臨床醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)考試輔導(dǎo)醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)-閱讀頁
2024-10-13 14:03本頁面
【正文】 必要時(shí)可將標(biāo)本經(jīng)過適當(dāng)稀釋后重復(fù)測(cè)定。原理為先用抗小分子的特異性抗體包被固相，然后同時(shí)加入待測(cè)樣本和酶標(biāo)記的小分子，兩種小分子競(jìng)爭(zhēng)與固相上的抗小分子的特異性抗體結(jié)合，溫育一定時(shí)間后洗滌，加入酶底物顯色。（二）檢測(cè)抗體的方法：最常用的方法，屬非競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合試驗(yàn)。多用于檢測(cè)IgG類型抗體。其原理及操作步驟類似雙抗體夾心法，也可采用一步法。臨床上乙型肝炎表面抗體的測(cè)定常用此法。競(jìng)爭(zhēng)抗體與待測(cè)抗體的特異性及親和力越接近，則測(cè)定的可靠性越強(qiáng)。原理：先將針對(duì)IgM的二抗包被于固相載體，加入待測(cè)標(biāo)本，其中IgM類抗體可被固相抗體捕獲，再加入特異性抗原，其與固相上捕獲的IgM抗體結(jié)合后，加入酶標(biāo)記特異性抗原的抗體，形成固相二抗IgM抗原酶標(biāo)記抗體復(fù)合物，加底物顯色后，即可對(duì)待測(cè)標(biāo)本中IgM是否存在及含量進(jìn)行測(cè)定。均相酶免疫測(cè)定主要用于藥物和小分子物質(zhì)的檢測(cè)。實(shí)戰(zhàn)演練目前酶免疫技術(shù)中應(yīng)用較廣、提純較簡便的酶是『正確答案』D『答案解析』HRP是目前在酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)中應(yīng)用最為廣泛的標(biāo)記用酶。以下關(guān)于酶標(biāo)記抗體或抗原不正確的是，因?yàn)橛坞x的酶或未標(biāo)記上的抗原或抗體成分在測(cè)定過程中被洗掉『正確答案』C『答案解析』每批制備的酶標(biāo)志物都要進(jìn)行質(zhì)量和標(biāo)記率的鑒定，質(zhì)量鑒定包括酶活性和抗體（抗原）的免疫活性鑒定。沉淀線經(jīng)生理鹽水反復(fù)漂洗后，滴加酶的底物溶液，若在沉淀線上能顯色，則表示酶標(biāo)記物中的酶活性仍保留。關(guān)于酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）錯(cuò)誤的是『正確答案』A『答案解析』酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）屬于固相酶免疫測(cè)定。酶免疫技術(shù)中懸浮在溶液中具有液相反應(yīng)速率的固相載體是『正確答案』D『答案解析』酶免疫技術(shù)中懸浮在溶液中具有液相反應(yīng)速率的固相載體是磁性微粒。ELISA技術(shù)中，最常用來檢測(cè)抗體的方法是『正確答案』B『答案解析』ELISA技術(shù)中，最常用來檢測(cè)抗體的方法是間接法。該法是針對(duì)抗原分子上兩個(gè)不同且空間距離較遠(yuǎn)的決定簇的兩種單克隆抗體，即包被使用一種單抗，酶標(biāo)記使用另一種單抗。但當(dāng)待測(cè)抗原濃度過高時(shí)，過量的抗原可分別同固相抗體和酶標(biāo)抗體結(jié)合而抑制夾心復(fù)合物的形成，出現(xiàn)鉤狀效應(yīng)（hookeffect），顯色降低，嚴(yán)重時(shí)可出現(xiàn)假陰性結(jié)果。這是應(yīng)用此法必須要注意的問題。雙位點(diǎn)一步法鉤狀效應(yīng)產(chǎn)生是因?yàn)椤赫_答案』E『答案解析』雙位點(diǎn)一步法鉤狀效應(yīng)產(chǎn)生是因?yàn)闃?biāo)本中的抗原濃度過高。關(guān)于ELISA競(jìng)爭(zhēng)法的敘述中，正確的是『正確答案』C『答案解析』關(guān)于ELISA競(jìng)爭(zhēng)法的敘述中，正確的是被測(cè)物含量多則標(biāo)記物被結(jié)合的機(jī)會(huì)少。臨床上檢測(cè)IgM抗體常用的ELISA方法是『正確答案』E『答案解析』捕獲法，又稱反向間接法。酶免疫技術(shù)分為兩類酶免疫測(cè)定，它們是『正確答案』C『答案解析』酶免疫技術(shù)分為兩類酶免疫測(cè)定，它們是酶免疫組化和酶免疫測(cè)定。半抗原一般用均相酶免疫測(cè)
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