神經(jīng)細(xì)胞體外培養(yǎng)方法及應(yīng)用-閱讀頁
2024-08-10 06:09本頁面
【正文】 液 ? 2天后（培養(yǎng)的第三天）換入有 DNA合成陰斷劑的培養(yǎng)液 神經(jīng)元的分離培養(yǎng)過程 大鼠大腦皮層神經(jīng)組織細(xì)胞培養(yǎng) 組織來源 ? 新生大鼠 12日齡 ， 碘 酒 ， 灑精消毒 。 ? 剪碎 ， ,用 DHank’s充分洗去殘血 ? 加入 510倍量 %胰蛋白酶 ， 移入離心管中放到水370C浴箱中消化 2025分鐘 。 吹打制成細(xì)胞懸液 。 ? 370C 5%CO2培養(yǎng) 2天后換生長培養(yǎng)液 大鼠海馬神經(jīng)細(xì)胞培養(yǎng)方法 神經(jīng)元體外生長特征 接種密度與體外存活率 ? 當(dāng) 96孔 每孔 20223000個 或 700010000個/cm2幾乎無神經(jīng)元存活 ? 當(dāng) 800012022個 /96孔 或 4萬個 /cm2 存活率最大 。 2. 藥物，細(xì)胞因子，對神經(jīng)細(xì)胞的作用，各種藥物，如 中藥，腦活素，神經(jīng)生長因子，成纖維細(xì)胞生長因子 （ bFGF）， 神經(jīng)營養(yǎng)因子 3. 細(xì)胞間相互作用：巨噬細(xì)胞，雪旺細(xì)胞等。 2. 激光共聚焦掃描顯微鏡（ laser confocal scanning microscope, LCSM) ： 研究細(xì)胞內(nèi)成分變化，離子改變等，三維重建 3. 膜片鉗技術(shù)，細(xì)胞表面通道和離子流動，電變化。 6. 顯微測量：胞體平均直徑和胞體橢圓率，突起長度及胞徑。 2. 特殊培養(yǎng)階段：培養(yǎng)的 9到 12天之間，有較多神經(jīng)元死亡，以后存活下的細(xì)胞突起長而多，互相形成網(wǎng)絡(luò)，電鏡下可見突觸。 研究范圍 ? 細(xì)胞凋亡 ? 細(xì)胞生長狀態(tài) ? 存活率 ? 膜流動性 ? 基因產(chǎn)物表達 ? 細(xì)胞內(nèi)酶活性 ? 細(xì)胞內(nèi)離子含量變化 ? 細(xì)胞表面受體，等等 放映完畢 請多指教
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