20xx年醫(yī)學(xué)專題—大腸桿菌的保存與培養(yǎng)-預(yù)覽頁(yè)
【正文】 . 常用的長(zhǎng)期保存法有：液體石蠟法、硅膠保存法、加入甘油或二甲基亞砜（DMSD）等保護(hù)劑。用電鏡觀察，可見(jiàn)細(xì)菌的核膜上有大量針尖樣小孔。在保存瓶中按1：1加入60%的甘油和菌液，混勻后貯存于70℃或液氮中。甘油菌從冰箱取出使用時(shí)應(yīng)置于低溫或 0℃冰浴中，用完盡快放回，接種時(shí)挑取表面已融化部分即可，不可全溶，因反復(fù)凍融會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞壁破裂。三、大腸桿菌培養(yǎng)攪拌使之完全溶解，用5molNaOH(），如用進(jìn)口試劑可不必調(diào)， 高壓滅菌20min(120℃ )1）小量培養(yǎng):(1) 取滅菌 16 或 18mm 口徑培養(yǎng)管，加 35mlLB 培養(yǎng)基，再加 50mg/ml 氨芐青霉素 35ul（宿主菌不加抗生素）(2) 無(wú)菌牙簽挑取單菌落，送入培養(yǎng)液中，或取菌液 510ul，轉(zhuǎn)入培養(yǎng)液中，封好管口(3) 37℃搖床培養(yǎng) 100200r/min 至生長(zhǎng)飽和，約 612 小時(shí)2）大量培養(yǎng):取 500ml 培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)裝培養(yǎng)基 100200ml，及相應(yīng)抗生素。: 用于單一菌落的挑選，轉(zhuǎn)化后抗性菌落的
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