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正文內(nèi)容

20xx年醫(yī)學(xué)專(zhuān)題—大腸桿菌的保存與培養(yǎng)(更新版)

  

【正文】 而導(dǎo)致發(fā)育緩慢,存活率和產(chǎn)質(zhì)量降低等現(xiàn)象,菌種保藏工作就是使菌種的變異降低至最小水平,使菌種在較長(zhǎng)期的保藏之后仍然保持著原有的生命力、優(yōu)良生產(chǎn)性能、形態(tài)特征以及不污染雜菌。由于菌種的代謝相對(duì)靜止,生命活動(dòng)將處休眠狀態(tài),從而可以保藏較長(zhǎng)時(shí)間。用電鏡觀察,可見(jiàn)細(xì)菌的核膜上有大量針尖樣小孔。甘油菌從冰箱取出使用時(shí)應(yīng)置于低溫或 0℃冰浴中,用完盡快放回,接種時(shí)挑取表面已融化部分即可,不可全溶,因反復(fù)凍融會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞壁破裂。攪拌使之完全溶解,用5molNaOH(),如用進(jìn)口試劑可不必調(diào), 高壓滅菌20min(120℃ )1)小量培養(yǎng):(1) 取滅菌 16 或 18mm 口徑培養(yǎng)管,加 35mlLB 培養(yǎng)基,再加 50mg/ml 氨芐青霉素 35ul(宿主菌不加抗生素)(2) 無(wú)菌牙簽挑取單菌落,送入培養(yǎng)液中,或取菌液 510ul,轉(zhuǎn)入培養(yǎng)液中,封好管口(3) 37℃搖床培養(yǎng) 100200r/min 至生長(zhǎng)飽和,約 612 小時(shí)2)大量培養(yǎng):取 500ml 培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)裝培養(yǎng)基 100200ml,及相應(yīng)抗
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