【正文】 0%,90%和80%丙酮的葉綠素譜圖進行比較，認為隨著水分的增加，葉綠素a, b的最大吸收波長由小向大移動(葉綠素a從662移至665nm，葉綠素b從647移至 649nm )，而且含水分樣品比脫水樣品更易提取色素(Vernon, 1960)。但是丙酮易揮發(fā)、易燃的性質仍是使用時需要考慮的問題(Jeffery, 1974)。 研磨法 研磨法主要是通過研磨機械破碎植物細胞，使溶劑更易進入細胞提取色素。這種方法至今仍被廣泛使用。其次轉移過程不可避免會引起遺漏而使操作者直接接觸溶劑。超聲波在狹小的空間內可產生20,000個大氣壓的壓力，并可產生穿越幾個微米的震動波，產生的瞬間高溫可達10，000K。.，時效果不如研磨法，而當功率達到398 W.，時效果優(yōu)于研磨法(Chang et al., 19$2。如果總傳輸功率只有60 W，超聲波很少能穿透置入超聲儀中的樣品容器外壁進入溶液(Sartory et al., 1984)。使用大功率超聲儀超聲10分鐘的操作會導致提取液溫度上升和色素降解(Sartory et al., 1984)。（1）洪法水對菠菜葉綠素提取的研究[5]方法：將從市場采購的菠菜洗凈，除去葉脈，剪碎、混勻，稱菠菜葉2g放入棕色試劑瓶中，加入60 ml 下列有機溶劑:丙酮，乙醇，甲醇，(丙酮):n(乙醇)=1:1混合液，浸泡至發(fā)白，用U V V is測定光吸收，每隔24 h測1次，測5次后，光吸收不再增加，計算葉綠素含量，并在350700 m1，過濾后測定光吸收，、直接浸提法和Arnon法提取葉綠素的效率. 結果:用n(丙酮):n(乙醇)=1:、乙醇單獨浸提的效率高. （2）李得孝對玉米葉綠素提取的研究[7]方法：按體積比配制提取液:80%丙酮，丙酮：乙醇（1：1），丙酮：乙醇：水（：：1），丙酮：甲醇（1：1），丙酮：甲醇：水（：：1），分別用上述幾種提取液浸提提取玉米葉綠素。因此，采用丙酮：乙醇為l：1的提取液提取葉綠素的方法最好。結果：用95%乙醇作為浸提液，測得的葉綠素含量在所有處理中均比用80%丙酮作浸提液的高，其差值平均為0. 274士0. 204,平均高13. 10%，說明用95%乙醇浸提效果比80%丙酮的好。避光處浸取至預定時間，每一處理均重復3次. 結果：一種好的提取溶劑應該是提取速度快、葉綠素得率高、穩(wěn)定性好且測定結果精密度高.，浸取8h提取液的提取效果并不是很理想，葉綠素含量普遍較低。丙酮:95%乙醇2:1為提取液，浸取24h為提取牡丹葉綠素的最佳方法.葉綠素提取方法的研究報導不盡一致，加之葉綠素不穩(wěn)定，見光易氧化分解，各種測定方法均有一定誤差。由于直接浸泡法操作簡單且實驗得出的效果比較好，我們采用直接浸泡法。2. 2 葉綠素的測定方法 測定方法的發(fā)展及趨勢 1941年Mackinney直接以80%丙酮為溶劑用分光光度法定量測定了葉綠素a和b(Mackinney, 1941)。1955年Smith和Benitez分光光度法測定葉綠素a和b，同時還可以測定其它葉綠素和其衍生物(Smith et al., 1955 )。1963年Parson和Strickland認為Richard和Thompson的結果有許多矛盾之處，并對葉綠素和類胡蘿卜素的計算公式進行了修訂（Parson et al., 1963)。何之常等用乙醇和丙酮提取水稻葉綠素，張憲政等用丙酮和無水乙醇1:1混合液提取小麥葉綠素，劉絢霞提出了用丙酮和乙醇的2:1混合法提取測定油菜葉綠素。 Wright。 Roy, 1987)，從此時起葉綠素就可以不受其降解產物影響進行準確的定量分析。其原理是樣品吸收了強度經調制的入射能量，通過無輻射方式將吸收的能量轉變成熱能，熱能以熱波形式在樣品和周圍氣體中轉變成聲能，形成光信號。研究人員以刺槐的葉片為樣品用光聲光譜法和Arnon法測定葉綠素，結果表明Arnon法測的葉綠素a和b的含量分別于647nm和426nm處的光聲信號強度具有明顯的相關性。 Arnon法（分光光度法）及Arnon公式簡介 分光光度法：利用分光光度計測定葉綠素提取液在最大吸收波長下的吸光值，即可用朗伯—比爾定律計算出提取液中各色素的含量。因此測定提取液在645nm、663nm、波長下的吸光值，并根據經驗公式可分別計算出葉綠素a、葉綠素b和總葉綠素的含量。本次試驗各品種樹葉于2007年5月1日至21日采自東北林業(yè)大學校園，采集后帶回實驗室處理。2溶劑揮發(fā)性小，毒性小。(2)不改變葉綠素的結構葉綠素結構式中有酯鍵，避免選用強酸強堿性溶劑，以免破壞酯鍵，改變葉綠素的結構。所選溶劑最好能溶解或破壞細胞壁，使葉綠素溶出，而且不改變葉綠素的結構和性質。根據以上原則，可以選擇丙酮和乙醇，本實驗采用丙酮和乙醇的1：1溶劑提取葉綠素。用吸水紙吸干葉體表面水分,按不同種類的樹葉分別放入密封塑料袋中,然后放入低溫冰箱冷藏保存待用。將葉片洗凈，擦干，去掉中脈剪碎，每種采若干片樹葉，分別測其重量。葉綠素b濃度(mg/l): Cb = 663。 時間種類第一天第四天第十天第十四天第二十天 柳 樹葉片質量葉綠素a葉綠素b總葉綠素葉綠素濃度 丁 香葉片質量葉綠素a葉綠素b總葉綠素葉綠素濃度華北衛(wèi)矛葉片質量葉綠素a葉綠素b總葉綠素葉綠素濃度1..0060實驗一：從本次實驗中，我們可以看到隨著葉子的生長，葉片當中的葉綠素a、b的含量都在逐漸的增加，柳樹在整個過程中葉綠素a的含量一直大于葉綠素b的含量，而華北衛(wèi)矛和丁香在初期是葉綠素a大于葉綠素b，但到后期卻相反。還有再加一些掃描的光譜圖。同一種植物在不同的生長過程中，其葉綠素的含量也不相同，但生長到一定時期（每種大約幾天說出來），葉綠素的含量已基本不變。5 結論植物葉片葉綠素含量與光合速率、營養(yǎng)狀況等密切相關，實踐上通常測定葉綠素含量以表征植物生長狀況，也往往把葉色變化作為看苗診斷和肥水管理的重要指標。但是對于林業(yè)方面、樹木葉綠素的提取研究卻很少，研究樹木葉綠素對于研究我國樹木的分布、病蟲害防治等同樣具有重大意義。通過一系列的實驗得到以下結論：1直接浸提法在樹木葉綠素提取的應用中要優(yōu)于傳統(tǒng)的研磨法，適合大量提?。?分光光度法測定植物葉片葉綠素含量，由于所用提取溶劑不同，測定結果差異顯著。本試驗結果表明，丙酮：乙醇１：１法具有上述特點，是一種較好的葉綠素提取溶劑；3葉綠體結構的熒光分析方法對于植物葉綠素提取機理的研究有一定的可行性，有待于進一步研究。在這里，我對我的指導老師魏崇老師致以我最衷心的感謝，感謝她在我做論文期間給予我的耐心指導，正是因為魏老師的悉心講解才使我的論文得以順利完成。同時，我想再一次對魏老師的學術思想和人格表示崇高的敬意，對魏老師對我論文的辛勤付出表示衷心的感謝。同時，我也對所有關心，支持過我的老師，同學，親人和朋友們表示最誠摯的感