【正文】 10130491A121中，Aamp。編號結(jié)構(gòu)編號結(jié)構(gòu)1pEC50=2pEC50=3pEC50=4pEC50=567而在專利US2010099870A122中，Aamp?，F(xiàn)將部分化合物活性列出：編號結(jié)構(gòu)編號結(jié)構(gòu)4pEC50=5pEC50=6pEC50=7pEC50=8pEC50=而在專利US2009192153A123中，Aamp?，F(xiàn)將部分化合物活性列出（TLR7 HEK293）：編號結(jié)構(gòu)編號結(jié)構(gòu)1EC50=3EC50=15EC50=16EC50=17EC50=18EC50=在專利US2011306610A124中，Aamp?；衔锝Y(jié)構(gòu)見下表：編號結(jié)構(gòu)編號結(jié)構(gòu)1MEC=2MEC=3 nM3MEC=1 nM4MEC=1 nM56MEC=10 nM78MEC=3 nM9MEC=3 nM10MEC=1 nM11MEC=10 nM在專利US2011236348A125中，Gilead Sciences, ：此專利披露了約50個化合物結(jié)構(gòu)，部分活性結(jié)果見下表?；衔锝Y(jié)構(gòu)見下表：編號結(jié)構(gòu)編號結(jié)構(gòu)ACDFJNRWYAIAJAQASAUAYAWAZBEBGBHBM并且，上表中化合物W的活性在專利US2011150836A126中被深入報道?，F(xiàn)將部分代表性結(jié)構(gòu)列出：編號結(jié)構(gòu)編號結(jié)構(gòu)DEFGMOPTXAE在專利US2009202484A128中，Gilead Sciences, ： 此專利披露了約70個化合物結(jié)構(gòu)，部分活性結(jié)果見下表。編號結(jié)構(gòu)編號結(jié)構(gòu)1ED50=30 nM2ED50=5 nM4ED50=72 nM5ED50=42 nM6ED50=17 nM注：化合物1228在10μM濃度下對HCV的復(fù)制都表現(xiàn)出大于50%的抑制。部分化合物活性及結(jié)構(gòu)見下表：項目活性報告IFNα PBMCsTLR7(EC50=the concentration of poundat which 50% of the maximal IFN concentration was achieved)在專利US2012308609A131中，GlaxoSmithKline LLC公司披露了以下化合物：其活性結(jié)果如下表所示：項目活性報告IFNα PBMCs（冷藏）pEC50（以1μM resiquimod作參照）IFNα PBMCs（新鮮）pEC50≥9（以1μM resiquimod作參照）TNF PBMCs（新鮮）pEC50≤（以1μM resiquimod作參照）AllergenDriven Cytokine Assay PBMCs（新鮮）EC50≈ μMIFNα BALBc mice鼻內(nèi)給藥21029 pg/mLStability testing在Q1A和Q1B條件下穩(wěn)定、 擴環(huán)8羥基腺嘌呤類在專利US2010143301A13US2013071354A133中，Gilead Sciences, ：此專利披露了約120個化合物結(jié)構(gòu)，（IFNα MEC=）化合物結(jié)構(gòu)如下:TLR7 活性報告IFN PMBC Assay(IFNα MEC=引起IFNα的產(chǎn)生比空白試驗高三倍的最低濃度)249212437404956598389939699104110113結(jié)構(gòu)多樣性舉例編號結(jié)構(gòu)編號結(jié)構(gòu)576466P67708081P其它的生物活性測試情況見下表：項目活性報告HCV suppression AssayCytokine expression induction assay獼猴Cytokine expression induction assay miceCytokine expression induction assay healthy woodchucks抗WHV血清轉(zhuǎn)化慢性感染woodchucks而在專利US2011124627A134中，Gilead Sciences, ：此類化合物是TLR7或其它TLR亞型激動劑，部分化合物活性見下表（IFNα PBMCs）：編號結(jié)構(gòu)編號結(jié)構(gòu)AMEC=dBMEC=cCMEC=aDMEC=eEMEC=bFMEC=cGMEC=c注：a=1nM，b=19nM，c=1099nM，d=1001000nM，e=1000nM，、 艾沙托立賓（Isatoribine）衍生物類鳥嘌呤核糖核苷類似物艾沙托立賓（ANA245）及其前藥（ANA975）是目前臨床研究最多的口服TLR7激動劑。在原理驗證階段艾沙托立賓表現(xiàn)出良好的耐受性，以800mg最大劑量給藥，8/12個病人顯示出統(tǒng)計性的病毒載量降低，幅度，并且在此過程中伴隨著劑量依賴的IFN刺激的2,5OAS和ISG15產(chǎn)生的系統(tǒng)性增加。Anadys聯(lián)合Novartis開發(fā)了ANA975作為口服制劑。但隨后，由于在動物毒性研究中發(fā)現(xiàn)其會劑量依賴導(dǎo)致強烈的免疫刺激，Anadys終止了針對HCV病人的一個28天的Ⅰb期臨床項目。但是艾沙托立賓的另一個前藥（ANA773）也在被研發(fā)作為HCV治療藥物，并且看上去其效果好于ANA975。在專利US2005054590A135中，Anadys公司披露了以下骨架：編號結(jié)構(gòu)編號結(jié)構(gòu)12345678活性結(jié)果未見。部分化合物活性見下表：No.R7R8EC90（μM）No.R4R8EC90（μM）15Me11iPrOMe16MeOEt12Me17iPrOEt14cPnOH23cBuOMe24cPnOMe、 Bitriazolyl Acyclonucleoside類另一類鳥嘌呤核糖核苷類似物是Peng38等報道的如下所示雙三氮雜環(huán)類化合物。 其活性結(jié)果如下表所示：項目活性報告人TLR7 HEK293EC50= 52377EC50= 52378人TLR8 HEK293EC50=？ 52377EC50= 52378IFNα等 PBMCs對兩個化合物都有反應(yīng)、 嘧啶類（Pyrimidine）在專利WO2009030998 Al40中，Coley Pharmaceutical Group, ，它們是TLRTLR8和TLR9的激動劑?，F(xiàn)將部分代表性結(jié)構(gòu)列出：編號結(jié)構(gòu)編號結(jié)構(gòu)21pEC50=31pEC50=48pEC50=71pEC50=72pEC50=73pEC50=75pEC50=83pEC50=92pEC50=93pEC50=、 8Substitued Benzoazepines類 在專利US2012165317A143中，Array Biopharma ：化合物活性結(jié)果如下表所示：項目活性報告人TLR7/8 HEK293 （MC50= 50% of maximum induction concentration）MC50≤100μMTNFα等 PBMCsMC50≤100μM部分化合物結(jié)構(gòu)見下表：編號結(jié)構(gòu)編號結(jié)構(gòu)1234567 Aminodiazepine類在專利US2012208801A144中，ARRAY BIOPHARMA ：此類化合物是TLR8的選擇性激動劑，活性結(jié)果如下表所示：項目活性報告人TLR8 HEK293 （MC50= 50% of maximum induction concentration）MC50≤100μMTNFα等 PBMCsMC50≤100μM部分化合物結(jié)構(gòu)見下表：編號結(jié)構(gòu)編號結(jié)構(gòu)12345678二、 未來可能的變動空間以雙環(huán)為核心，對已有結(jié)構(gòu)進行歸納總結(jié)：再次我們以三環(huán)為核心，對已有結(jié)構(gòu)進行歸納總結(jié)；然后，我們再對邊鏈部分進行歸納總結(jié)；最后，將不同的核心結(jié)構(gòu)和邊鏈結(jié)構(gòu)進行排列組合（以上三階段工作在稍后進行）。我們將活性較理想的化合物邊鏈提取出來，組合到嘧啶并六元環(huán)中。在右側(cè)邊鏈的改造工作主要是Gilead Sciences, ，它們?yōu)榇松暾埩艘韵聦＠篣S2011236348A12US2011150836A12US2011098248A11US2010143301A12US2013071354A122?；蛘叽颂幍腄為吡啶基、哌啶基、哌嗪基或1,2,3,4四氫異喹啉基。為此，我們設(shè)計了第一階段目標化合物，避免聯(lián)苯結(jié)構(gòu)的出現(xiàn)。第二階段目標是固定第一階段所得優(yōu)選基團，對右側(cè)環(huán)上的取代情況進行考察：在這之前，先要合成幾個高活性的陽性對照物。體外活性結(jié)果如下表：項目活性報告IFNα等 PBMCsMEC≤Suppression of HCV replicons在動物體內(nèi)的藥動和藥效學(xué)結(jié)果如下：A、健康大猩猩上口服給藥：B、健康大猩猩上ISG和血清細胞因子誘導(dǎo)結(jié)果：陽性化合物反應(yīng)路線設(shè)計（US2010143301A132）： GS9620：另外一個合成路線：Example 96主要路線與GS9620相同，中間體的合成如下：參考文獻：1. (a) Pawlotsky, ., Therapy of hepatitis C: from empiricism to eradication. Hepatology (Baltimore, Md.) 2006, 43 (2 Suppl 1), 20。 Rice, C., Understanding the hepatitis C virus life cycle paves the way for highly effective therapies. Nature medicine 2013, 19 (7), 837849。 von Hahn, T., Novel therapies for hepatitis C one pill fits all? Nature reviews. Drug discovery 2013。 Neyts, J.。 Abrignani, S.。 De Francesco, R., Hepatitis C virusspecific directly acting antiviral drugs. Current topics in microbiology and immunology 2013, 369, 289320。 Luc, J. W. v. d. L., New targets for treatment against HCV infection. Best Practice amp。 (f) B252。 Bartenschlager, R., New targets for antiviral therapy of chronic hepatitis C. Liver international : official journal of the International Association for the Study of the Liver 2012, 32 Suppl 1, 916。 Sarrazin, C., New HCV therapies on the horizon. Clinical microbiology and infection : the official publication of the European Society of Clinical Microbiology and Infectious Diseases 2011, 17 (2), 122134。 (i) Lange, C.。 Zeuzem, S., Review article: specifically targeted antiviral therapy for hepatitis C a new era in therapy. Alimentary pharmacology amp。 Marcotrigiano, J