微生物檢測(cè)基礎(chǔ)知識(shí)-閱讀頁(yè)
2025-01-07 15:41本頁(yè)面
【正文】 3）用一支 1ml滅菌吸管，每次吸取1ml(1:10)樣品稀釋液，加入到 3支不同的單料乳糖膽鹽發(fā)酵管中。 ? 吸取 1ml(1:10)樣品稀釋液加入到一直9ml生理鹽水試管中，充分振蕩做成(1:100)樣品稀釋液 ? 4)另用一支 1ml滅菌吸管，每次吸取1ml(1:100)樣品稀釋液，加入到 3支不同的單料乳糖膽鹽發(fā)酵管中。 ? 7）平板在 36℃ 的培養(yǎng)箱中培養(yǎng) 48小時(shí)觀察結(jié)果。 ? 8)菌落總數(shù)結(jié)果的記錄及報(bào)告 ? 平板培養(yǎng) 48小時(shí)之后 ,取出記錄每個(gè)稀釋度的兩個(gè)平板的菌落數(shù) .計(jì)數(shù)時(shí)可用肉眼觀察 ,必要時(shí)用放大鏡檢查 ,以防遺漏 .求出同稀釋度的兩個(gè)平板平均菌落總數(shù) . ? 一個(gè)稀釋度使用兩個(gè)平板應(yīng)采用兩個(gè)平板的平均數(shù) ,其中一個(gè)平板有較大片狀菌落生長(zhǎng)時(shí) ,則不宜采用 ,而應(yīng)以無(wú)片裝菌落生長(zhǎng)的平板作為該稀釋度的菌落數(shù) ,若片狀菌落不到平板的一半 ,而余下的一半中菌落分布又很均勻 ,即可計(jì)算半個(gè)平板后乘以 2代表全平板菌落數(shù) .平板內(nèi)如有鏈狀菌落生長(zhǎng)時(shí) (菌落之間無(wú)明顯界限 ),僅有一 ? 條鏈 ,可視為一個(gè)菌落 ,如果有不同來(lái)源的幾條鏈 ,則應(yīng)將每條鏈作為一個(gè)菌落計(jì) . ? 選擇平均菌落數(shù)在 30300之間的稀釋度 ,乘以稀釋倍數(shù)報(bào)告之 . ? 如果有兩個(gè)稀釋度的菌落數(shù)都在 30300之間時(shí) ,若兩者的比值小于或等于 2,應(yīng)報(bào)告其平均數(shù) ,若大于二則報(bào)告其中較小的數(shù)字 ? 如果所有稀釋度的平均菌落數(shù)均大于 300,則應(yīng)按稀釋度最高的平均菌落乘以稀釋倍數(shù)報(bào)告 . ? 如果所有稀釋度的平均菌落數(shù)都小于 30,則應(yīng)按稀釋度最低的平均菌落數(shù)乘以倍數(shù)報(bào)告之 . ? 如果所有稀釋度均無(wú)菌落生長(zhǎng) ,則以小于1乘以最低稀釋倍數(shù)報(bào)告之 . ? 如果所有稀釋度的平均菌落數(shù)都不在 30300之間 ,其中一部分大于 300,一部分小于 30,則以最接近 30或 300的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)報(bào)告之 , ? 菌落數(shù)在 100以內(nèi)時(shí) ,按其實(shí)有數(shù)報(bào)告大于 100時(shí)采用兩位有效數(shù)字 ,在有效數(shù)字后面的數(shù)值 ,以“四舍五入”法計(jì)算 .為了縮短數(shù)字后面的零數(shù)也可用 10的指數(shù)來(lái)表示 例次 稀 釋液及 菌 落 數(shù) 兩稀釋 液之比 菌落總數(shù) （個(gè) /g或個(gè) ml） 報(bào)告方式（個(gè) /g或 ml） 101 102 103 1 多不可計(jì) 164 20 — 16400 16000或104 2 多不可計(jì) 295 46 37750 38000或104 3 多不可計(jì) 271 60 27100 27000或104 4 多不可計(jì) 多不可計(jì) 313 — 313000 310000或105 5 27 11 5 — 270 270或102 6 0 0 0 — 110 10 7 多不可計(jì) 305 12 — 30500 31000或104 ? 9)乳糖膽鹽發(fā)酵管在培養(yǎng)箱中 36℃ 培養(yǎng) 24小時(shí)之后取出觀察培養(yǎng)情況 . ? 如果沒(méi)有變化 ,即為陰性管 . ? 如果乳糖膽鹽發(fā)酵管中溶液的顏色由紫變黃 ,小倒管中有氣泡生成 .則應(yīng)將產(chǎn)氣的發(fā)酵管轉(zhuǎn)種在伊紅美藍(lán)瓊脂平板上 ,置于 36℃ 培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng) 24小時(shí) .然后取出 ,觀察菌落形態(tài) ,并做革蘭氏染色和證實(shí)試驗(yàn) . ? 在上述平板上 ,挑取可疑 (藍(lán)黑色 )大腸菌群菌落12個(gè)進(jìn)行革蘭氏染色 ,同時(shí)接種乳糖發(fā)酵管 ,放在 36℃ 培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng) 24小時(shí) ,觀察產(chǎn)氣情況 ,凡乳糖管產(chǎn)氣 ,革蘭氏染色為陰性的無(wú)芽孢桿菌 ,即可報(bào)告為大腸菌群陽(yáng)性 . ? 根據(jù)證實(shí)為大腸菌群的陽(yáng)性管數(shù) ,查 MPN檢索表 ,報(bào)告每 100ml(g)大腸菌群的最可能數(shù) . ? 10)霉菌酵母計(jì)數(shù) (依據(jù)方法GB/驗(yàn) 霉菌和酵母計(jì)數(shù) ) ? 以無(wú)菌操作稱取檢樣 25g(mL)， 放入含 225mL滅菌水的具玻塞錐形瓶中 ， 振搖 30min， 即為 1：10稀釋液 。 ? 取 1mLl： 10稀釋液注人含有 9mL滅菌水的試管中 。 ? 按上述操作順序做 10倍遞增稀釋液 ， 每稀釋一次 ， 換用一支 1mI， 滅菌吸管 ， 根據(jù)對(duì)樣品污染情況的估計(jì) ， 選擇三個(gè)合適的稀釋度 ， 分別在做 10倍稀釋的同時(shí) ， 吸取 1mL稀釋液于滅菌平皿中 ， 每個(gè)稀釋度做兩個(gè)平皿 。 ? 計(jì)算方法：通常選擇菌落數(shù)在 10～ 150之間的平皿進(jìn)行計(jì)數(shù) ， 同稀釋度的兩個(gè)平皿的菌落平均數(shù)乘以稀釋倍數(shù) ， 即為每克 (或毫升 )檢樣中所含霉菌和酵母數(shù) 。 ? 報(bào)告：每克 (或毫升 )食品所含霉菌和酵母數(shù)以 cfu／ g(mL)表
環(huán)評(píng)公示相關(guān)推薦
鄂ICP備17016276號(hào)-1