動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)改ppt課件-閱讀頁
2025-05-27 02:41本頁面
【正文】 制作用的多肽 ? 篩選、開發(fā)所需的細(xì)胞系? 確定細(xì)胞生產(chǎn)的營養(yǎng)和環(huán)境條件? 放大開始? 中試? 擴(kuò)大生產(chǎn)存在的主要問題 ：? ? 培養(yǎng)基、培養(yǎng)基設(shè)備及培養(yǎng)用微載體昂貴，難以轉(zhuǎn)化為生產(chǎn)力；? 對(duì)細(xì)胞代謝和生長動(dòng)力學(xué)的研究比較欠缺；? 在線監(jiān)測水平技術(shù)不完善，限制了優(yōu)良培養(yǎng)系統(tǒng)的開發(fā)。展望? 機(jī)制方面的理論研究。? 開發(fā)細(xì)胞生長性能優(yōu)良、易分離，能重復(fù)使用、新型廉價(jià)的微載體。Engineering)組織工程的三要素細(xì)胞、支架、信號(hào) 組織工程技術(shù)三個(gè)基本要素：種子細(xì)胞、支架 (細(xì)胞外基質(zhì) )信號(hào) (生長因子）A、 細(xì)胞必須能不斷進(jìn)行細(xì)胞分裂，且必須能被調(diào)控分化成特定的組織細(xì)胞干細(xì)胞 ：胚胎干細(xì)胞、成體干細(xì)胞組織來源細(xì)胞 ：自體或異體Growth factor stimulation種子細(xì)胞B、 組織生長支架需求：細(xì)胞外基質(zhì) （extracelluarmatrix,蛋白質(zhì)支架多糖支架磷酸鈣基生物材料硫酸鈣基生物材料作用 :細(xì)胞增殖提供營養(yǎng)物質(zhì)，有助于氧和二氧化碳交換、廢物排泄；自身能逐漸被人體降解、吸收和排泄。表皮生長因子 （ EpidermalFactor） ： 人體內(nèi)分泌的一種重要的生長因子，極微量即能強(qiáng)烈促進(jìn)皮膚細(xì)胞的分裂和生長 。神經(jīng)生長因子 （ NGF） ： 為神經(jīng)細(xì)胞特異性分泌的營養(yǎng)蛋白。growthmorphogeicC、 生長因子（ 1）體外得到工程化組織、移植 —— 目前主要的方式（ 2）細(xì)胞與支架前體混合注射體內(nèi)，原位形成凝膠支架，提供新組織形成的空間技術(shù)路線皮膚修復(fù)骨修復(fù)治療過程Source:LifeSciencesIntegraCorporation雙層人工皮膚 Apligraf組織工程人工骨缺損修復(fù)示意圖二、應(yīng)用移植：拆東墻補(bǔ)西墻? 異體移植：免疫排斥，數(shù)量有限? 組織代用品：與人體相容性差、易感染? 利用人體殘余器官的少量正常細(xì)胞進(jìn)行體外培養(yǎng)，獲得患者所需的、具有相同功能的器官，不存在排斥反應(yīng)。000多億美元，幾乎占全美國醫(yī)療費(fèi)用的一半。? 每年約有 4? 用于骨缺損修復(fù)的骨移植手術(shù)在美國務(wù)醫(yī)院是僅次于輸血的組織移植手術(shù)。000萬人因尿道功能失調(diào)，尿失禁或尿液返流，等待組織工程產(chǎn)品植入治療；? 約有 100萬個(gè)膝關(guān)節(jié)半月軟骨等待替代；? 每年有 1000萬例牙科手術(shù)，其中需新放入 9? 每年約有 200萬例以上的皮膚慢性潰瘍，其中50萬例系糖尿病性肢體缺項(xiàng)血，需要組織工程化皮膚移植治療。? 骨關(guān)節(jié)置換 558,200人 /年。? 骨科內(nèi)固定 480,000人 /年。? 腎移植 600,000人 /年。? 牙科材料 10,000,000人 /年。 瓦康季 首次用裸鼠的肋骨 在老鼠背上成功培育出人的耳朵的軟骨；? 曹誼林教授 (國家 “ 973” 組織工程首席科學(xué)家 )， 1996年成功在無免疫功能的裸鼠體內(nèi)再造了 “ 人耳 ” ；? 1997年， Organogenesis公司研制的與人類皮膚相同的 Apligraf，是第一個(gè)獲得食品及藥物管理局（ FDA）批準(zhǔn)的人造組織。 三、進(jìn)展 還成功地在兔子耳朵上復(fù)制出 “ 人耳 ” ；培養(yǎng)箱里培養(yǎng)出來了 “ 體外再生耳朵 ” 。??2022，著名生命科學(xué)家 徐榮祥 教授領(lǐng)導(dǎo)的科研小組已成功在體外人工培養(yǎng)出神經(jīng)。顯微鏡下的毛囊細(xì)胞 2022年 4月 2日，裴國獻(xiàn)教授利用顯微外科技術(shù)，構(gòu)建出帶血管的組織工程化羊骨，并以此修復(fù)缺損的羊脛骨獲成功。 肝臟、胰臟、心臟、乳房、手指和耳朵等正在實(shí)驗(yàn)室里生長成形。此外，科學(xué)家 唾液腺能分泌抗真菌蛋白質(zhì)；皮膚能釋放生長激素。不用剝動(dòng)物皮而做皮衣的新辦法 據(jù)俄羅斯媒體報(bào)道，研究人員奧隆 丘爾 摹仿生物體發(fā)明一種生物反應(yīng)器 ，往里面放進(jìn)去動(dòng)物皮的活細(xì)胞，結(jié)果培育出衣袖、后襟和領(lǐng)子一應(yīng)俱全的皮大衣。皮膚替代物美國 FDA批準(zhǔn)美國加利福尼亞州一家公司生產(chǎn)的商品名為 TransCyte的皮膚替代物進(jìn)入市場。TransCyte度或 3BodyPart其次，應(yīng)用多分支的、多孔滲水的聚羥基乙酸聚合體，塑造了一個(gè)膀胱形狀的模子，再在其表面涂上聚乳酸類物質(zhì)。7只小獵犬的正常膀胱。個(gè)月后，聚合體在新膀胱組織中消失，小獵犬的機(jī)體開始用自身的血管供應(yīng)新膀胱，新膀胱和正常的膀胱一樣能容納尿液，并維持正常的膀胱形態(tài)，甚至還接受機(jī)體神經(jīng)支配。? 零部件工廠? 欲求之特性? 面向患者小結(jié)七、器官培養(yǎng)? 定義和特點(diǎn)? 培養(yǎng)技術(shù)? 實(shí)例? 研究進(jìn)展 ? 特點(diǎn)：培養(yǎng)對(duì)象為胚胎組織的某一器官或非胚胎組織器官的一部分；被培養(yǎng)物浸泡在培養(yǎng)液中，細(xì)胞增殖，器官保持正常功能；被培養(yǎng)組織器官的細(xì)胞靠簡單的深透擴(kuò)散方式從培養(yǎng)液中獲得氧氣和其他營養(yǎng)物質(zhì)，并排泄廢物。成年器官培養(yǎng)： 對(duì)氧的要求高，細(xì)胞高度分化，內(nèi)部細(xì)胞的遷移不明顯。材料：成年哺乳動(dòng)物的胸動(dòng)脈，固定后剖開胸部，取出胸動(dòng)脈，用培養(yǎng)液沖洗動(dòng)脈內(nèi)壁，剪成 左右的動(dòng)脈管。 37度培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。? 20世紀(jì)初，利用胚胎器官培養(yǎng)的研究活躍； 20世紀(jì) 50年代，器官培養(yǎng)進(jìn)入蓬勃發(fā)展階段。? 目前，培養(yǎng)的人體器官已達(dá) 18種以上。? 定義? 特性和分類? 培養(yǎng)和建系? 應(yīng)用八、干細(xì)胞培養(yǎng)? 干細(xì)胞（ stemcells） 是一種具有多分化潛能和自我復(fù)制功能的早期未分化細(xì)胞。? （ 干 細(xì) 胞 :哺乳 動(dòng) 物的 許 多已分化 組織 和器官中都保留了一些能 夠 分裂形成 該組織 或器官的未分化原始 細(xì) 胞， 這 些 細(xì) 胞稱 為 干 細(xì) 胞。? 增殖 ：增殖速度較慢，利于進(jìn)入特定分化程序，避免產(chǎn)生自身突變。生長在培養(yǎng)液中的人胚胎干細(xì)胞(周圍是小鼠“喂養(yǎng)”細(xì)胞)從 分化潛能性 分如：表皮干細(xì)胞。多能干細(xì)胞：能夠形成兩種或兩種以上類型細(xì)胞的干細(xì)胞。全能干細(xì)胞：具有無性分化潛能的干細(xì)胞。從 來源 分干細(xì)胞分類把小鼠胚胎干細(xì)胞植入小鼠大腦（見左圖的藍(lán)色背景）之后，形成了類似于神經(jīng)細(xì)胞的細(xì)胞（見左圖棕色部分及右圖）干細(xì)胞發(fā)育成神經(jīng)細(xì)胞(1).ESC的獲得：桑椹胚、囊胚。小鼠選用 16－ 20細(xì)胞的桑椹胚；牛取 6－ 7天的桑椹胚或 7－ 8天的囊胚；人取 7－ 8天的囊胚。（ 2） .建系過程 ： ES細(xì)胞體外培養(yǎng)極易分化或喪失正常二倍體核型，必須進(jìn)行分化抑制培養(yǎng)。采用飼養(yǎng)層抑制物 ：選用 STO（ 小鼠胎兒成纖維細(xì)胞） 、 UE（ 子宮上皮細(xì)胞） 等細(xì)胞以絲裂霉素 C阻斷有絲分裂后制備成細(xì)胞單層。使用條件培養(yǎng)基 ：飼養(yǎng)單層細(xì)胞培養(yǎng)一定時(shí)間后，收集細(xì)胞培養(yǎng)液，處理后加入培養(yǎng)基中 ?；蛑苯酉蚧九囵B(yǎng)基中添加細(xì)胞分化抑制因子 LIF(白血病抑制因子 )。（ 3） .培養(yǎng)和誘導(dǎo)分化? ? 誘導(dǎo)分化：? （ 1）應(yīng)用干細(xì)胞 治療疾病 有著廣泛的前景。 用干細(xì)胞治療疾病的設(shè)想已進(jìn)入實(shí)踐檢驗(yàn)。 造血干細(xì)胞移植已成為治療白血病、各種惡性腫瘤放、化療后引起的造血和免疫系統(tǒng)功能障礙等疾病的重要手段?！ 〗M織工程用來修補(bǔ)由于意外損傷等引起功能喪失的體內(nèi)組織，滿足臨床康復(fù)的需要，并有可能對(duì)一些目前尚無根治辦法的疾病，如惡性腫瘤、帕金森病、中風(fēng)等提供解決方案。干細(xì)胞的產(chǎn)生及進(jìn)行組織修復(fù)產(chǎn)生人胚胎干細(xì)胞的胚泡 胚胎干用病人的 體細(xì)胞移植 到 去核的卵母 細(xì)胞內(nèi)，經(jīng)過一定的處理使其發(fā)育成囊胚，再利用囊胚建立細(xì)胞，在體外進(jìn)行誘導(dǎo)分化成特定的組織或器官，再將這些組織或器官移植到病人身上。（ 3）利用干細(xì)胞技術(shù) 體外克隆人體器官 用于移植治療?！ ⌒碌乃幬镏委煼椒梢韵扔萌祟惣?xì)胞系進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，如癌細(xì)胞系。 胚胎干細(xì)胞還可用來研究人類疾病的發(fā)生機(jī)制和發(fā)展過程，以便找到持久有效的治療方法。 此外，還存在一些倫理道德上的爭論。干細(xì)胞的研究和應(yīng)用的難點(diǎn)第四章
教學(xué)課件相關(guān)推薦
鄂ICP備17016276號(hào)-1