20xx年醫(yī)學專題—大腸桿菌的保存與培養(yǎng)(更新版)
【正文】 而導致發(fā)育緩慢，存活率和產(chǎn)質(zhì)量降低等現(xiàn)象，菌種保藏工作就是使菌種的變異降低至最小水平，使菌種在較長期的保藏之后仍然保持著原有的生命力、優(yōu)良生產(chǎn)性能、形態(tài)特征以及不污染雜菌。由于菌種的代謝相對靜止，生命活動將處休眠狀態(tài)，從而可以保藏較長時間。用電鏡觀察，可見細菌的核膜上有大量針尖樣小孔。甘油菌從冰箱取出使用時應置于低溫或 0℃冰浴中，用完盡快放回，接種時挑取表面已融化部分即可，不可全溶，因反復凍融會導致細胞壁破裂。攪拌使之完全溶解，用5molNaOH(），如用進口試劑可不必調(diào)， 高壓滅菌20min(120℃ )1）小量培養(yǎng):(1) 取滅菌 16 或 18mm 口徑培養(yǎng)管，加 35mlLB 培養(yǎng)基，再加 50mg/ml 氨芐青霉素 35ul（宿主菌不加抗生素）(2) 無菌牙簽挑取單菌落，送入培養(yǎng)液中，或取菌液 510ul，轉(zhuǎn)入培養(yǎng)液中，封好管口(3) 37℃搖床培養(yǎng) 100200r/min 至生長飽和，約 612 小時2）大量培養(yǎng):取 500ml 培養(yǎng)瓶內(nèi)裝培養(yǎng)基 100200ml，及相應抗
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