【正文】 養(yǎng)：普通常用培養(yǎng)基； 遺傳研究：成分清楚的合成培養(yǎng)基； 生理、代謝研究：選用相應(yīng)的培養(yǎng)基配方； 例如枯草芽孢桿菌： 一般培養(yǎng)：肉湯培養(yǎng)基或 LB培養(yǎng)基； 自然轉(zhuǎn)化：基礎(chǔ)培養(yǎng)基； 觀察芽孢：生孢子培養(yǎng)基； 產(chǎn)蛋白酶：以玉米粉、黃豆餅粉為主的產(chǎn)酶 培養(yǎng)基； 一、選用和設(shè)計(jì)培養(yǎng)基的原則和方法 營養(yǎng)物質(zhì)濃度及配比合適 營養(yǎng)物質(zhì)的濃度適宜；營養(yǎng)物質(zhì)之間的配比適宜； 高濃度糖類物質(zhì)、無機(jī)鹽、重金屬離子等不僅不能維持和促進(jìn)微生物的生長，反而起到抑制或殺菌作用。 發(fā)酵生產(chǎn)谷氨酸時： 碳氮比為 4/1時，菌體大量繁殖，谷氨酸積累少； 碳氮比為 3/1時，菌體繁殖受到抑制，谷氨酸產(chǎn)量則大量增加。 純水 αw 為 ,溶液中溶質(zhì)越多 , αw 越小。 微生物不同，其生長的最適 αw 不同。 就象微生物與 pH的關(guān)系一樣，不同類型微生物生長對 氧化還原電位 (Ф) 的要求不同 好氧性微生物： + 以上時可正常生長 ,以 +～ + 為宜； 厭氧性微生物 ： 低于 + 條件下生長； 兼性厭氧微生物： + 以上時進(jìn)行好氧呼吸 , + 以下時進(jìn)行發(fā)酵。 氧化還原電位與 氧分壓 和 pH有關(guān) ,也受某些微生物 代謝產(chǎn)物 的影響 一、選用和設(shè)計(jì)培養(yǎng)基的原則和方法 經(jīng)濟(jì)節(jié)約 配制培養(yǎng)基時應(yīng)盡量利用廉價且易于獲得的原料作為培養(yǎng)基成份 , 特別是在發(fā)酵工業(yè)中 ,以降低生產(chǎn)成本。 而且在經(jīng)濟(jì)上也節(jié)約。 以工農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中易污染環(huán)境的廢棄物作為培養(yǎng)微生物的原料。 工業(yè)上的甲烷發(fā)酵主要利用廢水、廢渣作原料 , 在我國農(nóng)村，已推廣利用糞便及禾草為原料發(fā)酵生產(chǎn)甲烷作為燃料。 以大氣氮、銨鹽、硝酸鹽或尿素等一類非蛋白質(zhì)或非氨基酸廉價 原料用作發(fā)酵培養(yǎng)基的原料，讓微生物轉(zhuǎn)化成菌體蛋白質(zhì)或含氮 的發(fā)酵產(chǎn)物供人們利用。 合成培養(yǎng)基 (synthetic medium)： 化學(xué)限定培養(yǎng)基 是由化學(xué)成份完全了解的物質(zhì)配制而成的培養(yǎng)基， 優(yōu)點(diǎn)： 重復(fù)性強(qiáng)。用途：進(jìn)行微生物營養(yǎng)要求、 代謝、分類鑒定、生物量測定、菌種選育、遺傳分析等 營養(yǎng)物質(zhì) 來源 主要成份牛肉浸膏 瘦牛肉組織浸出汁濃縮而 富含水溶性碳水化合物、有機(jī) 成的膏狀物質(zhì) 氮化合物、維生素、鹽等蛋白胨 將肉、酪素或明膠用酸或 富含有機(jī)氮化合物、也含有一 蛋白酶水解后干燥而成的 些維生素和碳水化合物 粉末狀物質(zhì)酵母浸膏 酵母細(xì)胞的水溶性提取物 富含 B 類維生素 , 也含有有機(jī)氮 濃縮而成的膏狀物質(zhì) 化合物和碳水化合物第二節(jié) 培養(yǎng)基 二、 培養(yǎng)基的類型及應(yīng)用 2．根據(jù)物理狀態(tài)劃分 液體培養(yǎng)基（ liquid medium） ； 不加凝固劑，主要用于大規(guī)模工業(yè)發(fā)酵以及實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行微生物的各種生理、代謝研究和獲得大量菌體之用。一般用于觀察微生物的運(yùn)動特 征、分類鑒定及噬菌體效價測定等。 第二節(jié) 培養(yǎng)基 二、 培養(yǎng)基的類型及應(yīng)用 3．按用途劃分 1）基礎(chǔ)培養(yǎng)基 (minimum medium) 在一定條件下含有某種微生物生長繁殖所需的基本營養(yǎng)物質(zhì)的培養(yǎng)基， 也稱為基本培養(yǎng)基。 2）完全培養(yǎng)基 (plete medium) 在一定條件下含有某種微生物生長繁殖所需的所有營養(yǎng)物質(zhì)的培養(yǎng)基 牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基就是枯草芽孢桿菌等的完全培養(yǎng)基 二、 培養(yǎng)基的類型及應(yīng)用 3．按用途劃分 3）加富培養(yǎng)基和富集培養(yǎng)基 (enrichment medium) 在普通培養(yǎng)基（如肉湯蛋白胨培養(yǎng)基）中加入某些特殊營養(yǎng)物質(zhì)制成的一類營養(yǎng)豐富的培養(yǎng)基。用來培養(yǎng)營養(yǎng)要求比較苛刻的異養(yǎng)型微生物，如培養(yǎng)百日咳博德氏菌 (Bordetella pertussis)需要含有血液的加富培養(yǎng)基。 （目的微生物在這種培養(yǎng)基中較其他微生物生長速度快，并逐漸富集而占優(yōu)勢，從而容易達(dá)到分離該種微生物的目的。 用于微生物的快速分離鑒定以及分離和篩選產(chǎn)生某種代謝產(chǎn)物 的微生物菌種。 5）選擇培養(yǎng)基 (selective medium) 5）選擇培養(yǎng)基 (selective medium) 第三節(jié) 營養(yǎng)物質(zhì)進(jìn)入細(xì)胞 營養(yǎng)物質(zhì)能否被微生物利用的一個重要因素是這些營養(yǎng)物質(zhì)能否 進(jìn)入微生物細(xì)胞。 為純粹的物理學(xué)過程，不消耗能量， 其動力來自參與擴(kuò)散的物質(zhì)在膜內(nèi)外的濃度差，營養(yǎng)物質(zhì)不能逆濃度運(yùn)輸。 擴(kuò)散并不是微生物細(xì)胞吸收營養(yǎng)物質(zhì)的主要方式 ,水 是唯一可以通過擴(kuò)散自由通過原生質(zhì)膜的分子 ,脂肪酸、乙醇、甘油、苯、 一些氣體分子 (OCO2)及某些 氨基酸 在一定程度上也可通過擴(kuò)散進(jìn)出細(xì)胞。 運(yùn)輸葡萄糖的載體只運(yùn)輸葡萄糖。 ? 被動的物質(zhì)跨膜運(yùn)輸方式 ? 物質(zhì)運(yùn)輸過程中不消耗能量 ? 參與運(yùn)輸?shù)奈镔|(zhì)本身的分子結(jié)構(gòu)不發(fā)生變化 ? 不能進(jìn)行逆濃度運(yùn)輸 ? 運(yùn)輸速率與膜內(nèi)外物質(zhì)的濃度差成正比。 ? 有膜載體參加，膜載體發(fā)生構(gòu)型變化 ? 被運(yùn)送物質(zhì)不發(fā)生任何變化。 呼吸能、化學(xué)能和光能的消耗，引起胞內(nèi)質(zhì)子外排，導(dǎo)致原生質(zhì)膜內(nèi)外建立質(zhì)子濃度差，使膜處于充能狀態(tài)。 逆向運(yùn)輸 (antiport)： 某一物質(zhì)與質(zhì)子通過同一載體按相反方向進(jìn)行運(yùn)輸。 為什么被稱為： 次級主動運(yùn)輸？ 通過初級主動運(yùn)輸建立的能化膜在質(zhì)子濃度差消失的過程中，往往偶聯(lián)其它物質(zhì)的運(yùn)輸 。脂肪酸、核苷、堿基等也可通過這種方式運(yùn)輸。運(yùn)輸過程中需要能量，被運(yùn)輸?shù)奈镔|(zhì)發(fā)生化學(xué)變化的運(yùn)輸叫基團(tuán)移位。這種運(yùn)輸方式是微生物通過磷酸轉(zhuǎn)移酶系統(tǒng)來運(yùn)輸營養(yǎng)物質(zhì)的。細(xì)胞內(nèi)維持高濃度 K+是保證許多酶活性和蛋白質(zhì)合成所必須的。 ? 主動運(yùn)輸 ——鈉鉀泵（直接消耗 ATP） 第三節(jié) 營養(yǎng)物質(zhì)進(jìn)入細(xì)胞 四、膜泡運(yùn)輸 (memberane vesicle transport) 膜泡運(yùn)輸主要存在于原生動物中，特別是變形蟲 (amoeba)， 為這類微生物的一種營養(yǎng)物質(zhì)的運(yùn)輸方式 )。能否找到一種培養(yǎng)基，使所有的微生物都能良好地生長？為什么？ 2）試結(jié)合微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)課的內(nèi)容，談?wù)勗谶x擇、配制和使用培養(yǎng)基時應(yīng)注意哪些方面的內(nèi)容。