植物的脫毒技術(shù)ppt課件-閱讀頁
2025-01-28 20:02本頁面
【正文】 莖尖需數(shù)月培養(yǎng)才能成功。但在草莓中，二者沒什么差別。 ? 缺點： ? 技術(shù)要求高，植物的存活率低。 褐化 是降低莖尖培養(yǎng)成活率的首要因素，褐化的發(fā)生與許多因素有關(guān)，莖尖大小及受傷程度、取材季節(jié)、培養(yǎng)方式、激素濃度、基本培養(yǎng)基、培養(yǎng)基添加物都對莖尖褐化有影響，莖尖越小，受傷越多，褐化就越嚴(yán)重，成活率越低。應(yīng)用抗氧化劑ＡＣ和Ｖｃ也可有效抑制莖尖培養(yǎng)的褐化現(xiàn)象。 小結(jié) ? 剝?nèi)〉那o尖大小與莖尖的成活率呈正相關(guān)系，莖尖越大，成活率越高。 ? 莖尖大小與脫毒率呈負(fù)相關(guān)，莖尖越大，脫毒率就越低，莖尖越小，脫毒率就越高。 四、植物脫除病毒的方法 ? 許多化學(xué)藥品（包括嘌呤、 嘧啶類似物、氨基酸、抗菌素等）對離體組織和原生質(zhì)體具有脫毒效果。例如，將 100ug2硫脲嘧啶加入培養(yǎng)基可除去煙草愈傷組織中的 PVY（馬鈴薯 Y病毒）。 ? 二是將這些藥物加到植株生長的培養(yǎng)基上。經(jīng)過抗病毒藥劑處理的嫩莖，剝?nèi)∏o尖，再進(jìn)行組織培養(yǎng)，就會提高脫毒率和成活率。高濃度的病毒抑制劑不利于莖尖的誘導(dǎo)。例如已經(jīng)感染 TMV的煙草愈傷組織，經(jīng)機械分離后，發(fā)現(xiàn)僅有 40%細(xì)胞含有病毒；用感染 TMV的煙草髓部愈傷組織誘導(dǎo)出的愈傷組織，繼代四次后用熒光抗體法檢驗，幾乎不存在病毒。 四、植物脫除病毒的方法 ? （ 2）珠心胚培養(yǎng)脫毒 ? 柑橘類多胚品種中除了一個受精胚以外，尚有多個由珠心細(xì)胞形成的無性胚，稱為珠心胚。但珠心胚大多是不育的，必須分離培養(yǎng)才能發(fā)育成正常的幼苗。 四、植物脫除病毒的方法 ? （ 3）莖尖微體嫁接脫毒 ? 木本植物莖尖培養(yǎng)難以生根形成植株。利用這個方法 d 桃、柑橘、蘋果獲得成功。應(yīng)用這個技術(shù)，可獲得柑橘類沒有銀屑病植株、桃樹沒有洋李環(huán)斑病毒、洋李矮縮病毒、褪綠葉斑病毒的無病毒苗。 如：將熱處理技術(shù)與莖尖培養(yǎng)技術(shù)或與病毒抑制劑技術(shù)相結(jié)合，可有效地提高脫毒率。 ? 方法：摩擦接種法；嫁接接種法。 五、脫毒苗的鑒定 ? 利用病毒在其植株上出現(xiàn)癥狀的特征，作為鑒別種類的標(biāo)準(zhǔn)。指示植物分為兩種類型：一種早接種后產(chǎn)生的癥狀可擴張到非接種部位；另一種只在接種部位產(chǎn)生病斑。 5分鐘后用水沖洗葉面。 五、脫毒苗的鑒定 ? 較常用的指示植物有 ? 莧色藜（ Chenopodium amaranticolor）、昆諾阿藜 ()、 ? 千日紅 (Gomphrena globosa)和各種煙草等。由于不同病毒產(chǎn)生的抗血清都有特異性，用特定病毒的抗血清來鑒定該種病毒，具有高度專一性和特異性，幾分鐘至幾小時即可完成，方法簡便，所以成為植物病毒鑒定中最有用的方法之一。抗血清的鑒定法主要根據(jù)沉淀反映原理，具體測定有試管沉淀、凝聚試驗、免疫擴散、免疫電泳、熒光抗體技術(shù)和酶聯(lián)免疫吸附試驗等多種方法。 Casper首先用其測定了PLRV病毒。 將抗原固定在支持物上，加入待檢血清， 然后加入酶（過氧化物酶或堿性磷酸酶）標(biāo)記的抗體，使待檢血清中與對應(yīng)抗原的特異性抗體結(jié)合，最后用特殊分光光度計測定。 ? 五、脫毒苗的鑒定 ? 電子顯微鏡檢查法 ? 此法可直接觀察到病毒微粒是否存在，病毒顆粒的大小、形態(tài)和結(jié)構(gòu)。通常所有的技術(shù)包括投影法、背景染色法、表面復(fù)形的制備與掃描電鏡法，以及超薄切片法。所以一旦培育得到無病毒苗， 就應(yīng)很好隔離保存。 六、無病毒植物的保存和利用 ? （ 2）通常無病毒苗應(yīng)種植在隔蟲網(wǎng)內(nèi)，使用 300目， 即網(wǎng)眼為 ～ 的網(wǎng)紗，可以防止蚜蟲進(jìn)入。 六、無病毒植物的保存和利用 ? （ 3）有條件的地方可以到海島或高冷山地種植保存，那里氣候涼爽，蟲害少，有利于無病毒材料的生長，繁殖。 六、無病毒植物的保存和利用 ? 無病毒苗的利用 ? 無病毒苗在生產(chǎn)中的利用也要防止病毒的再感染。在此種植區(qū)及種植規(guī)模小的地方，要較長時間才會感染。一旦感染，影響產(chǎn)量質(zhì)量的，就應(yīng)重新采用無病毒苗，以保證生產(chǎn)的質(zhì)量。前兩種是主要方法。其中后者因不損傷植物材料，因而是目前最為常用的方法。 如：將熱處理技術(shù)與莖尖培養(yǎng)技術(shù)或與病毒抑制劑技術(shù)相結(jié)合，可有效地提高脫毒率。由于莖尖尚未形成維管束，所以莖尖一般是無毒的，可用于組織培養(yǎng)無毒苗木。
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