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第七章工業(yè)發(fā)酵染菌的防治-預(yù)覽頁(yè)

 

【正文】 ? 拉長(zhǎng)過(guò)濾時(shí)間, 影響設(shè)備周轉(zhuǎn) 降低過(guò)濾收率 影響程度:雜菌種類,污染程度 措施:加熱、冷卻、添加助濾劑等 2) 發(fā)酵染菌對(duì)提煉的影響 ? 沉淀法:雜質(zhì)污染產(chǎn)物 ? 有機(jī)溶劑萃?。喝榛?,難分離。 有的雜菌會(huì)使發(fā)酵液發(fā)臭、發(fā)酸,致使pH下降,使不耐酸的產(chǎn)品破壞。 ? 灰黃霉素、制霉菌素、克念菌素:抑制霉菌,對(duì)細(xì)菌幾乎沒(méi)有抑制和殺滅作用。 ? 檸檬酸:前期染菌嚴(yán)重; ? 氨基酸:噬菌體污染常發(fā)生; ? 核苷酸:易染菌(生產(chǎn)菌常為缺陷型,生長(zhǎng)慢); ? 鏈霉素、四環(huán)素、紅霉素、卡那霉素:程度不同地降低產(chǎn)量。 污染其它雜菌 有些雜菌會(huì)使生產(chǎn)菌自溶產(chǎn)生大量泡沫,即使添加消泡劑也無(wú)法控制逃液,影響發(fā)酵過(guò)程的通氣攪拌。 ? (1)青霉素和鏈霉素:細(xì)短桿菌的危害 大于 粗大桿菌; ? (2)四環(huán)素:對(duì)雙球菌、芽孢桿菌和莢膜桿菌污染敏感; ? (3)檸檬酸:對(duì)青霉菌敏感; ? (4)核苷酸:對(duì)芽孢桿菌敏感 ? (5)氨基酸:對(duì)噬菌體敏感; 三、不同染菌時(shí)間對(duì)發(fā)酵的影響 污染時(shí)間:無(wú)菌檢測(cè)方法測(cè)出的污染時(shí)間,不是雜菌竄入培養(yǎng)液的時(shí)間。包括染菌后培養(yǎng)基經(jīng)重新滅菌,又再次染菌的批次數(shù)在內(nèi)。如種子帶菌、培養(yǎng)基滅菌不徹底、罐有滲漏、分過(guò)濾器失效 多罐染菌 系統(tǒng)問(wèn)題,如空氣過(guò)濾系統(tǒng)有問(wèn)題,特別是總過(guò)濾器長(zhǎng)期沒(méi)有檢查,可能受潮失效;移種或補(bǔ)料的分配站有滲漏或滅菌不徹底 前期染菌 種子帶菌、培養(yǎng)基滅菌不徹底 中后期染菌 補(bǔ)料的料液滅菌不徹底或補(bǔ)料管道、閥門(mén)滲漏,一般不會(huì)是種子問(wèn)題 檢查與判斷 ? 表觀法: ? 溶氧水平 ? 排氣中 CO2 ? 實(shí)驗(yàn)法: ? 鏡檢法 ? 平皿劃線或斜面檢查法 ? 肉湯培養(yǎng)法 1)防止種子帶菌 4 染菌的預(yù)防 種子帶菌的原因 ① 滅菌不徹底 (如假壓 ); ② 移種污染; ③ 養(yǎng)或保藏過(guò)程中污染; ④ 無(wú)菌室管理不善; 制備壯、純、量足的種子是發(fā)酵成功的關(guān)鍵,為此: ? 強(qiáng)化無(wú)菌室的管理 (使用前滅菌 ); ? 嚴(yán)格接種、移種的無(wú)菌操作; ? 在擴(kuò)培各階段定時(shí)取樣做無(wú)菌實(shí)驗(yàn); ? 嚴(yán)格接種管滅菌,并用無(wú)菌空氣保壓; 無(wú)菌狀況的檢測(cè) 環(huán)境無(wú)菌的檢查 ?塵埃粒子檢測(cè) ?無(wú)菌平板檢測(cè) 無(wú)菌室要求 ? 打開(kāi)紫外燈,照半小時(shí),關(guān)燈后 15分鐘再接種。空氣除菌系統(tǒng)復(fù)雜,環(huán)節(jié)多,偶遇不慎便會(huì)導(dǎo)致空氣除菌失敗。超細(xì)纖維紙作過(guò)濾介質(zhì),滅菌時(shí)必須將管道中冷凝水放干凈,以免介質(zhì)受潮失效。 ?防止設(shè)備滲漏 肉眼可見(jiàn) —— 冷卻盤(pán)管、夾套穿孔、閥門(mén)滲漏 …… 肉眼不可見(jiàn) —— 試漏 水壓試漏法 集氣桶來(lái)試漏 5)加強(qiáng)操作和衛(wèi)生管理 ? 嚴(yán)格操作規(guī)程、保持環(huán)境干凈。同樣的培養(yǎng)基中加入 20%~ 30%培養(yǎng)好的種子液,再加入懷疑染噬菌體的發(fā)酵液,搖均勻后,鋪上層。 染菌后的處理:全部廢棄培養(yǎng)液 ( 2)發(fā)酵前期染菌 發(fā)酵前期最易染菌,且危害最大。 措施: 染菌不多,對(duì)生產(chǎn)影響不大 染菌嚴(yán)重,破壞性較大,可提前放罐 ( 5) T4感染后的挽救 ? 并罐法 ? 更換菌種:輪換菌株、抗性菌株 ? 放罐重消,補(bǔ)料,接種 ? 罐內(nèi)滅菌 染菌的善后 ? 培養(yǎng)基必須滅菌后才可放下水道。特別,若染噬菌體,空氣必須用甲醛蒸汽
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