蛋白質(zhì)的分離純化-閱讀頁
2024-11-04 05:30本頁面
【正文】 兩個方面的特點： a.在化學結構上與被抑制的底物分子或底物的過渡狀態(tài)相似。,第四十六頁，共六十七頁。)活性中心外的某一類或幾 類必需基團反響,第四十七頁，共六十七頁。 Ｐ374 結構式：磷?；瘎┡cDFP P374 反響式：磷?；瘎┡c膽堿酯酶形成磷?；憠A酯酶 抑制機理：與蛋白酶及酯酶活性中心Ser的—OH形成磷脂鍵。j236。 解毒劑：PAM〔解磷定〕可以把酶上的磷?；鶊F除去。,②、有機汞、有機砷化合物 抑制機理：使酶的巰基烷化 P375 ：對氯汞苯甲酸〔PCMB〕與巰基酶的反響 毒理：主要與復原型硫辛酸輔酶反響，抑制丙酮酸氧化酶系統(tǒng)(x236。 解毒劑：二巰基丙醇〔BAL〕、Cys、GSH等過量的巰基化合物。,③重金屬 Ag、Cu、Hg、Cd、Pb能使大多數(shù)酶失活，EDTA可解除。 ⑤氰化物、硫化物、CO 與含鐵卟啉的酶中的Fe2+結合(ji233。)，阻抑細胞呼吸 ⑥、青霉素 不可逆抑制糖肽轉肽酶,第五十頁，共六十七頁。 ① Ks型不可逆抑制劑〔親和標記試劑(sh236。)，親合修飾試劑(sh236。)〕 〔affinity labeling reagent) 具有與底物相似的結構，同時還帶有一個能與酶活性中心或 活性中心外的必需基團進行化學反響的活潑基團。,② Kcat型不可逆抑制劑〔自殺性底物, suicide substrate〕 具有與底物相似的結構，不僅能與酶結合，而且潛 伏的反響基團〔latent reactive group〕能被酶催 化而活化，并與酶活性中心必需(b236。, 可逆抑制劑,★競爭性抑制劑〔Competitive inhibition〕 許多代謝類似物都是競爭性抑制劑，可用作 抗菌藥和抗癌藥物(y224。) ★抗癌藥 : 氨基葉酸、阿拉伯糖胞苷、5氟尿嘧啶等。,★磺胺類藥物及其作用機理(jī lǐ) 對氨基苯磺酰胺或其衍生物 對氨基苯甲酸的結構類似物，競爭性抑制細菌的二氫葉酸合成酶活性,第五十四頁，共六十七頁。 suān),嘌呤(pi224。ng)核苷酸,二氫葉酸復原酶,一碳單位,磺胺類藥物,磺胺類藥物的抗菌機理：,TMP,第五十五頁，共六十七頁。ow249。,研究抑制劑對酶的作用有重大的意義： 〔1〕藥物作用機理和抑制劑型藥物的設計與開發(fā)； 〔2〕了解生物體的代謝途徑(tng)，進行人為調(diào)控或代謝控制發(fā)酵； 〔3〕通過抑制劑試驗研究酶活性中心的構象及其化學功能基團，不僅可以設計藥物，而且也是酶工程和化學修飾酶、酶工業(yè)的根底。,1．最適溫度及影響(yǐngxiǎng)因素 ①提高溫度，加快反響速度。 溫度系數(shù)Q10：溫度升高10℃，反響速度與原來的反響速度之比，大多數(shù)酶的Q10一般為1~2。 最適溫度不是酶的特征常數(shù)，它與底物種類、作用時間、pH、離子強度 等因素有關。ng)的影響,第五十八頁，共六十七頁。,酶的穩(wěn)定性溫度 在某一時間范圍(f224。i)內(nèi)，酶活性不降低的最高溫度稱該酶的穩(wěn)定性溫度。 酶的保存： ①液體酶制劑可以利用上述5種因素中的幾種，低溫短暫保存。,第六十頁，共六十七頁。 ②影響酶和底物分子解離狀態(tài)(zhu224。i)，尤其是酶活性中心的解離狀態(tài)(zhu224。i)，最終影響ES形成。,五、 pH對酶促反響速度(fǎn y236。 d249。,2．酶的最適pH和穩(wěn)定性pH 最適pH：使酶促反響速度(fǎn y236。 d249。,第六十二頁，共六十七頁。 幾種酶的最適pH，見P379表97。nzh236。,第六十三頁，共六十七頁。 ★不同離子之間有拮抗作用和可替代作用，如Na+與K+、Mg2+與Ca2+之間常常拮抗，但Mg2+與Mn2+?？商娲?。ng)的影響,第六十四頁，共六十七頁。 ②金屬螯合劑〔EDTA〕能去除酶中重金屬離子(l237。 蛋白酶對酶原的激活,第六十五頁，共六十七頁。,內(nèi)容(n232。ng)總結,第9章 酶促反響動力學。當[S]Km時。 LineweaverBurk 雙倒數(shù)作圖法。P374 反響式：磷酰化劑與膽堿酯酶形成磷?；憠A酯酶。 簡單(jiǎndān)有機分子的激活
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