【正文】
成分進行優(yōu)化,尤其是鎂離子和鉀離子的濃度。 ? 《 分子克隆實驗指南 》 ? Frackman et al.(1998) have demonstrated (using NMR analysis) that the PCR additive provided by QIAGEN in their PCR core kit (QSolution) and that provided by CLONTECH in the AdvantageGC cDNA PCR kit is in fact Betaine which is available at a fraction of the cost as a 5M solution from SigmaAldrich (cat. B 0300) ? 有的反應(yīng)中, 、 %的明膠( gelatin)或非離子型的去污劑,可以解決一些擴增失敗的問題,這類試劑可以增加聚合酶的穩(wěn)定性,減少試劑在管壁上的吸附。20, NP40和 Triton174。 ? 銨離子的添加,可以減少引物和模板的錯配,提高反應(yīng)的特異性,可以讓 PCR對反應(yīng)條件的要求更低,所以很多PCR試劑都包含了 1020mM的硫酸銨。 ? 抑制水平的定義:通過瓊脂糖電泳觀察,能夠可重復(fù)性的降低 PCR產(chǎn)量的最低抑制劑濃度。 ? 2. hemin的抑制作用可以被 BSA或 gp32明顯減輕( 1000倍),但其降解產(chǎn)物 bilirubin卻不能(小于 10倍)。沒有其它抑制劑影響 pH值,即使是在很高的濃度。 ? 謝謝