通用 轉錄因子 和 特殊轉錄因子 ，即兩類基因調節(jié)蛋白。 ?通用轉錄因子 ：指與啟動子 TATA框序列結合的蛋白質，他們與 RNA聚合酶 II共同裝配成為轉錄起始復合物，以啟動轉錄。 ?特殊轉錄因子 ：能識別特殊的 DNA調節(jié)序列并與其結合，或與 RNA聚合酶和其他轉錄因子結合以行駛功能。 (四 )激素應答成分 ?在發(fā)育過程中經常出現(xiàn)基因表達的協(xié)同調節(jié)現(xiàn)象。 ?當一種類型的細胞同時表達幾種細胞特異性蛋白，或者在不向類型的細胞中由同一種激素誘導幾種基因表達時，這種基因表達的協(xié)同調節(jié)現(xiàn)象即發(fā)生。 ?具有轉錄因子活性的類固醇激素特異性受體以非活性狀態(tài)存在時與一種熱體克蛋白結合，當激素與受體蛋白結合后熱體克蛋白脫離，同時受體構象發(fā)生改變。形成的激素 受體復合物進入細胞核并與特異性 DNA序列結合，激活啟動子調節(jié)轉錄。 ?能夠與激素受體蛋白特異性結合的 DNA序列稱為激素效應元件，它們既可以是增強子，也可以是啟動子。 (五 )免疫球蛋白輕鏈基因的轉錄調控 ?在每一個有機體中，絕大多數(shù)類型的細胞都具有相同的基因組，但是 淋巴細胞例外 。 ?在與抗原接觸之前，處于休止期的 B淋巴細胞就合成免疫球蛋白分子，但并不分泌。每一種 B淋巴細胞本身具有產生 107種以上不同的抗體分子的能力，但由于 基因重排 ，每個細胞僅僅只合成一種抗體分子，并且將其置于細胞膜表面作為抗原受體。 ?當 外來抗原 與 淋巴結 或 脾 中的淋巴細胞膜上抗原受體結合后通過信號傳導調控基因表達，使細胞分裂和進一步分化。 ?第三章 細胞分化的分子機制 —— 轉錄后的調控 真核生物： DNA → nRNA （核） → mRNA （質） 第一節(jié) RNA加工水平的調控 大多數(shù)編碼細胞特異性蛋白質的基因選擇性表達的調控主要發(fā)生在轉錄水平，但轉錄后調控對決定蛋白質結構和功能重要 （一）、異質性核 RNA（ hnRNA） 由于轉錄模板不同， nRNA的長度和性質差別較大 分子量： nRNA﹥ mRNA； 半壽期： nRNA﹤ mRNA； 復雜性： hnRNA﹥ mRNA，核苷酸序列多樣性 一、 mRNA前體和 mRNA （二）、前體 mRNA的加工對 早期發(fā)育的調控 海膽： ?囊胚期與長腕幼蟲期細胞 nRNA相同； ?囊胚期處于轉錄激活狀態(tài)的 DNA序列與長腕幼蟲