微生物大小及數(shù)量測(cè)定-wenkub.com
2025-04-01 23:22 本頁(yè)面
【正文】 （6）漏數(shù)了邊線(xiàn)或多數(shù)了邊線(xiàn)，一般選擇上和左邊線(xiàn)計(jì)數(shù)，即“計(jì)上不計(jì)下，計(jì)左不計(jì)右”。 （2）懸菌液濃度過(guò)高或過(guò)低，應(yīng)適當(dāng)梯度稀釋。 進(jìn)行顯微技術(shù)時(shí)應(yīng)先在低倍鏡下尋找大方格的位置，找到計(jì)數(shù)室后將其移至視野中央，再換高倍鏡觀(guān)察和計(jì)數(shù)。 使用鏡臺(tái)測(cè)微尺進(jìn)行校正時(shí)，若一時(shí)無(wú)法直接找到測(cè)微尺，可先對(duì)刻尺外的圓圈線(xiàn)進(jìn)行準(zhǔn)焦后再通過(guò)移動(dòng)標(biāo)本推進(jìn)器進(jìn)行尋找。如遇酵母出芽，芽體大小達(dá)到母細(xì)胞的一半時(shí)，即作為兩個(gè)菌體計(jì)數(shù)。若發(fā)現(xiàn)菌液太濃或太稀，需重新調(diào)節(jié)稀釋度后再計(jì)數(shù)。 加樣品： 將清潔干燥的血細(xì)胞計(jì)數(shù)板蓋上蓋玻片，再用無(wú)菌的毛細(xì)滴管將搖勻的釀酒酵母菌懸液由蓋玻片邊緣滴一小滴，讓菌液沿縫隙靠毛細(xì)滲透作用自動(dòng)進(jìn)入計(jì)數(shù)室，再用鑷子輕壓蓋玻片，以免因菌液過(guò)多將蓋玻片頂起而改變了計(jì)數(shù)室的容積。（2） 顯微鏡計(jì)數(shù) 菌懸液稀釋?zhuān)? 按照實(shí)驗(yàn)所需倍數(shù)稀釋菌懸液，本實(shí)驗(yàn)將釀酒酵母稀釋了20倍，得到的適合計(jì)數(shù)的菌懸液。測(cè)定時(shí)，通過(guò)轉(zhuǎn)動(dòng)目鏡測(cè)微尺和移動(dòng)載玻片，測(cè)出細(xì)菌直徑或?qū)捄烷L(zhǎng)所占目鏡測(cè)微尺的格數(shù)。 用同樣的方法換成高倍顯微鏡和油鏡進(jìn)行校正，分別測(cè)出再高倍鏡和油鏡下，兩重合線(xiàn)之間兩尺分別所占的格數(shù)。 雙目顯微鏡的左目鏡通常配有屈光度調(diào)節(jié)環(huán)，不能被取下，因此使用雙目顯微鏡時(shí)目鏡微測(cè)尺一班都安裝在右目鏡中。一般來(lái)說(shuō)，同種不同個(gè)體的細(xì)菌細(xì)胞直徑的變化范圍較小，分類(lèi)學(xué)指標(biāo)價(jià)值更大，而長(zhǎng)度相對(duì)來(lái)說(shuō)變化范圍較大。以25個(gè)中方格的計(jì)數(shù)板為例，設(shè)5個(gè)中方格中的總菌數(shù)為A，菌液稀釋倍數(shù)為B，則： 1ml菌液中的總菌數(shù)=A247。計(jì)數(shù)室的刻度一般有兩種規(guī)格，一種是一個(gè)大方格分為25個(gè)中方格，而每個(gè)中方格又分為16個(gè)小方格；另一種是一個(gè)大方格分為16個(gè)中方格，而每個(gè)中方格又分為25個(gè)小方格，但無(wú)論哪一種規(guī)格的計(jì)數(shù)板，每一個(gè)大方格中的小方格數(shù)都是400個(gè)。目前已有一些方法可以克服這些缺點(diǎn)，如結(jié)合活菌染色、微室培養(yǎng)以及加細(xì)胞分裂抑制劑等方法來(lái)達(dá)到只計(jì)數(shù)活菌體的目的，或用染色處理等殺死細(xì)胞以計(jì)數(shù)運(yùn)動(dòng)性細(xì)菌等。目前國(guó)內(nèi)外常用的計(jì)菌器有：血細(xì)胞計(jì)數(shù)板、PeteroffHauser計(jì)菌器以及Hawksley計(jì)菌器等
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