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核酸化學(xué)ppt課件(2)-閱讀頁

2025-05-27 04:20本頁面
  

【正文】 纖維的構(gòu)象)DNA脫水時(shí),就轉(zhuǎn)變?yōu)?A型(濕度: 75% DNA鈉鹽纖維的構(gòu)象),也是由反向的兩條多核苷酸鏈組成右手螺旋。 , 兩個(gè)核苷酸之間的夾角為 33176。 RNA— DNA雜交雙鏈 以及 RNA雙螺旋區(qū) 具有與 A- DNA相似的結(jié)構(gòu)。因?yàn)榱姿峄诙嗪塑账峁羌苌系姆植汲省?Z”字型,又稱為 Z- DNA。 類型 旋轉(zhuǎn)方向 螺旋直徑( nm) 螺距( nm) 每轉(zhuǎn)堿基對(duì)數(shù)目 堿基對(duì)間垂直距離( nm) 堿基對(duì)與水平面傾角 A- DNA B- DNA Z- DNA 右 右 左 11 10 () 12 20186。 7186。另外, DNA的polyPu- polyPy區(qū)段同樣可轉(zhuǎn)變?yōu)槿溄Y(jié)構(gòu)。第三股鏈的存在可能阻礙了一些調(diào)控蛋白或RNA聚合酶與 DNA的結(jié)合。 大多數(shù)原核生物 : 1)共價(jià)封閉的環(huán)狀雙螺旋分子 2)超螺旋結(jié)構(gòu):雙螺旋基礎(chǔ)上的螺旋化 ?正超螺旋 (positive supercoil):盤繞方向與雙螺旋方同相同 ?負(fù)超螺旋 (negative supercoil):盤繞方向與雙螺旋方向相反 DNA超螺旋 真核生物細(xì)胞內(nèi)-染色體 核小體 (nucleosome): 由 DNA和組蛋白構(gòu)成。 (一)、 tRNA的 二級(jí)結(jié)構(gòu) 和三級(jí)結(jié)構(gòu) tRNA一般由 四臂 四環(huán) 構(gòu)成 : 臂: ( 1)葉柄 —— aa臂, 3‘端:CCAOH結(jié)構(gòu),接受氨基酸。 ( 2)額外環(huán) ( 3) DHU環(huán) ( 4) TΨ環(huán)(含 TΨ序列) 額外環(huán) tRNA的三級(jí)結(jié)構(gòu) 倒 L形結(jié)構(gòu) (二)、 mRNA的結(jié)構(gòu) ? mRNA分子也是呈單鏈狀態(tài),大部分有突環(huán)形成二級(jí)結(jié)構(gòu) 。 在 3′-末端有長約 200核苷酸的 polyA ? 原核生物 mRNA一般無 3′- polyA和 5′-帽子結(jié)構(gòu)。 ?真核生物 mRNA一般為單順反子: 一條mRNA編碼一條多肽鏈。 16S rRNA 的二級(jí)結(jié)構(gòu) 原核生物(以大腸桿菌為例) 真核生物(以小鼠肝為例) 小亞基 30S 40S rRNA 16S 1542個(gè)核苷酸 18S 1874個(gè)核苷酸 蛋白質(zhì) 21種 占總重量的 40% 33種 占總重量的 50% 大亞基 50S 60S rRNA 23S 5S 2940個(gè)核苷酸 120個(gè)核苷酸 28S 5S 4718個(gè)核苷酸 160個(gè)核苷酸 120個(gè)核苷酸 蛋白質(zhì) 31種 占總重量的 30% 49種 占總重量的 35% 核蛋白體的組成 * rRNA的功能 :組成核蛋白體 , 作為蛋白質(zhì)合成的場所 。 ?溶液中的核酸在引力場中可以下沉,沉降速度與分子量和分子構(gòu)象有關(guān)。 一、一般性質(zhì) ? DNA分子由于直徑小而長度大,因此溶液 粘度極高 , RNA分子粘度則小得多。由于核酸分子在一定酸度的緩沖液中帶有電荷,因此可利用電泳進(jìn)行分離和研究其特性。 二、紫外吸收性質(zhì) ?核酸在 260nm附近有最大吸收值,據(jù)此特性可定性和定量檢測核酸和核苷酸。 ? DNA變性的本質(zhì)是雙鏈間氫鍵的斷裂,不涉及磷酸二酯鍵的斷裂。 DNA變性 ?增色效應(yīng): DNA變性時(shí)其溶液 OD260增高的現(xiàn)象 。 變性因素: ?熱力 ?強(qiáng)酸 ?強(qiáng)堿 ?有機(jī)溶劑 ?變性劑 ?射線 ?機(jī)械力等。 Tm與下列因素有關(guān): ?① DNA的堿基組成: Tm值與 G- C含量成正比: ?②核酸的均一程度,均一性愈高的樣品,變性過程的溫度范圍愈小。 (二)復(fù)性 ?變性 DNA在適當(dāng)條件下,又可使彼此分開的鏈重新締合成為雙螺旋結(jié)構(gòu),全過程稱為復(fù)性。 ?將熱變性 DNA驟然降溫時(shí), DNA不能復(fù)性,只有在緩慢冷卻時(shí),才可復(fù)性。 (三)分子雜交 (hybridization) ?不同來源的 DNA分子放在一起熱變性,然后慢慢冷卻,讓其復(fù)性。 ?DNA與互補(bǔ)的 RNA之間也可以發(fā)生雜交。 如:染色體 核糖體 病毒 染色體 煙草 花葉病毒 噬菌體 核糖體
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