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微生物大小及數(shù)量測定-閱讀頁

2025-04-19 23:22本頁面
  

【正文】 : 目鏡測微尺校正完畢后,取下鏡臺測微尺,換上細菌染色制片。測定時,通過轉動目鏡測微尺和移動載玻片,測出細菌直徑或寬和長所占目鏡測微尺的格數(shù)。值得注意的是,和動植物一樣,同一種群中的不同細菌細胞之間也存在個體差異,因此在測定每一種細菌細胞的大小時應至少隨機選擇10個細胞進行測量,然后計算平均值。(2) 顯微鏡計數(shù) 菌懸液稀釋: 按照實驗所需倍數(shù)稀釋菌懸液,本實驗將釀酒酵母稀釋了20倍,得到的適合計數(shù)的菌懸液。若有污物,可用自來水沖洗,再用95%的乙醇棉球輕輕擦洗,然后用吸水紙吸干或用電吹風吹干。 加樣品: 將清潔干燥的血細胞計數(shù)板蓋上蓋玻片,再用無菌的毛細滴管將搖勻的釀酒酵母菌懸液由蓋玻片邊緣滴一小滴,讓菌液沿縫隙靠毛細滲透作用自動進入計數(shù)室,再用鑷子輕壓蓋玻片,以免因菌液過多將蓋玻片頂起而改變了計數(shù)室的容積。取樣時先要搖勻菌液,加樣時計數(shù)室不可有氣泡產(chǎn)生。若發(fā)現(xiàn)菌液太濃或太稀,需重新調節(jié)稀釋度后再計數(shù)。每個計數(shù)室選5個中格(可選4個角和中央的1個中格)中的菌體進行計數(shù)。如遇酵母出芽,芽體大小達到母細胞的一半時,即作為兩個菌體計數(shù)。 清洗:使用完畢后,將血細胞計數(shù)板及蓋玻片按前面介紹的程序進行清洗、干燥,放回盒中,以備下次使用。 使用鏡臺測微尺進行校正時,若一時無法直接找到測微尺,可先對刻尺外的圓圈線進行準焦后再通過移動標本推進器進行尋找。 細菌在不同的生長時期細胞大小有時會有較大變化,若需自己制樣進行細胞大小測定時,應注意選擇處于對數(shù)生長期的菌體細胞材料。 進行顯微技術時應先在低倍鏡下尋找大方格的位置,找到計數(shù)室后將其移至視野中央,再換高倍鏡觀察和計數(shù)。2.在不改變目鏡和目鏡測微尺,而改用不同放大倍數(shù)的物鏡來測定同一細菌的大小時,其測定結果是否相同?為什么? 答:不相同,不同放大倍數(shù)下測量的精度不同。 (2)懸菌液濃度過高或過低,應適當梯度稀釋。 (4)計數(shù)室的選擇不具有代表性看,不選相鄰的計數(shù)室計數(shù),可以選4個角和中間的任意小室計數(shù)。 (6)漏數(shù)了邊線或多數(shù)了邊線,一般選擇上和左邊線計數(shù),即“計上不計下,計左不計右”
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