植物組織培養(yǎng)六-閱讀頁
2025-01-26 05:05本頁面
【正文】 須考慮以下幾個(gè)問題： ? ① 所選用的植物細(xì)胞的次生代謝產(chǎn)物的產(chǎn)量是否很高，細(xì)胞生長速度是否較慢并能維持較長時(shí)間的生活能力； ? ② 所選用的固定支持物對細(xì)胞的存活是否有影響，對產(chǎn)物的合成是否有阻礙； ? ③ 終產(chǎn)物是否能釋放到培養(yǎng)基中，如果產(chǎn)物不釋放到培養(yǎng)基中，是否能采用物理 (電擊 )或化學(xué) (離子滲透法 )方法使其釋放而又不影響細(xì)胞生活力。懸浮細(xì)胞系 n n n 單細(xì)胞養(yǎng)與篩選 n n n n 種細(xì)胞增殖有效成分分析n n n n n 一步法逐級放大 ：對于細(xì)胞生長與目的產(chǎn)物合成同步的類型，一般采用此方法建立大規(guī)模培養(yǎng)系統(tǒng)。先在細(xì)胞生長培養(yǎng)基中培養(yǎng)大批量細(xì)胞，當(dāng)細(xì)胞生長至合成產(chǎn)物的階段后，再將其轉(zhuǎn)入到產(chǎn)物合成培養(yǎng)基中培養(yǎng)。 四 .提高細(xì)胞次生代謝產(chǎn)物的途徑n 1．明確植物細(xì)胞生長與產(chǎn)物合成的關(guān)系 n 生長偶聯(lián)型 產(chǎn)物合成與細(xì)胞生長成正比。蒽醌類物質(zhì)合成的植物細(xì)胞，托品類生物堿類合成的植物細(xì)胞等屬于此類型； n 非生長偶聯(lián)型 產(chǎn)物合成在細(xì)胞生長停止以后。 ? 選擇適宜的起始材料首先必須選擇能夠高效合成目的產(chǎn)物的植物種類。同時(shí)要篩選高產(chǎn)、穩(wěn)產(chǎn)的細(xì)胞株系。培養(yǎng)基的成分包括培養(yǎng)條件要 通過一定的實(shí)驗(yàn)才能選擇出既有利于細(xì)胞大量生長繁殖又有利于次生代謝產(chǎn)物大量產(chǎn)生的培養(yǎng)基。因此可在 培養(yǎng)基中加入適當(dāng)?shù)倪M(jìn)行上述化學(xué)反應(yīng)的前體，便有可能為我們得到需要的化學(xué)轉(zhuǎn)達(dá)化目的產(chǎn)物 。在一些不良環(huán)境或有微生物侵入的情況下，細(xì)胞次生代謝活動顯著增強(qiáng)。激發(fā)子也稱誘導(dǎo)子 ，是指能夠誘導(dǎo)植物細(xì)胞中一個(gè)反應(yīng)，并形成細(xì)胞特征性自身防御反應(yīng)的分子。培養(yǎng)技術(shù)的選擇包括對反應(yīng)器的選擇和對培養(yǎng)方式的選擇，就目前的技術(shù)基礎(chǔ)來講，固定化培養(yǎng)是植物細(xì)胞規(guī)模化生產(chǎn)較為理想的系統(tǒng)為了同時(shí)滿足細(xì)胞生長和產(chǎn)物合成的需要，通常需要在不同階段使用不同的培養(yǎng)基，即兩階段培養(yǎng) 為了解決產(chǎn)物對合成的反饋抑制可以采用兩相培養(yǎng)技術(shù)， 液 液系統(tǒng) ：分離相常用的有液體石蠟、烷類化合物、甘油等 液 固系統(tǒng) ：常用的有活性炭、硅酸鎂載體、沸石、蠶絲、樹脂等。五．植物細(xì)胞規(guī)?；囵B(yǎng)中的有關(guān)工程技術(shù)問題 n 1．懸浮培養(yǎng)系統(tǒng)必須適應(yīng)植物細(xì)胞特性 n 2．植物細(xì)胞培養(yǎng)液的流變特性 n 植物細(xì)胞培養(yǎng)液的流變特性常用粘度來描述 n 培養(yǎng)過程中培養(yǎng)液的粘度變化可由細(xì)胞密度和細(xì)胞分泌物以及細(xì)胞狀態(tài)引起。 長春花細(xì)胞培養(yǎng)，當(dāng)細(xì)胞密度在 10 gL1時(shí)，培養(yǎng)液屬于假塑性流體，此時(shí)，培養(yǎng)液的粘度依賴于細(xì)胞年齡、形態(tài)和細(xì)胞團(tuán)的大小。 n ? 3．植物細(xì)胞培養(yǎng)過程中的氣體調(diào)節(jié) ? O2： ? 溶氧濃度 ：曾在不同氧濃度下對毛地黃細(xì)胞培養(yǎng)進(jìn)行培養(yǎng)，結(jié)果顯示，當(dāng)培養(yǎng)基氧濃度從 10%飽和度上升至 30%時(shí)，細(xì)胞的生長速率從 ，如果溶氧濃度繼續(xù)上升至 40%飽和度時(shí)，細(xì)胞生長速率反而下降至 。 ? 總之，對于植物細(xì)胞規(guī)?；囵B(yǎng)來講，在要求培養(yǎng)基充分均勻的同時(shí)， O2和 CO2的濃度必需達(dá)到某一平衡狀態(tài)。 n 控制泡沫的方式目前通常采用化學(xué)和機(jī)械兩種方法。 ? 常用的化學(xué)消泡劑包括天然油脂類、高級醇類、聚醚類和硅酮類。 ? 植物細(xì)胞規(guī)?；囵B(yǎng)中的另一個(gè)問題是，細(xì)胞往往會粘附于培養(yǎng)液表面以上的器壁上，或電極的擋板上使這些細(xì)胞脫離于培養(yǎng)液造成細(xì)胞死亡，培養(yǎng)液表面以上的細(xì)胞可采用機(jī)械去除，電極上的細(xì)胞多采用在電極上涂布硅油以防止細(xì)胞粘附。其優(yōu)點(diǎn)是勿需在培養(yǎng)液中加入其它物質(zhì)，從而減少了由于消泡劑所引起的污染和對后續(xù)分離工藝的影響。 剪切力對植物細(xì)胞的影響 在大規(guī)模的培養(yǎng)中，植物細(xì)胞 對剪切力的敏感性一直是力求解決的主要技術(shù)問題之一。因此目前植物細(xì)胞反應(yīng)器的 設(shè)計(jì)原則為提高混合程度和降低剪切力思考題名詞：植物細(xì)胞培養(yǎng)、懸浮培養(yǎng)、單細(xì)胞培養(yǎng)、植板率、固定化培養(yǎng)、激發(fā)子、次生產(chǎn)物2．一個(gè)好的懸浮細(xì)胞系有哪些特征？用于建立 懸浮細(xì)胞系的愈傷組織有何要求？3．建立懸浮細(xì)胞系的關(guān)鍵技術(shù)有哪些？4．懸浮細(xì)胞系在繼代培養(yǎng)中其群體生長規(guī)律。靜夜四無 鄰 ，荒居舊 業(yè)貧 。March2023雨中黃葉 樹 ，燈下白 頭 人。3:19:45 三月 2103:19:4503:19Mar2130Mar211故人江海 別 ，幾度隔山川。March20231乍 見 翻疑夢，相悲各 問 年。30, 3020233:19:45 三月 上午 三月 2103:19March20231行 動 出成果，工作出 財(cái) 富。3:19:4503:19:453020231做前，能 夠環(huán)視 四周；做 時(shí) ，你只能或者最好沿著以腳 為 起點(diǎn)的射 線 向前。上午 3:19 三月 21三月 21Tuesday,30, 03:19:4503:19:4503:193/30/2023AM1成功就是日復(fù)一日那一點(diǎn)點(diǎn)小小努力的 積 累。 03:19:4503:19:4503:19Tuesday,30, 三月 21三月 2103:19:4503:19:45March20231意志 堅(jiān) 強(qiáng) 的人能把世界放在手中像泥 塊 一 樣 任意揉捏。三月 上午 03:19:45三月 211楚塞三湘接， 荊門 九派通。213:1930, 2023/3/30March 3:19:45上午 03:19:45三月 21 楊 柳散和 風(fēng) ，青山澹吾 慮 。March2023 閱讀 一切好 書 如同和 過 去最杰出的人 談話 。3:19:45 三月 2103:19:4503:19Mar2130Mar211越是無能的人，越喜 歡 挑剔 別 人的 錯(cuò) 兒。March20231知人者智，自知者明。 三月 21三月 2103:19:4503:19:45March20231意志 堅(jiān) 強(qiáng) 的人能把世界放在手中像泥 塊 一 樣 任意揉捏。三月 上午 03:19:45三月 211最具挑 戰(zhàn) 性的挑 戰(zhàn) 莫 過 于提升自我。213:1930, 2023/3/30March 3:19:45上午 03:19:45三月 21MOMODA160
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