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多重不對稱擴增介紹-閱讀頁

2025-06-04 01:38本頁面
  

【正文】 消耗殆盡,不再引導(dǎo)擴增,而非限制性引物 (高濃度引物 )引導(dǎo)的 PCR會繼續(xù)進行,從而就會產(chǎn)生大量的單鏈 DNA。比如直接進行測序,或者下游雜交檢測無需經(jīng)過變性這一步驟。 ? 不對稱擴增對于低拷貝樣本的擴增較難,對于病原體檢測需要更詳盡的 PCR設(shè)計和優(yōu)化。 ,擴增效果更佳。限制性引物量可以考慮設(shè)臵在 。 增加單鏈的方法 納米金微粒介導(dǎo)不對稱擴增 納米金顆??梢栽鰪?PCR擴增效率和特異性,有可能是由于金納米顆粒與單鏈引物之間特異性結(jié)合,類似單鏈結(jié)合蛋白 SSB功能,一直 PCR非特異性擴增,更重要的可能是,金納米顆粒的熱效率和熱傳導(dǎo),在液相中,納米顆??梢钥焖賯鬟f熱量并且與周圍環(huán)境在 10~200ps內(nèi)形成熱平衡,增強擴增效率。 LATEPCR(LinearAfterTheExponential PCR) 多重不對稱 PCR重要影響因素 ? 引物二聚體 ? 引物特異性 主要是導(dǎo)致不對稱 PCR限制性引物和非限制性引物比例的改變,或者限制性引物絕對量的改變,從而導(dǎo)致擴增差異化或者擴增失敗。 ? Mpprimer(開放、在線) —— 最多一次可以設(shè)計 6對引物、基于 PP
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