植物組織培養(yǎng)六-閱讀頁
2025-01-26 05:05本頁面
【正文】 須考慮以下幾個問題： ? ① 所選用的植物細胞的次生代謝產物的產量是否很高，細胞生長速度是否較慢并能維持較長時間的生活能力； ? ② 所選用的固定支持物對細胞的存活是否有影響，對產物的合成是否有阻礙； ? ③ 終產物是否能釋放到培養(yǎng)基中，如果產物不釋放到培養(yǎng)基中，是否能采用物理 (電擊 )或化學 (離子滲透法 )方法使其釋放而又不影響細胞生活力。懸浮細胞系 n n n 單細胞養(yǎng)與篩選 n n n n 種細胞增殖有效成分分析n n n n n 一步法逐級放大 ：對于細胞生長與目的產物合成同步的類型，一般采用此方法建立大規(guī)模培養(yǎng)系統(tǒng)。先在細胞生長培養(yǎng)基中培養(yǎng)大批量細胞，當細胞生長至合成產物的階段后，再將其轉入到產物合成培養(yǎng)基中培養(yǎng)。 四 .提高細胞次生代謝產物的途徑n 1．明確植物細胞生長與產物合成的關系 n 生長偶聯(lián)型 產物合成與細胞生長成正比。蒽醌類物質合成的植物細胞，托品類生物堿類合成的植物細胞等屬于此類型； n 非生長偶聯(lián)型 產物合成在細胞生長停止以后。 ? 選擇適宜的起始材料首先必須選擇能夠高效合成目的產物的植物種類。同時要篩選高產、穩(wěn)產的細胞株系。培養(yǎng)基的成分包括培養(yǎng)條件要 通過一定的實驗才能選擇出既有利于細胞大量生長繁殖又有利于次生代謝產物大量產生的培養(yǎng)基。因此可在 培養(yǎng)基中加入適當?shù)倪M行上述化學反應的前體，便有可能為我們得到需要的化學轉達化目的產物 。在一些不良環(huán)境或有微生物侵入的情況下，細胞次生代謝活動顯著增強。激發(fā)子也稱誘導子 ，是指能夠誘導植物細胞中一個反應，并形成細胞特征性自身防御反應的分子。培養(yǎng)技術的選擇包括對反應器的選擇和對培養(yǎng)方式的選擇，就目前的技術基礎來講，固定化培養(yǎng)是植物細胞規(guī)?；a較為理想的系統(tǒng)為了同時滿足細胞生長和產物合成的需要，通常需要在不同階段使用不同的培養(yǎng)基，即兩階段培養(yǎng) 為了解決產物對合成的反饋抑制可以采用兩相培養(yǎng)技術， 液 液系統(tǒng) ：分離相常用的有液體石蠟、烷類化合物、甘油等 液 固系統(tǒng) ：常用的有活性炭、硅酸鎂載體、沸石、蠶絲、樹脂等。五．植物細胞規(guī)模化培養(yǎng)中的有關工程技術問題 n 1．懸浮培養(yǎng)系統(tǒng)必須適應植物細胞特性 n 2．植物細胞培養(yǎng)液的流變特性 n 植物細胞培養(yǎng)液的流變特性常用粘度來描述 n 培養(yǎng)過程中培養(yǎng)液的粘度變化可由細胞密度和細胞分泌物以及細胞狀態(tài)引起。 長春花細胞培養(yǎng)，當細胞密度在 10 gL1時，培養(yǎng)液屬于假塑性流體，此時，培養(yǎng)液的粘度依賴于細胞年齡、形態(tài)和細胞團的大小。 n ? 3．植物細胞培養(yǎng)過程中的氣體調節(jié) ? O2： ? 溶氧濃度 ：曾在不同氧濃度下對毛地黃細胞培養(yǎng)進行培養(yǎng)，結果顯示，當培養(yǎng)基氧濃度從 10%飽和度上升至 30%時，細胞的生長速率從 ，如果溶氧濃度繼續(xù)上升至 40%飽和度時，細胞生長速率反而下降至 。 ? 總之，對于植物細胞規(guī)?；囵B(yǎng)來講，在要求培養(yǎng)基充分均勻的同時， O2和 CO2的濃度必需達到某一平衡狀態(tài)。 n 控制泡沫的方式目前通常采用化學和機械兩種方法。 ? 常用的化學消泡劑包括天然油脂類、高級醇類、聚醚類和硅酮類。 ? 植物細胞規(guī)?；囵B(yǎng)中的另一個問題是，細胞往往會粘附于培養(yǎng)液表面以上的器壁上，或電極的擋板上使這些細胞脫離于培養(yǎng)液造成細胞死亡，培養(yǎng)液表面以上的細胞可采用機械去除，電極上的細胞多采用在電極上涂布硅油以防止細胞粘附。其優(yōu)點是勿需在培養(yǎng)液中加入其它物質，從而減少了由于消泡劑所引起的污染和對后續(xù)分離工藝的影響。 剪切力對植物細胞的影響 在大規(guī)模的培養(yǎng)中，植物細胞 對剪切力的敏感性一直是力求解決的主要技術問題之一。因此目前植物細胞反應器的 設計原則為提高混合程度和降低剪切力思考題名詞：植物細胞培養(yǎng)、懸浮培養(yǎng)、單細胞培養(yǎng)、植板率、固定化培養(yǎng)、激發(fā)子、次生產物2．一個好的懸浮細胞系有哪些特征？用于建立 懸浮細胞系的愈傷組織有何要求？3．建立懸浮細胞系的關鍵技術有哪些？4．懸浮細胞系在繼代培養(yǎng)中其群體生長規(guī)律。靜夜四無 鄰 ，荒居舊 業(yè)貧 。March2023雨中黃葉 樹 ，燈下白 頭 人。3:19:45 三月 2103:19:4503:19Mar2130Mar211故人江海 別 ，幾度隔山川。March20231乍 見 翻疑夢，相悲各 問 年。30, 3020233:19:45 三月 上午 三月 2103:19March20231行 動 出成果，工作出 財 富。3:19:4503:19:453020231做前，能 夠環(huán)視 四周；做 時 ，你只能或者最好沿著以腳 為 起點的射 線 向前。上午 3:19 三月 21三月 21Tuesday,30, 03:19:4503:19:4503:193/30/2023AM1成功就是日復一日那一點點小小努力的 積 累。 03:19:4503:19:4503:19Tuesday,30, 三月 21三月 2103:19:4503:19:45March20231意志 堅 強 的人能把世界放在手中像泥 塊 一 樣 任意揉捏。三月 上午 03:19:45三月 211楚塞三湘接， 荊門 九派通。213:1930, 2023/3/30March 3:19:45上午 03:19:45三月 21 楊 柳散和 風 ，青山澹吾 慮 。March2023 閱讀 一切好 書 如同和 過 去最杰出的人 談話 。3:19:45 三月 2103:19:4503:19Mar2130Mar211越是無能的人，越喜 歡 挑剔 別 人的 錯 兒。March20231知人者智，自知者明。 三月 21三月 2103:19:4503:19:45March20231意志 堅 強 的人能把世界放在手中像泥 塊 一 樣 任意揉捏。三月 上午 03:19:45三月 211最具挑 戰(zhàn) 性的挑 戰(zhàn) 莫 過 于提升自我。213:1930, 2023/3/30March 3:19:45上午 03:19:45三月 21MOMODA160
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