植物的脫毒技術(shù)ppt課件-資料下載頁
2025-01-13 20:02本頁面
【正文】 種植物的漿液含有病毒，數(shù)天至幾周后，指示植物即出現(xiàn)可見的癥狀。 五、脫毒苗的鑒定 ? 較常用的指示植物有 ? 莧色藜（ Chenopodium amaranticolor）、昆諾阿藜 ()、 ? 千日紅 (Gomphrena globosa)和各種煙草等。 五、脫毒苗的鑒定 ? 抗血清鑒定法 ? 植物病毒是由核酸和蛋白質(zhì)組成的核蛋白復(fù)合體，因而也是一種抗原，注射到動物體內(nèi)即產(chǎn)生抗體，抗體存在于血清之中，稱為抗血清。由于不同病毒產(chǎn)生的抗血清都有特異性，用特定病毒的抗血清來鑒定該種病毒，具有高度專一性和特異性，幾分鐘至幾小時即可完成，方法簡便，所以成為植物病毒鑒定中最有用的方法之一。 五、脫毒苗的鑒定 ? 抗血清鑒定首先要進(jìn)行抗原的制備，只有獲得高純度的抗原，才有可能獲得高度純凈的抗血清。抗血清的鑒定法主要根據(jù)沉淀反映原理，具體測定有試管沉淀、凝聚試驗(yàn)、免疫擴(kuò)散、免疫電泳、熒光抗體技術(shù)和酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)等多種方法。 五、脫毒苗的鑒定 ? 酶聯(lián)免疫吸附法 (ELISA)： ? 1997年 Clark和 Adams用微量血凝板建立了診斷植物病毒的 ELISA技術(shù)。 Casper首先用其測定了PLRV病毒。 ? 原理：是采用酶標(biāo)記抗原或抗體的定量測定法。 將抗原固定在支持物上，加入待檢血清， 然后加入酶（過氧化物酶或堿性磷酸酶）標(biāo)記的抗體，使待檢血清中與對應(yīng)抗原的特異性抗體結(jié)合，最后用特殊分光光度計測定。特點(diǎn)：特異性高；測定速度快；靈敏度高；可定量。 ? 五、脫毒苗的鑒定 ? 電子顯微鏡檢查法 ? 此法可直接觀察到病毒微粒是否存在，病毒顆粒的大小、形態(tài)和結(jié)構(gòu)。由于這些特征相當(dāng)穩(wěn)定， 故對病毒鑒定是很重要的。通常所有的技術(shù)包括投影法、背景染色法、表面復(fù)形的制備與掃描電鏡法，以及超薄切片法。 ? 侵染百合的病毒電鏡圖 六、無病毒植物的保存和利用 ? 無病毒苗的保存繁殖 ? （ 1）無病毒植株并不是有額外的抗病性，它們有可能很快又被重新感染。所以一旦培育得到無病毒苗， 就應(yīng)很好隔離保存。這些原原種或原種材料保管得好可以保存利用 5～ 10年。 六、無病毒植物的保存和利用 ? （ 2）通常無病毒苗應(yīng)種植在隔蟲網(wǎng)內(nèi)，使用 300目， 即網(wǎng)眼為 ～ 的網(wǎng)紗，可以防止蚜蟲進(jìn)入。栽培用的土壤也應(yīng)進(jìn)行消毒，周圍環(huán)境也要整潔，并及時噴施農(nóng)藥防治蟲害，以保證植物材料在與病毒嚴(yán)密隔離的條件下栽培。 六、無病毒植物的保存和利用 ? （ 3）有條件的地方可以到海島或高冷山地種植保存，那里氣候涼爽，蟲害少，有利于無病毒材料的生長，繁殖。另一種更便宜的方法，是把由莖尖得到的并已經(jīng)過脫毒檢驗(yàn)的植物通過離體培養(yǎng)進(jìn)行繁殖和保存。 六、無病毒植物的保存和利用 ? 無病毒苗的利用 ? 無病毒苗在生產(chǎn)中的利用也要防止病毒的再感染。 生產(chǎn)場所應(yīng)隔離病毒感染途徑， 做好土壤消毒或防蚜等工作。在此種植區(qū)及種植規(guī)模小的地方，要較長時間才會感染。而在種植時間長、輪作及種植規(guī)模大的產(chǎn)地則在短期內(nèi)就可感染。一旦感染，影響產(chǎn)量質(zhì)量的，就應(yīng)重新采用無病毒苗，以保證生產(chǎn)的質(zhì)量。 本章小結(jié) ? 1．去除植物病毒的方法有熱處理法、微莖尖培養(yǎng)法、愈傷組織培養(yǎng)法和莖尖微體嫁接法。前兩種是主要方法。 ? 2．熱處理法去除植物病毒可分為溫湯浸漬處理法和熱處理法。其中后者因不損傷植物材料，因而是目前最為常用的方法。 本章小結(jié) ? 3. 單一的脫毒處理技術(shù)或難以完全脫除病毒，或需要較長的時間， 2種或 3種脫毒技術(shù)的組合使用逐漸成為生產(chǎn)無毒種苗的首選。 如：將熱處理技術(shù)與莖尖培養(yǎng)技術(shù)或與病毒抑制劑技術(shù)相結(jié)合，可有效地提高脫毒率。 本章小結(jié) ? 4．病毒主要分布于植物體成熟和衰老的組織及器官中，靠維管束傳播。由于莖尖尚未形成維管束，所以莖尖一般是無毒的，可用于組織培養(yǎng)無毒苗木。 本章小結(jié) ? 5．無毒苗的鑒定方法主要有： ? （ 1）指示植物鑒定法； ? （ 2）抗血清鑒定法； ? （ 3）電子顯微鏡檢查法； ? （ 4）酶聯(lián)免疫鑒定法，是目前比較精確和常用的鑒定方法。
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