生物化學(xué)核酸ppt課件(2)-閱讀頁(yè)
2025-05-16 13:29本頁(yè)面
【正文】 面垂直于螺旋軸 戊糖在外，雙螺旋每轉(zhuǎn)一周 為 10堿基對(duì)（ bp） A型結(jié)構(gòu) 堿基平面傾斜 20186。 Z型結(jié)構(gòu) 左手螺旋，只有小溝 nm 小溝 大溝 雙螺旋 DNA的結(jié)構(gòu)參數(shù) 類型 旋轉(zhuǎn)方向 螺旋直徑（ nm） 螺距（ nm） 每轉(zhuǎn)堿基對(duì)數(shù)目 堿基對(duì)間垂直距離（ nm） 堿基對(duì)與水平面傾角 A－ DNA B－ DNA Z－ DNA 右 右 左 11 10 12 20186。 7186。 ?分子中含有較多的修飾成分。末端都具有 CpCpAOH的結(jié)構(gòu)。 五、 snRNA （ small nucleic RNA 核小 RNA） scRNA （ small cytoplasmic RNA） asRNA （ antisense RNA） 第五節(jié) 核酸的性質(zhì) 一、一般的理化性質(zhì) ? 兩性解離 / 一般呈酸性（在中性溶液中帶負(fù)電荷），微 溶于水，不溶于有機(jī)溶劑 ?線性大分子（粘度高。 ? 以 A260/A280進(jìn)行定性、定量 ? DNA和 RNA溶液中加入溴化乙錠（ EB），在紫外下發(fā)出熒光 三、核酸的變性、復(fù)性與分子雜交 1. 變性 ? 穩(wěn)定核酸雙螺旋次級(jí)鍵斷裂，空間結(jié)構(gòu)破壞，變成單鏈結(jié)構(gòu)的過(guò)程。 ? 變性表征 生物活性部分喪失、粘度下降、浮力密度升高、紫外吸收增加（增色效應(yīng)） ? 變性因素 pH（ ） 變性劑（脲、甲酰胺、甲醛） 低離子強(qiáng)度 加熱 ? DNA的變性過(guò)程 是突變性的，它在很窄的溫度區(qū)間內(nèi)完成。 ? 一般 DNA的 Tm值在 7085?C之間。 ? G和 C的含量高， Tm值高。 ? DNA復(fù)性后，一系列性質(zhì)將得到恢復(fù)，但是生物活性一般只能得到部分的恢復(fù)，具有減色效應(yīng)。變性的 DNA緩慢冷卻時(shí)可復(fù)性，因此又稱為 “ 退火 ” 。這樣形成的新分子稱為 雜交 DNA分子 。 ? Southern 雜交（ Southern bolting） ? Northern 雜交（ Northern bolting） ? Western 雜交 （ Western bolting） 四、核酸的序列測(cè)定 1. 雙脫氧鏈終止法（ Sanger酶法） 2. Gilbert化學(xué)降解法 本 章 小 結(jié) ? 核酸是遺傳物質(zhì)載體的證明和研究歷史 ? 核酸的化學(xué)結(jié)構(gòu)：戊糖、堿基（ A、 T、 G、 C、 U），核苷、核苷酸及其衍生物的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)（原子編號(hào)） ? DNA的結(jié)構(gòu)：一級(jí)結(jié)構(gòu)（核酸序列及其表示、基因及基因組、序列測(cè)定）、二級(jí)結(jié)構(gòu)（ Watson －Crick雙螺旋模型、 Z－ DNA）、結(jié)構(gòu)維持的化學(xué)鍵 ? RNA結(jié)構(gòu)與功能：堿基組成特點(diǎn)、 RNA的種類結(jié)構(gòu)及功能 ? 核酸的性質(zhì)：酸堿性、變性與復(fù)性、分子雜交
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