第七章工業(yè)發(fā)酵染菌的防治-閱讀頁
2024-10-18 15:04本頁面
【正文】 ? 肉湯培養(yǎng)法 1）防止種子帶菌 4 染菌的預(yù)防 種子帶菌的原因 ① 滅菌不徹底 (如假壓 )； ② 移種污染； ③ 養(yǎng)或保藏過程中污染； ④ 無菌室管理不善； 制備壯、純、量足的種子是發(fā)酵成功的關(guān)鍵，為此： ? 強化無菌室的管理 (使用前滅菌 )； ? 嚴(yán)格接種、移種的無菌操作； ? 在擴培各階段定時取樣做無菌實驗； ? 嚴(yán)格接種管滅菌，并用無菌空氣保壓； 無菌狀況的檢測 環(huán)境無菌的檢查 ?塵埃粒子檢測 ?無菌平板檢測 無菌室要求 ? 打開紫外燈，照半小時，關(guān)燈后 15分鐘再接種。 ? 接種人員必須穿好無菌服，戴好口罩，手用酒精棉球擦干凈?？諝獬到y(tǒng)復(fù)雜，環(huán)節(jié)多，偶遇不慎便會導(dǎo)致空氣除菌失敗。 棉花 活性炭過濾器長期使用后變薄的一邊失效。超細(xì)纖維紙作過濾介質(zhì)，滅菌時必須將管道中冷凝水放干凈，以免介質(zhì)受潮失效。 3）防止培養(yǎng)基滅菌不徹底 培養(yǎng)基滅菌方法 —— 高壓蒸汽滅菌 分批滅菌 121℃ ， 30分鐘 連續(xù)滅菌 罐溫 125－ 130℃ ， 30－ 45分鐘 空氣凈化系統(tǒng) 連續(xù)滅菌設(shè)備流程 連 消 塔 滅菌技術(shù)好壞與滅菌質(zhì)量相關(guān) ?蒸汽通入培養(yǎng)基，升溫快慢、保溫時間 —— 產(chǎn)生過多泡沫 ?蒸汽總壓是否達(dá)到要求標(biāo)準(zhǔn) ?雜菌數(shù)量：季節(jié)、原材料儲存和保管 ?設(shè)備的清洗質(zhì)量、有無滅菌的死角 為什么蒸汽滅菌時會產(chǎn)生大量泡沫呢？ 培養(yǎng)基和水的傳熱系數(shù)比空氣的傳熱系數(shù)大，如果滅菌時升溫太快，培養(yǎng)基急劇膨脹，發(fā)酵罐內(nèi)的空氣排出較慢，就會產(chǎn)生大量泡沫，泡沫上升到發(fā)酵罐頂，泡沫中的耐熱菌就不能與蒸汽直接接觸，未被殺死。 ?防止設(shè)備滲漏 肉眼可見 —— 冷卻盤管、夾套穿孔、閥門滲漏 …… 肉眼不可見 —— 試漏 水壓試漏法 集氣桶來試漏 5）加強操作和衛(wèi)生管理 ? 嚴(yán)格操作規(guī)程、保持環(huán)境干凈。隨著風(fēng)沙塵土和空氣流動傳播，以及人們的走動、車輛的往來也攜帶著噬菌體到處傳播，使噬菌體潛入生產(chǎn)各個環(huán)節(jié)，尤其是通過空氣系統(tǒng)進(jìn)入種子室、種子罐、發(fā)酵罐。同樣的培養(yǎng)基中加入 20％～ 30％培養(yǎng)好的種子液，再加入懷疑染噬菌體的發(fā)酵液，搖均勻后，鋪上層。 ? 也可以在上層培養(yǎng)基中不加懷疑染噬菌體的發(fā)酵液，而將發(fā)酵液直接點種在上層培養(yǎng)基表面，培養(yǎng)過夜，觀察有無透明圈出現(xiàn)。 染菌后的處理：全部廢棄培養(yǎng)液 （ 2）發(fā)酵前期染菌 發(fā)酵前期最易染菌，且危害最大。 染菌措施 補救 培養(yǎng)基養(yǎng)料消耗不多，可以重新滅菌，補加一些營養(yǎng)，重新接種再用。 措施： 染菌不多，對生產(chǎn)影響不大 染菌嚴(yán)重，破壞性較大，可提前放罐 （ 5） T4感染后的挽救 ? 并罐法 ? 更換菌種：輪換菌株、抗性菌株 ? 放罐重消，補料，接種 ? 罐內(nèi)滅菌 染菌的善后 ? 培養(yǎng)基必須滅菌后才可放下水道。 ? 找到染菌的原因，對癥下藥，徹底清洗消毒。特別，若染噬菌體，空氣必須用甲醛蒸汽消毒。 環(huán)境用漂白粉消毒 選育抗噬菌體的菌種 思考題 ? 染菌對發(fā)酵有什么危害，對提煉有什么危害？ ? 有哪些原因會引起染菌？ ? 染菌以后應(yīng)采取什么措施？ ? 為什么會感染噬菌體？感染了噬菌體后應(yīng)采取哪些措施？ ?放線菌發(fā)酵： 5只大罐，其中兩只連續(xù)染菌、并且是同樣的雜菌（細(xì)菌），另外三只
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