共軛焦顯微鏡簡介-閱讀頁
2024-08-24 03:47本頁面
【正文】 圖象的清晰度。只要有信號就能被檢測到。這也是熒光標(biāo)記的抗體被稱為分子探針的原因。也可以在同一張切片上比較不同成分含量。 激光共聚焦顯微鏡的 優(yōu)勢 在效果方面 快速性： 由于利用光源光束點(diǎn)掃描，檢測過程快，時間短，計算機(jī)精確控制激發(fā)光強(qiáng)度，光漂白和熒光淬滅作用很小。 激光共聚焦顯微鏡的 優(yōu)勢 在效果方面 牛肺動脈內(nèi)皮細(xì)胞 ， 微管 高清晰成像 牛肺動脈內(nèi)皮細(xì)胞 ， 微管 高清晰成像 鼠成纖維細(xì)胞 單克隆 anti–β tubulin 標(biāo)記 高清晰成像 檢測人類癌細(xì)胞表皮生長因子 高清晰成像 培養(yǎng)的 293細(xì)胞綠色熒光蛋白 高清晰成像 共聚焦顯微鏡的應(yīng)用 1) 高清晰成像 2) 半定量熒光強(qiáng)度分析 3) 熒光探針表達(dá)量測定 4) 分層掃描 5) 熒光標(biāo)記物絕對定量分析 6) 擴(kuò)展應(yīng)用 高清晰成像 ? 激光共聚焦顯微鏡因使用共扼光路使非焦平面的光線被抑制，減少了成像的干擾，以及使用光色較純的激光，所以成像分辨率可達(dá)普通光學(xué)顯微鏡的 。 半定量熒光強(qiáng)度分析 熒光信號 通過 光電倍增管 轉(zhuǎn)化為 電信號 ，經(jīng)過 電腦分析 可對 熒光信號 進(jìn)行 相對定量測定 。 熒光探針的特異性標(biāo)記： 即 熒光強(qiáng)度與特異性標(biāo)記蛋白的表達(dá)量成正相關(guān)。 半定量熒光強(qiáng)度分析 隨機(jī)圈取細(xì)胞 可得到所圈細(xì)胞的相對熒光強(qiáng)度值 熒光表達(dá)量測定 ? 利用熒光與透射光同時掃描，觀測相等面積內(nèi)不同組間熒光標(biāo)記蛋白表達(dá)的差異。即樣品中相當(dāng)薄的一層被探測到，而其他層面不影響成像。 入射光 被檢測層面 整個樣品 白光（不能透過） 發(fā)射光 分層掃描（切片掃描） 較厚層面 較薄層面 人血管內(nèi)皮細(xì)胞 PI標(biāo)記觀測損傷。 分層掃描（切片掃描） 較厚層面 （平滑肌損傷可見） 較薄層面 兔動脈血管內(nèi)皮細(xì)胞 PI標(biāo)記觀測損傷。 293細(xì)胞 GFP的表達(dá) 細(xì)胞“ CT”片 細(xì)胞測量 熒光強(qiáng)度分析 空間定位 三維重建 植物切片三維重建 動態(tài)觀測 ? 激光共聚焦顯微鏡的一大特點(diǎn)就是可以對活細(xì)胞進(jìn)行連續(xù)掃描，實(shí)現(xiàn)實(shí)時動態(tài)觀測。 ? 常用的有檢測細(xì)胞內(nèi)游離 Ca 離子變化、細(xì)胞內(nèi) PH值變化，等等。 ? 此染料可特異性標(biāo)記細(xì)胞內(nèi)游離 Ca離子，胞外不標(biāo)記
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