微生物大小及數(shù)量測定(編輯修改稿)
2025-05-01 23:22 本頁面
【文章內(nèi)容簡介】 分類學指標價值更大，而長度相對來說變化范圍較大。顯微鏡直接計數(shù)法適宜對能在液體中均勻分散的微生物細胞或孢子的數(shù)量進行直接計數(shù)。通常使用的血細胞計數(shù)板不適合使用油鏡，因此采用個體較大的酵母細胞及霉菌孢子作為實驗材料，以保證實驗的觀察效果。 實驗步驟： （1）菌體大小的測定： 目鏡測微尺的安裝： 取出目鏡測微尺，把目鏡上的透鏡旋下，將目鏡測微尺刻度朝下放在目鏡筒內(nèi)的隔板上，然后旋上目鏡透鏡，再將目鏡插回鏡筒內(nèi)。 雙目顯微鏡的左目鏡通常配有屈光度調(diào)節(jié)環(huán)，不能被取下，因此使用雙目顯微鏡時目鏡微測尺一班都安裝在右目鏡中。 校正目鏡測微尺： 將鏡臺測微尺刻度面朝上放在顯微鏡載物臺上。先用低倍鏡觀察，將鏡臺測微尺有刻度的部分移至視野中央，調(diào)節(jié)焦距，當清晰地看到鏡臺測微尺的刻度后，轉(zhuǎn)動目鏡使目鏡測微尺的刻度與鏡臺測微尺的刻度平行。利用推進器移動鏡臺測微尺，使兩尺在某一區(qū)域內(nèi)兩線完全重合，然后分別數(shù)出兩重合線之間鏡臺測微尺和目鏡測微尺所占的格數(shù)。 用同樣的方法換成高倍顯微鏡和油鏡進行校正，分別測出再高倍鏡和油鏡下，兩重合線之間兩尺分別所占的格數(shù)。 由于已知鏡臺測微尺每格長10μm，根據(jù)下列公示即可分別計算出在不同放大倍數(shù)下，目鏡測微尺每格所代表的的長度。 目鏡測微尺每格長度（μm)=兩重合線間鏡臺測微尺格數(shù)10／兩重合線間鏡臺測微尺格數(shù) 菌體大小測定： 目鏡測微尺校正完畢后，取下鏡臺測微尺，換上細菌染色制片。先用低倍鏡和高倍鏡找到標本后，換油鏡測定釀酒酵母的直徑和枯草芽孢桿菌的寬度和長度。測定時，通過轉(zhuǎn)動目鏡測微尺和移動載玻片，測出細菌直徑或?qū)捄烷L所占目鏡測微尺的格數(shù)。最后將所測得的格數(shù)乘以目鏡測微尺每格所代表的的長度，即為該菌的實際大小。值得注意的是，和動植物一樣，同一種群中的不同細菌細胞之間也存在個體差異，因此在測定每一種細菌細胞的大小時應至少隨機選擇10個細胞進行測量，然后計算平均值。 測定完畢： 測量完畢后取出目鏡測微尺，將接目鏡放回鏡筒，再將目鏡測微尺和鏡臺測微尺分別用擦鏡紙擦干凈，放回盒內(nèi)保存。（2） 顯微鏡計數(shù) 1
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