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培養(yǎng)基質(zhì)量保證與質(zhì)量控制-閱讀頁

2025-01-23 06:02本頁面
  

【正文】 方法舉例 測試培養(yǎng)基 在 105稀釋度上有 30個菌落 參照 培養(yǎng)基 在 105稀釋度上有 40個菌落 通過公式計算: PR = 105 30/ 105 40= 注:在幾種固體計數(shù)方法中, Milesmisra方法和螺旋平板涂布法效果較好??赏瑫r在一個平板上接種多個菌株,但劃線不能交叉 ? 按標準中規(guī)定的培養(yǎng)時間和溫度對接種后的平板進行培養(yǎng) 結(jié)果解釋 ? 培養(yǎng)后按以下方法計分: ? 0表示無生長 ? 1表示微弱生長 ? 2表示生長良好 ? 目標菌得分應為 2,并有典型的菌落外觀、大小和形態(tài) ? 非目標菌的生長應部分或全部被抑制 質(zhì)控菌株要求 ? 標準菌株:來自國際 /國家菌種保藏中心 (本標準要求為 ATCC菌株 )或經(jīng) ISO9002認證的經(jīng)銷商提供的菌株 (有資質(zhì) ) ? 制備儲備菌株和工作菌株時一次制備多份,每株菌原則上不能重復使用 ? 通常工作菌株不能再傳代,但處理得當可再次使用 標準儲備菌株 (Reference stock) ? 標準菌株在實驗室經(jīng)過一次傳代獲得的一組完全相同的菌株 ? 傳代菌株應當完全具備標準菌株的所有性狀 ? 傳代時要保證一定的量 (減少傳代次數(shù) ) ? 每株菌株盡量避免多次使用 ? 采用不同的保存方法保存期限不同 ? 如凍干法 ,液氮法 ,穿刺法 ,液體石蠟法 ,斜面保存法等 (見后 ) 菌種保藏方法 ? 液氮保存法 ? 低溫保存法 ? 液體石蠟保存法 液氮保存法 保存 制備細胞懸液,甘油或二甲亞砜作保護劑 分裝無菌安瓿瓶,每管 預凍至 40℃ (控制溫度下降速率為 1℃ / min) 放入液氮生物貯存罐中氣相保存 恢復 直接浸入 38℃ 水浴中解凍 5~ 10min 轉(zhuǎn)接于適宜培養(yǎng)基內(nèi)培養(yǎng) 注意:大多數(shù)屬種適于慢速凍結(jié)和快速解凍 適用菌種 病毒 支原體 各類細菌、放線菌、酵母菌、絲狀真菌 藍藻 動物細胞 液體石蠟覆蓋保存法 ? 傳代保存的變相方法 ? 能夠適當?shù)匮娱L保存時間 ? 優(yōu)質(zhì)石蠟 121℃ 高壓滅菌 2小時, 160℃干燥箱中滅菌 1— 2小時,放冷備用 ? 液體石蠟的深度以 1cm左右 ? 保存期通常 6個月至一年 適用菌種 ? 霉菌、酵母菌、放線菌、部分細菌。置于低溫 (70)保藏。為避免反復凍溶,可分裝于小離心管中,置低溫保藏
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