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sds-聚丙烯酰胺凝膠電泳法測(cè)定蛋白質(zhì)分子量-閱讀頁

2025-05-30 13:15本頁面
  

【正文】 .0 3 ml 1 0 % A p 0 .0 3 ml TEM ED 4 181。 插入樣品梳 加入電極緩沖液 pH 濃縮膠 pH 通電 分離膠 pH 加入樣品 ?上樣及電泳 開始電流恒定在 10mA,當(dāng)進(jìn)入分離膠后改為 20mA,溴酚藍(lán)距凝膠邊緣約 5mm時(shí),停止電泳。 ?脫色:染色后的凝膠板用蒸餾水漂洗數(shù)次,再用脫色液脫色,直到蛋白質(zhì)區(qū)帶清晰。 = 蛋 白 樣 品 距 加 樣 端 遷 移 距 離 ( c m )溴 酚 藍(lán) 區(qū) 帶 中 心 距 加 樣 端 距 離 ( c m ) 相 對(duì) 遷 移 率 以每個(gè)蛋白標(biāo)準(zhǔn)的分子量對(duì)數(shù)對(duì)它的相對(duì)遷移率作圖得標(biāo)準(zhǔn)曲線,量出未知蛋白的遷移率即可測(cè)出其分于量。最好戴一次性塑料手套操作。此外, 10%過硫酸銨必須現(xiàn)用現(xiàn)配, 4℃ 冰箱貯存不超過 48小時(shí)。 ? ,應(yīng)在分離膠液面上加 1— 2cm高的水層,以阻隔空氣。 ? ,電泳過程中產(chǎn)熱多,特別是夏天產(chǎn)熱更多。
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