多重不對稱擴增介紹-wenkub.com
2025-05-11 01:38 本頁面
【正文】 ? Mpprimer（開放、在線） —— 最多一次可以設(shè)計 6對引物、基于 PP3內(nèi)核。 增加單鏈的方法 納米金微粒介導(dǎo)不對稱擴增 納米金顆?？梢栽鰪?PCR擴增效率和特異性，有可能是由于金納米顆粒與單鏈引物之間特異性結(jié)合，類似單鏈結(jié)合蛋白 SSB功能，一直 PCR非特異性擴增，更重要的可能是，金納米顆粒的熱效率和熱傳導(dǎo)，在液相中，納米顆粒可以快速傳遞熱量并且與周圍環(huán)境在 10~200ps內(nèi)形成熱平衡，增強擴增效率。 ，擴增效果更佳。比如直接進行測序，或者下游雜交檢測無需經(jīng)過變性這一步驟。 不對稱 PCR ? 用不等量的一對引物進行模板的擴增， PCR擴增后產(chǎn)生大量的單鏈 DNA。 ? 針對不同對引物之間二聚體，目前可以采用 Visual OMP6軟件（ 7天試用版）進行驗證。 ? 嚴格 blast驗證 最佳退火溫度不一致 ? 將多對引物放臵入一個體系中擴增，由于進行PCR反應(yīng)的退火溫度相同，所以要求每一對引物的最佳退火溫度接近。 多重 PCR技術(shù)難點 ? 反應(yīng) 原理，反應(yīng)試劑和操作過程與一般 PCR相同 . ? 難點主要體現(xiàn)在前期引物設(shè)計過程中 —
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