【正文】 ，鏡臺(tái)下有推進(jìn)器調(diào)節(jié)輪，可使玻片標(biāo)本作左右、前后方向的移動(dòng)。 ①粗調(diào)節(jié)器(粗準(zhǔn)焦螺旋)：大螺旋稱粗調(diào)節(jié)器，移動(dòng)時(shí)可使鏡臺(tái)作快速和較大幅度的升降，所以能迅速調(diào)節(jié)物鏡和標(biāo)本之間的距離使物象呈現(xiàn)于視野中，通常在使用低倍鏡時(shí)，先用粗調(diào)節(jié)器迅速找到物象。 ◆照明部分 裝在鏡臺(tái)下方，包括反光鏡,集光器。 （2）集光器(聚光器)位于鏡臺(tái)下方的集光器架上，由聚光鏡和光圈組成，其作用是把光線集中到所要觀察的標(biāo)本上。 ②光圈(虹彩光圈)：在聚光鏡下方，由十幾張金屬薄片組成，其外側(cè)伸出一柄，推動(dòng)它可調(diào)節(jié)其開(kāi)孔的大小，以調(diào)節(jié)光量。 （2）物鏡：裝在鏡筒下端的旋轉(zhuǎn)器上，一般有3－4個(gè)物鏡，其中最短的刻有“10”符號(hào)的為低倍鏡，較長(zhǎng)的刻有“40”符號(hào)的為高倍鏡，最長(zhǎng)的刻有“100”符號(hào)的為油鏡，此外，在高倍鏡和油鏡上還常加有一圈不同顏色的線，以示區(qū)別。 顯微鏡目鏡長(zhǎng)度與放大倍數(shù)呈負(fù)相關(guān)，物鏡長(zhǎng)度與放大倍數(shù)呈正相關(guān)。二、光學(xué)顯微鏡的使用： ：①右手握鏡臂；②左手托鏡座；③置于胸前。 ：①轉(zhuǎn)動(dòng)粗準(zhǔn)焦螺旋，使鏡筒徐徐上升，然后轉(zhuǎn)動(dòng)轉(zhuǎn)換器，使低倍物鏡對(duì)準(zhǔn)通光孔；②用手指轉(zhuǎn)動(dòng)遮光器（或片狀光圈），使最大光圈對(duì)準(zhǔn)通光孔，左眼向目鏡內(nèi)注視，同時(shí)轉(zhuǎn)動(dòng)反光鏡，使其朝向光源，使視野內(nèi)亮度均勻合適。②用左眼向目鏡內(nèi)注視（注意右眼應(yīng)該同時(shí)睜著），并轉(zhuǎn)動(dòng)粗準(zhǔn)焦螺旋，使鏡筒徐徐上升，直到看清物象為止。 ：使用高倍物鏡之前，必須先用低倍物鏡找到觀察的物象，并調(diào)到視野的正中央，然后轉(zhuǎn)動(dòng)轉(zhuǎn)換器再換高倍鏡。觀看的物體數(shù)目變少，但是體積變大。同時(shí)又因自玻片透過(guò)的光線，由于介質(zhì)（玻片－空氣－接物鏡）密度（玻片：n=，空氣：n=）不同而發(fā)生了折射散光，因此射入鏡頭的光線就更少，物體更看不清楚。 （2）油鏡的使用： a．將光線調(diào)至最強(qiáng)程度（聚光器提高，光圈全部開(kāi)放）。 c．轉(zhuǎn)動(dòng)接物鏡轉(zhuǎn)換盤，使油鏡頭于鏡筒下方。 e．慢慢轉(zhuǎn)動(dòng)粗調(diào)節(jié)器，使油鏡頭徐徐上升至見(jiàn)到標(biāo)本的物象為止。 g．左手徐徐移動(dòng)推進(jìn)器，并轉(zhuǎn)動(dòng)微調(diào)節(jié)器以觀察標(biāo)本。立即用擦鏡紙將鏡頭上的香柏油擦凈。反光鏡有平面和凹面?！　　龀昼R時(shí)必須是右手握臂、左手托座的姿勢(shì)，不可單手提取，以免零件脫落或碰撞到其它地方。 　　■保持顯微鏡的清潔，光學(xué)和照明部分只能用擦鏡紙擦拭，切忌口吹手抹或用布擦，機(jī)械部分用布擦拭。 　　■放置玻片標(biāo)本時(shí)要對(duì)準(zhǔn)通光孔中央，且不能反放玻片，防止壓壞玻片或碰壞物鏡。 　　■不要隨意取下目鏡，以防止塵土落入物鏡，也不要任意拆卸各種零件，以防損壞。最后填寫使用登記表。不要只用一只手提取，以防顯微鏡墜落，然后輕輕放在實(shí)習(xí)臺(tái)上或裝 入木箱內(nèi)。 3．顯微鏡須經(jīng)常保持清潔，勿使油污和灰塵附著。 4．顯微鏡不能在陽(yáng)光下暴曬和使用。更換接物鏡時(shí)，卸下后應(yīng)倒置在清潔的臺(tái)面下，并隨即裝入木箱的置放接物鏡的管內(nèi)。 7．顯微鏡應(yīng)放在干燥的地方，以防生霉。所以，除了觀察活體微生物細(xì)胞的運(yùn)動(dòng)性和直接計(jì)算菌數(shù)外，絕大多數(shù)情況下都必須經(jīng)過(guò)染色后，才能在顯微鏡下進(jìn)行觀察。染色后的微生物標(biāo)本是死的，在染色過(guò)程中微生物的形態(tài)與結(jié)構(gòu)均會(huì)發(fā)生一些變化，不能完全代表其生活細(xì)胞的真實(shí)情況，染色觀察時(shí)必須注意。物理因素如細(xì)胞及細(xì)胞物質(zhì)對(duì)染料的毛細(xì)現(xiàn)象、滲透、吸附作用等。酸性物質(zhì)對(duì)于堿性染料較易吸附，且吸附作用穩(wěn)固；同樣，堿性物質(zhì)對(duì)酸性染料較易于吸附。但是，要使酸性物質(zhì)染上酸性材料，必須把它們的物理形式加以改變（如改變pH值），才利于吸附作用的發(fā)生?！　〖?xì)菌的等電點(diǎn)較低，pH值大約在2—5之間，故在中性、堿性或弱酸性溶液中，菌體蛋白質(zhì)電離后帶陰電荷；而堿性染料電離時(shí)染料離子帶陽(yáng)電。所以，在細(xì)菌學(xué)上常用堿性染料進(jìn)行染色。此外，培養(yǎng)基的組成、菌令、染色液中的電介質(zhì)含量和pH、溫度、藥物的作用等，也都能影響細(xì)菌的染色。天然染料有胭脂蟲紅、地衣素、石蕊和蘇木素等，它們多從植物體中提取得到，其成分復(fù)雜，有些至今還未搞清楚。多數(shù)染料為帶色的有機(jī)酸或堿類，難溶于水，而易溶于有機(jī)溶劑中?！　∪玖峡砂雌潆婋x后染料離子所帶電荷的性質(zhì)，分為酸性染料、堿性染料、中性（復(fù)合）染料和單純?nèi)玖纤拇箢?。?dāng)培養(yǎng)基因糖類分解產(chǎn)酸使pH值下降時(shí)，細(xì)菌所帶的正電荷增加，這時(shí)選擇酸性染料，易被染色。微生物實(shí)驗(yàn)室一般常用的堿性染料有美蘭、甲基紫、結(jié)晶紫、堿性復(fù)紅、中性紅、孔雀綠和蕃紅等，在一般的情況下，細(xì)菌易被堿性染料染色。單純?nèi)玖稀　∵@類染料的化學(xué)親和力低，不能和被染的物質(zhì)生成鹽，其染色能力視其是否溶于被染物而定，因?yàn)樗鼈兇蠖鄶?shù)都屬于偶氮化合物，不溶于水，但溶于脂肪溶劑中，如紫丹類（Sudanb）的染料。制片　　在干凈的載玻片上滴上一滴蒸餾水，用接種環(huán)進(jìn)行無(wú)菌操作，挑取培養(yǎng)物少許，置載玻片的水滴中，與水混合做成懸液并涂成直徑約1厘米的薄層，為避免因菌數(shù)過(guò)多聚成集團(tuán)，不利觀察個(gè)體形態(tài)，可在載玻片之一側(cè)再加一滴水，從已涂布的菌液中再取一環(huán)于此水滴中進(jìn)行稀釋，涂布成薄層，若材料為液體培養(yǎng)物或固體培養(yǎng)物中洗下制備的菌液，則直接涂布于載玻片上即可。固定　　標(biāo)本干燥后即進(jìn)行固定，固定的目的有三個(gè)：　　１）殺死微生物，固定細(xì)胞結(jié)構(gòu)?！　。常└淖?nèi)玖蠈?duì)細(xì)胞的通透性，因?yàn)樗赖脑|(zhì)比活的原生質(zhì)易于染色?！　∫陨线@種固定法在微生物實(shí)驗(yàn)室中雖然應(yīng)用較多普遍，但是應(yīng)當(dāng)指出，在研究微生物細(xì)胞結(jié)構(gòu)時(shí)不適用，應(yīng)采用化學(xué)固定法。餓酸能很快固定細(xì)胞但不改變其結(jié)構(gòu)，故較常用。染色　　標(biāo)本固定后，滴加染色液。染料作用標(biāo)本的時(shí)間平均約1—3分鐘，而所有的染色時(shí)間內(nèi)，整個(gè)涂片（或有標(biāo)本的部分）應(yīng)該浸在染料之中。一般固定后媒染，但也可以結(jié)合固定或染色同時(shí)進(jìn)行?？蓹z查染料與細(xì)胞結(jié)合的穩(wěn)定程度，鑒別不同種類的細(xì)菌。６、復(fù)染　　脫色后再用一種染色劑進(jìn)行染色，與不被脫色部位形成鮮明的對(duì)照，便于觀察。７、水洗　　染色到一定的時(shí)候，用細(xì)小的水流從標(biāo)本的背面把多余的染料沖洗掉，被菌體吸附的染料則保留。９、鏡檢　　干燥后的標(biāo)本可用顯微鏡觀察。染色方法　　微生物染色方法一般分為單染色法和復(fù)染色法兩種。復(fù)染色法是用兩種或兩種以上染料，有協(xié)助鑒別微生物的作用。常用的復(fù)染色法有革蘭氏染色法和抗酸性染色法，此外還有鑒別細(xì)胞各部分結(jié)構(gòu)的（如芽胞、鞭毛、細(xì)胞核等）特殊染色法。１、單染色法　　用一種染色劑對(duì)涂片進(jìn)行染色，簡(jiǎn)便易行，適于進(jìn)行微生物的形態(tài)觀察。因此，常用堿性染料進(jìn)行單染色，如美蘭、孔雀綠、堿性復(fù)紅、結(jié)晶紫和中性紅等。使用酸性染料時(shí)，必須降低染液的PH值，使其呈現(xiàn)強(qiáng)酸性（低于細(xì)菌菌體等電點(diǎn)），讓菌體帶正電荷，才易于被酸性染料染色。　　染色結(jié)果依染料不同而不同：　　石碳酸復(fù)紅染色液：著色快，時(shí)間短，菌體呈紅色?！　〔菟徜@結(jié)晶染色液：染色迅速，著色深，菌體呈紫色?！　〖?xì)菌先經(jīng)堿性染料結(jié)晶染色，而經(jīng)碘液媒染后，用酒精脫色，在一定條件下有的細(xì)菌此色不被脫去，有的可被脫去，因此可把細(xì)菌分為兩大類，前者叫做革蘭氏陽(yáng)性菌（G+），后者為革蘭氏陰性菌（G—）。陽(yáng)性菌仍帶紫色，陰性菌則被染上紅色?！　「锾m氏陽(yáng)性菌和革蘭氏陰性菌在化學(xué)組成和生理性質(zhì)上有很多差別，染色反應(yīng)不一樣?！　×硗?，陽(yáng)性菌菌體等電點(diǎn)較陰性菌為低，在相同PH條件下進(jìn)行染色，陽(yáng)性菌吸附堿性染料很多，因此不易脫去，陰性菌則相反。例如，在強(qiáng)堿的條件下進(jìn)行染色，兩類菌吸附堿性染料都多，都可呈正反應(yīng)；PH很低時(shí)，則可都呈負(fù)反應(yīng)。所以脫色時(shí)間，脫色方法也應(yīng)嚴(yán)格控制?！　。玻┎菟徜@結(jié)晶紫染1分鐘?！　。矗┘拥庖焊采w涂面染1分鐘。　?。叮┘?5%酒精數(shù)滴，并輕輕搖動(dòng)進(jìn)行脫色，30秒后水洗，吸去水分。干燥，鏡檢。微生物檢測(cè)常用培養(yǎng)基及其質(zhì)量控制微生物的形態(tài)與觀察常見(jiàn)致病菌的檢測(cè)技術(shù) 產(chǎn)品微生物檢驗(yàn)技術(shù)的發(fā)展現(xiàn)狀1實(shí)驗(yàn)室參觀與介紹27 /