【正文】 ，還需將培養(yǎng)基的 pH 調至 中性或微堿性 ． （ 2）制備乳酸菌的培養(yǎng)基過程中，對培養(yǎng)皿滅菌的常用方法是 干熱滅菌法 ．倒平板 時培養(yǎng)基的溫度不能太低，原因是 溫度太低會導致培養(yǎng)基凝固，無法鋪展均勻 ；待平板冷凝后，要將平板倒置，其目的是 防止平板冷凝后，培養(yǎng)皿蓋上凝結的水珠落入培養(yǎng)基中造成污染 ． （ 3）該實驗小組對乳酸菌接種所采用的方法是 稀釋涂布平板法 ．根據三個平板中菌落數，可推測原酸奶中乳酸菌的濃度為 109 個 /mL，該方法測定的乳酸菌的含量和實際值相比，一般 偏小 （填 “偏大 ”或 “偏小 ”）． （ 4）為了使測量結果更加準確，該實驗對照組的設置是 另增設一組培養(yǎng)基，接種等量滅菌的生理鹽水 ． 【考點】 微生物的分離 和培養(yǎng)． 【分析】 配制乳酸菌分離培養(yǎng)基：制備該培養(yǎng)基的步驟是：計算 → 稱量 → 溶化 → 滅菌 → 倒平板．該培養(yǎng)基的化學成分包括碳源、氮源、水、無機鹽四類營養(yǎng)成分，在培養(yǎng)該細菌的培養(yǎng)基中還需要添加維生素．培養(yǎng)基常用的滅菌方法是高壓蒸汽滅菌法． 分離微生物常用的方法： ① 平板劃線法：通過接種環(huán)在瓊脂固體培養(yǎng)基表面連續(xù)劃線的操作，將聚集的菌種逐步稀釋分散到培養(yǎng)基表面． ② 稀釋涂布平板法：將駿業(yè)進行一系列的梯度稀釋，然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面，進行培養(yǎng)． 其中，稀釋涂布平板法還可以用于對微 生物進行計數． 【解答】 解：（ 1）乳酸菌是一種細菌，制備細菌培養(yǎng)基時，需將培養(yǎng)基的 pH 調至中性或微堿性． （ 2）制備培養(yǎng)基過程中，對培養(yǎng)皿滅菌的常用方法是干熱滅菌法．溫度太低會導致培養(yǎng)基凝固，無法鋪展均勻，因此倒平板時培養(yǎng)基的溫度不能太低；待平板冷凝后，要將平板倒置，其目的是防止平板冷凝后，培養(yǎng)皿蓋上凝結的水珠落入培養(yǎng)基中造成污染． （ 3）取 6 支滅菌的試管，分別加入 9mL 滅菌的生理鹽水，標號 A A A A A A6，吸取 1mL 酸奶樣液中加入試管 A1中，然后另取一支吸管從 A2中吸取 1mL 溶液，加入 A2中，依此類推，最后從試管 A6中取 樣液進行涂布計數，這種接種方法是稀釋涂布法．根據操作步驟可推知得到 10 10 1010 10 106倍的稀釋液．從試管 A6中取 樣液進行涂布計數，三個平板中菌落數分別為 25 26 276 個，可推測原酸奶中乳酸菌的濃度為= 109個 /mL．稀釋涂布平板法測定活菌數目時，由于相鄰的細菌可能形成一個菌落，因此測定值可能比實際值?。? （ 4）為了使測量結果更加準確，需要另增設一組培養(yǎng)基，接種等量滅菌的生理鹽水． 故答案為： （ 1）中性或微堿 性 （ 2）干熱滅菌法 溫度太低會導致培養(yǎng)基凝固，無法鋪展均勻 防止平板冷凝后，培養(yǎng)皿蓋上凝結的水珠落入培養(yǎng)基中造成污染 （ 3）稀釋涂布平板法 109 偏小 （ 4）另增設一組培養(yǎng)基，接種等量滅菌的生理鹽水 四、【生物一選修 3：現(xiàn)代生物科技專題】 12．我國全面二孩政策已于 2021 年 1 月 1 日起正式實施．十二年前，產婦朱女士利用試管嬰兒技術，成功生下一個男孩． 2021 年 3 月，朱女士決定生育第二個孩子，醫(yī)院找到當年為她冷凍的 “胚胎 ”過撿胎等程序，朱女士已成功懷 孕 12周．冷凍 12 年后復蘇、植入，該 “凍齡 ”寶寶將有望成為國內最 “老 ”的寶寶．請回答以下相關問題： （ 1）由于女性的自然周期產生的卵子太少，在取卵前通常需要注射促性腺激素，而不通過服用雌激素來首接促進更多的卵泡發(fā)育，原因是過量的雌激素會通過 負反饋調節(jié) ，從而影響卵巢的發(fā)育．在體外受精前，醫(yī)生借助 超聲波 探測儀等工具用吸卵針從朱女士卵巢中吸取卵母細胞；隨后將取出的卵母細胞置于與 輸卵管 中相似的環(huán)境，讓它進一步發(fā)育成熟．受精過程中，精子頂體內含有的頂體酶能協(xié)助精子穿過卵子的 放射冠和透明帶 ，最終進人卵內 完成受精作用． （ 2）胚胎的早期培養(yǎng)與動物細胞培養(yǎng)一樣，都需要滿足 無菌無毒的環(huán)境、溫度和 pH、氣體環(huán)境 及營養(yǎng)等條件．對移植的胚胎進行性別鑒定時，要先從胚胎細胞中提取 DNA，再利用 PCR 技術擴增，最后進行基因檢測．下列關于 “DNA的粗提取與鑒定 ”的實驗敘述，錯誤的有 AC ． A．人血液中的紅細胞可作為提取 DNA 的材料 B． DNA 既溶于 2mol/LNaCl 溶液也溶于蒸餾水 C．加入冷酒精后要用玻璃棒快速的攪拌 D． DNA 溶液加入二苯胺試劑沸水浴加熱，冷卻后變藍 （ 3）若做試管嬰兒的夫婦中，妻子患有線粒體疾 ?。ň€粒體 DNA 缺陷），丈夫正常，則子女患病情況為 全患病 ．那么這對夫婦要想獲得健康的孩子，可通過特殊的設計試管嬰兒技術即 “三親嬰兒 ”（醫(yī)生要去除女性捐贈者卵子中的細胞核，接著用母親卵細胞中對應的遺傳基因取而代之，最后再按照標準的試管嬰兒技術進行培育）． “三親嬰兒 ”的獲得過程，除運用胚胎工程的技術手段外，還要特別運用 動物細胞核移植 技術． 【考點】 胚胎移植； DNA 的粗提取和鑒定；動物細胞核移植技術． 【分析】 胚胎移植的基本程序主要包括： ① 對供、受體的選擇和處理（選擇遺傳特性和生產性能優(yōu)秀的供體，有健 康的體質和正常繁殖能力的受體．用激素進行同期發(fā)情處理，用促性腺激素對供體母牛做超數排卵處理）； ② 配種或人工授精； ③ 對胚胎的收集、檢查、培養(yǎng)或保存（對胚胎進行質量檢查，此時的胚胎應發(fā)育到桑椹或胚囊胚階段）； ④ 對胚胎進行移植； ⑤ 移植后的檢查． 受精過程為：頂體反應 → 穿越放射冠 → 穿越透明帶（透明帶反應） → 卵細胞膜反應（卵黃膜封閉作用） → 卵子完成減數第二次分裂并釋放第二極體 → 雌雄原核的形成、核膜消失，雌、雄原核融合形成合子 → 第一次卵裂開始． 線粒體中遺傳物質的遺傳方式為細胞質遺傳（母系遺傳）． 【解答】 解： （ 1）雌激素存在負反饋調節(jié)，因此在取卵前通常需要注射促性腺激素，而不通過服用雌激素來促進更多的卵泡發(fā)育，如果服用過多的雌激素，會導致促性腺激素分泌過少，導致卵巢萎縮．在體外受精前，可借助超聲波探測儀等工具用吸卵針從朱女士卵巢中吸取卵母細胞；卵子形成的減數第二次分裂過程是在輸卵管中進行的，因此要將取出的卵母細胞置于與輸卵管中相似的環(huán)境，讓它 進一步發(fā)育成熟．頂體內含有的頂體酶能協(xié)助精子穿過卵細胞的放射冠和透明帶，最終進入卵細胞． （ 2）動物細胞培養(yǎng)的條件：無菌無毒的環(huán)境、適宜的溫度和 pH、一定的氣體環(huán)境及營養(yǎng)等 條件． A．人體成熟的紅細胞沒有細胞核和細胞器，不含 DNA，因此不能作為提取 DNA的材料， A 錯誤； B、 DNA 既溶于 2mol/LNaCl 溶液也溶于蒸餾水， B 正確； C、加入冷酒精后要用玻璃棒按同一方向緩慢的攪拌， C 錯誤； D、 DNA 溶液加入二苯胺試劑沸水浴加熱，冷卻后變藍， D 正確． 故選： AC． （ 3）線粒體疾病的遺傳方式是細胞質遺傳，具有母系遺傳的特點，即母親患病子女全患病． “三親嬰兒 ”（醫(yī)生要去除女性捐贈者卵子中的細胞核，接著用母親卵細胞中對應的遺傳基因取而代之，最后再按照標準的試管嬰兒技術進行培育）的 獲得過程，除運用胚胎工程的技術手段外，還要特別運用動物細胞核移植技術． 故答案為： （ 1）負反饋調節(jié) 超聲波 輸卵管 放射冠和透明帶 （ 2）無菌無毒的環(huán)境、溫度和 pH、氣體環(huán)境 AC （ 3）全患病 動物細胞核移植 2017 年 4 月 11 日