浙江大學(xué)王鏡巖生物化學(xué)甲上第09章核酸的生物合成-閱讀頁(yè)
2025-02-02 02:05本頁(yè)面
【正文】 原核 rRNA加工： rRNA含非轉(zhuǎn)錄的間隔區(qū)，其產(chǎn)物中含 tRNA 真核 rRNA加工： 。 大腸桿菌 rRNA前體加工 真核生物 rRNA前體加工 ? tRNA前體的加工 ? tRNA前體在 tRNA剪切酶的作用下，切成一定數(shù)量的tRNA分子 ? 3’末端加上 CCA ? 堿基的修飾：甲基化、脫氨和還原作用 ? 真核 mRNA前體的加工 ? 剪接（ Splicing） 去除內(nèi)含子，連接外顯子 ? 5’帽端結(jié)構(gòu)的生成（如圖） ? 3’端多聚 A（ polyA）的附加 六、 RNA的復(fù)制合成（ RNA指導(dǎo)的 RNA合成） ?噬菌體 Qβ 的 RNA復(fù)制兩階段 （ 1）其單鏈 RNA可充當(dāng) mRNA，利用寄主中的核糖體合成 外殼蛋白 和 RNA復(fù)制酶的 β 亞基。 ?某些 RNA病毒可以以自身 RNA為模板進(jìn)行復(fù)制。1983年發(fā)現(xiàn) RNase P中的 RNA可催化 tRNA前體的加工。 （ 2）圖中的箭頭表示自我切割位點(diǎn)，位于 GUX的 X外側(cè)， X可表示為 C、 U或 A，不能是 G。 。 ，腫瘤等疾病提供手段。 ? 乳糖操縱子的調(diào)節(jié)機(jī)制 ? 色氨酸操縱子的調(diào)節(jié)機(jī)制 I－調(diào)節(jié)基因 P－啟動(dòng)子 O－操作子（操作基因） Z、 Y、 A－三種結(jié)構(gòu)基因 ?阻遏蛋白的負(fù)性調(diào)節(jié) 當(dāng)無(wú)誘導(dǎo)物乳糖存在時(shí)，調(diào)節(jié)基因編碼的阻遏蛋白（ repressor protein）處于活性狀態(tài)，阻止 RNA聚合酶與啟動(dòng)基因的結(jié)合，則無(wú)法啟動(dòng)轉(zhuǎn)錄。乳糖進(jìn)入細(xì)胞，經(jīng) β －半乳糖苷酶催化，轉(zhuǎn)變?yōu)榘肴樘恰? 異丙基硫代半乳糖苷（ IPTG）是一種作用極強(qiáng)的誘導(dǎo)劑，不被細(xì)菌代謝而十分穩(wěn)定，因此被實(shí)驗(yàn)室廣泛應(yīng)用。葡萄糖的分解代謝產(chǎn)物能抑制腺苷酸環(huán)化酶活性并活化磷酸二酯酶，從而降低了 cAMP的濃度， CAP不能被活化形成 CAP－ cAMP復(fù)合物，則不能轉(zhuǎn)錄。 ? lac操縱子強(qiáng)的誘導(dǎo)作用既需要乳糖存在又需缺乏葡萄糖。 Trp或 Trp－ RNA與阻遏蛋白結(jié)合，使之構(gòu)象發(fā)生變化與操縱基因結(jié)合，結(jié)構(gòu)基因不能表達(dá)。 真核基因的調(diào)控 ⑤ 翻譯調(diào)節(jié) （ translational control） 真核染色質(zhì)體（ DNA） ① 轉(zhuǎn)錄前調(diào)節(jié) 轉(zhuǎn)錄初級(jí)產(chǎn)物 RNA （ Pro－ RNA） hnRNA ③ 轉(zhuǎn)錄后加工的調(diào)節(jié)（ RNA Processing control） ④ 轉(zhuǎn)運(yùn)調(diào)節(jié)（ RNA transport control） mRNA ⑥ mRNA降解的調(diào)控 mRNA降解物 多肽鏈 ⑦ 翻譯后加工及蛋白質(zhì)活性控制（ protein activity control） 活性蛋白 失活蛋白 ② 轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)（ transcription control） ? 順式作用元件 (cis acting elements) 真核基因的順式調(diào)控元件是基因周?chē)芘c特異轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合而影響轉(zhuǎn)錄的 DNA序列。 ? （ Promoter） 是指 RNA聚合酶結(jié)合并起動(dòng)轉(zhuǎn)錄的 DNA序列。 ? ? ①核心啟動(dòng)子元件 (core promoter element) 指 RNA聚合酶起始轉(zhuǎn)錄所必需的最小的 DNA序列，包括轉(zhuǎn)錄起始點(diǎn)及其上游－ 25/－ 30bp處的 TATA盒。增強(qiáng)子的作用有以下特點(diǎn)： ? ①增強(qiáng)子提高同一條 DNA鏈上基因轉(zhuǎn)錄效率， 可以遠(yuǎn)距離作用 ，通?？删嚯x 1－ 4kb、個(gè)別情況下離開(kāi)所調(diào)控的基因 30kb仍能發(fā)揮作用，而且在基因的上游或下游都能起作用 ? ②增強(qiáng)子作用與其序列的正反方向無(wú)關(guān) ，將增強(qiáng)子方向倒置依然能起作用。 ? ③增強(qiáng)子要有啟動(dòng)子才能發(fā)揮作用 ，沒(méi)有啟動(dòng)子存在，增強(qiáng)子不能表現(xiàn)活性。 ? UAS（ upstream acticity sequence） CAATbox（－ 70～－ 80） GC BOX（－ 80～－ 110） ? 反式作用因子 (trans acting factors) 以反式作用影響轉(zhuǎn)錄的因子可統(tǒng)稱為轉(zhuǎn)錄因子(transcription factors, TF)。 ? GTF（ Genaral Transcription Factor） ? TBP(TATAbox binding protein) 是唯一能識(shí)別 TATA盒并與其結(jié)合的轉(zhuǎn)錄因子，是三種 RNA聚合酶轉(zhuǎn)錄時(shí)都需要的； ? 不同基因由不同的上游啟動(dòng)子元件組成，能與不同的轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合，這些轉(zhuǎn)錄因子通過(guò)與基礎(chǔ)的轉(zhuǎn)錄復(fù)合體作用而影響轉(zhuǎn)錄的效率
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