20xx年醫(yī)學(xué)專題—大腸桿菌的保存與培養(yǎng)-在線瀏覽
2024-11-17 22:21本頁(yè)面
【正文】 保藏工作就是使菌種的變異降低至最小水平，使菌種在較長(zhǎng)期的保藏之后仍然保持著原有的生命力、優(yōu)良生產(chǎn)性能、形態(tài)特征以及不污染雜菌。并且在多次的無(wú)性繁殖過程中可能會(huì)有突變的積累。由于菌種的代謝相對(duì)靜止，生命活動(dòng)將處休眠狀態(tài)，從而可以保藏較長(zhǎng)時(shí)間。此外，在保存前應(yīng)確保菌種的單純性，先分離單菌落后進(jìn)行鑒定，然后再繁殖保存。4. 常用的長(zhǎng)期保存法有：液體石蠟法、硅膠保存法、加入甘油或二甲基亞砜（DMSD）等保護(hù)劑。5. 甘油低溫保存法(－70℃—－196℃)的特點(diǎn)i.甘油菌低溫保存的基本原理是：在70℃或液氮中凍存，細(xì)菌內(nèi)的酶活性均己停止，即代謝處于完全停止?fàn)顟B(tài)，故可以長(zhǎng)期保存。用電鏡觀察，可見細(xì)菌的核膜上有大量針尖樣小孔。甘油可降低冰點(diǎn)，在緩慢的凍結(jié)條件下，能使細(xì)菌內(nèi)水分在凍結(jié)前透出細(xì)菌外。在保存瓶中按1：1加入60%的甘油和菌液，混勻后貯存于70℃或液氮中。甘油菌從冰箱取出使用時(shí)應(yīng)置于低溫或 0℃冰浴中，用完盡快放回，接種時(shí)挑取表面已融化部分即可，不可全溶，因反復(fù)凍融會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞壁破裂。切記：接種過程中不得使
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