【正文】 噬和殺滅。細(xì)菌毒素根據(jù)來源、性質(zhì)和作用特點(diǎn)不同分為外毒素和內(nèi)毒素。（2）內(nèi)毒素的特性：①主要是革蘭陰性菌產(chǎn)生；②化學(xué)性質(zhì)是脂多糖；③抵抗力強(qiáng)，耐熱、耐酸、耐堿、耐強(qiáng)氧化劑；④細(xì)菌死亡溶解后釋放；⑤毒性及免疫原性均較外毒素弱，不能用甲醛處理成類毒素。細(xì)菌全身感染在臨床上常見以下幾種情況：（1）毒血癥：致病菌不進(jìn)入血液循環(huán)，但其產(chǎn)生的外毒素入血。（3）敗血癥：致病菌侵入血流，在其中大量繁殖并產(chǎn)生毒性物質(zhì)。（5）內(nèi)毒素血癥：革蘭陰性細(xì)菌侵入血流，并在其大量繁殖，崩解后釋放大量內(nèi)毒素。（一）革蘭染色革蘭染色為兩種染料先后進(jìn)行染色，為復(fù)染色法。染色步驟：初染1min（結(jié)晶紫）→流水沖洗→媒染1min（盧戈碘液）→流水沖洗→脫色2030s（95%乙醇）→流水沖洗→（稀釋苯酚復(fù)紅液或沙黃）→流水沖洗→干燥→鏡檢意義：鑒別細(xì)菌、指導(dǎo)用藥、指導(dǎo)臨床治療。（二）抗酸染色抗酸染色也是兩種染料先后染色，也是復(fù)染色法。③痰標(biāo)本需要經(jīng)過酸或堿處理后，使痰液化后接種。結(jié)果判定：染成紅色為抗酸菌，染成藍(lán)色為非抗酸菌。暗視野聚光法使用暗視野顯微鏡可觀察螺旋體及其動力。%～。細(xì)菌L型的培養(yǎng)基必須采用高滲（3%～5%NaCl、10%～20%蔗糖等）低瓊脂培養(yǎng)基。平板劃線接種法一般用于含有多種細(xì)菌的標(biāo)本，利用此接種法可以得到單個菌落，分為分區(qū)劃線法和連續(xù)劃線法。連續(xù)劃線法多用于含菌量少的標(biāo)本。穿刺接種法可用于觀察細(xì)菌動力，有鞭毛的細(xì)菌可沿穿刺線擴(kuò)散生長。1細(xì)菌在液體培養(yǎng)基上的生長現(xiàn)象有三種，分別是：①混濁（大多數(shù)細(xì)菌）；②沉淀（鏈狀生長的細(xì)菌，如鏈球菌、炭疽芽孢桿菌等）；③菌膜（專性需氧菌，如銅綠假單胞菌等）。β溶血：又稱完全溶血，菌落周圍形成一個完全清晰透明的環(huán)。雙環(huán)：上層溶血環(huán)，內(nèi)層為θ溶血，外層為α溶血。1傾注平板法用于水、牛乳、飲料及尿液等液體標(biāo)本的細(xì)菌計(jì)數(shù)。1最常用的營養(yǎng)培養(yǎng)基：血平板和巧克力平板。1選擇培養(yǎng)基：在培養(yǎng)基中加入某種化學(xué)成分或抗生素以抑制某些細(xì)菌的生長，而有助于需要的細(xì)菌生長，此培養(yǎng)基稱為選擇培養(yǎng)基。1增菌培養(yǎng)基：如乙型溶血性鏈球菌、肺炎鏈球菌的生長需含血液或血清的培養(yǎng)基；霍亂弧菌的增菌常用堿性蛋白胨水。巰基乙醇酸鈉是特殊培養(yǎng)基。細(xì)菌血液培養(yǎng)使用的抗凝劑為聚苯乙烯磺酸鈉（SPS）。甲基紅試驗(yàn)的原理是細(xì)菌發(fā)酵葡萄糖產(chǎn)酸，加入甲基指示劑變紅為試驗(yàn)陽性。VP試驗(yàn)常與甲基紅試驗(yàn)一起使用，因?yàn)榍罢哧栃缘募?xì)菌，后者通常為陰性。（二）蛋白質(zhì)和氨基酸代謝試驗(yàn)蛋白質(zhì)和氨基酸代謝試驗(yàn)包括：靛基質(zhì)（吲哚）試驗(yàn)、硫化氫試驗(yàn)、尿素酶試驗(yàn)、苯丙氨酸脫氨酶試驗(yàn)、氨基酸脫羧酶試驗(yàn)。硫化氫試驗(yàn)是細(xì)菌能分解含硫氨基酸，產(chǎn)生的H2S與Fe2+反應(yīng)呈黑色為陽性。如沙門菌屬、愛德華菌屬、亞利桑那菌屬、枸櫞酸桿菌屬、變形桿菌屬細(xì)菌，絕大多數(shù)硫化氫陽性，其他菌屬陰性。尿素酶試驗(yàn)是細(xì)菌分解尿素生成氨，使培養(yǎng)基呈堿性，指示劑變紅為陽性。（三）碳源利用試驗(yàn)碳源利用試驗(yàn)包括枸櫞酸鹽利用試驗(yàn)和丙二酸鹽利用試驗(yàn)。丙二酸鹽利用試驗(yàn)的陽性結(jié)果為深藍(lán)色。（四）酶類試驗(yàn)觸酶試驗(yàn)：細(xì)菌能催化過氧化氫生成水和氧氣，出現(xiàn)氣泡為陽性。凝固酶試驗(yàn)：主要用于金黃色葡萄球菌的鑒定。葡萄球菌、沙雷菌、變形桿菌均為陽性。若加入試劑后無顏色反應(yīng)，可能是：①硝酸鹽沒有被還原，試驗(yàn)陰性；②硝酸鹽被還原為氨和氮等其他產(chǎn)物而導(dǎo)致假陰性結(jié)果，這時應(yīng)在試管內(nèi)加入少許鋅粉（還原劑），如出現(xiàn)紅色則表明試驗(yàn)確實(shí)為陰性。（五）其他及藥敏鑒定試驗(yàn)CAMP試驗(yàn)：B群鏈球菌能產(chǎn)生CAMP因子，可促進(jìn)葡萄球菌的β溶血素溶解紅細(xì)胞的活性，因此在兩菌（B群鏈球菌和葡萄球菌）的交界處溶血力增加，出現(xiàn)箭頭狀或矢形（半月形）的溶血區(qū)。膽汁溶菌試驗(yàn)：膽汁或膽鹽可溶解肺炎鏈球菌，可能是由于膽汁降低細(xì)胞膜表面的張力，使細(xì)胞膜破損或使菌體裂解；或者是由于膽汁加速了肺炎鏈球菌本身自溶過程，促使細(xì)菌發(fā)生自溶。桿菌肽試驗(yàn)：A群鏈球菌對桿菌肽幾乎全部敏感，而其他群鏈球菌絕大多數(shù)對其耐藥。五、細(xì)菌毒力鑒定▲內(nèi)毒素常采用鱟試驗(yàn)——內(nèi)毒素激活鱟試劑中凝固酶原轉(zhuǎn)變?yōu)槟堂?，凝固蛋白原生成凝固蛋白。第五章?xì)菌對抗菌藥物的敏感試驗(yàn)一、臨床常用抗菌藥物（一）β內(nèi)酰胺類常見藥物主要是青霉素類、頭孢菌素類和單環(huán)β內(nèi)酰胺類（氨曲南和卡蘆莫南）。（二）氨基糖苷類作用機(jī)制：①依靠離子的附作用，吸附在菌體表面，造成膜的損傷；②和細(xì)菌核糖體30S小亞基發(fā)生不可逆結(jié)合，抑制mRNA的轉(zhuǎn)錄和蛋白質(zhì)的合成，造成遺傳密碼的錯讀，產(chǎn)生無意義的蛋白質(zhì)。（三）喹諾酮類作用機(jī)制：①通過外膜孔蛋白和磷脂滲透進(jìn)入細(xì)菌細(xì)胞；②作用于DNA旋轉(zhuǎn)酶，干擾細(xì)菌DNA復(fù)制、修復(fù)和重組。②第二代：對G和G+細(xì)菌均有作用；比較這類藥的抗菌活性強(qiáng)度依次為環(huán)丙沙星、氧氟沙星、羅美沙星、氟羅沙星、培氟沙星、諾氟沙星；③第三代：對G+菌作用高于第二代的4～8倍，對厭氧菌亦有作用；司帕沙星、妥舒沙星、左氧氟沙星、加替沙星、格帕沙星、莫西沙星等。新一代大環(huán)內(nèi)酯類有克拉霉素、羅紅霉素、地紅霉素、氟紅霉素、阿奇霉素和乙酰麥迪霉素?！沫h(huán)素類：阻止酰胺基轉(zhuǎn)移酶RNA與mRNA核糖體的受體位點(diǎn)結(jié)合。▲氯霉素類、林克霉素類：能與細(xì)菌核蛋白體50S亞基結(jié)合，使蛋白質(zhì)合成呈可逆性抑制。包括萬古霉素、去甲萬古霉素、替考拉寧、多粘菌素、桿菌肽等。二、抗菌藥物敏感試驗(yàn)方法▲細(xì)菌多抗菌藥物的敏感分為三種現(xiàn)象：敏感（S）、耐藥（R）、中介（I）。采用的接種方法是平板涂布法。含藥紙片貼于含菌瓊脂表面時應(yīng)注意：①各紙片中心距離不小于24mm，紙片距平板內(nèi)緣應(yīng)大于15mm；②一旦碰觸培養(yǎng)基就不可再動；③平板最好單獨(dú)平放，不超過兩個疊放?！艚瘘S色葡萄球菌ATCC25923，大腸埃希菌ATCC25922，銅綠假單胞菌ATCC27853，糞腸球菌ATCC29212或ATCC33186。堿性可擴(kuò)大氨基糖苷類藥物的抑菌圈，酸性可擴(kuò)大四環(huán)素類藥物的抑菌圈。體外聯(lián)合藥物敏感試驗(yàn)的FIC（部分抑菌濃度指數(shù)）：FIC指數(shù)＜協(xié)同作用；～1相加作用；FIC指數(shù)1～2無關(guān)作用；FIC指數(shù)＞2拮抗作用。產(chǎn)ESBL菌株臨床上用β內(nèi)酰胺類抗生素（青霉素類、頭孢菌素類及氨曲南）治療無效。產(chǎn)AmpC酶菌株對β內(nèi)酰胺類抗生素（青霉素類、頭孢菌素類及氨曲南）及含酶抑制劑復(fù)合制劑耐藥。藥敏試驗(yàn)時，10^8/ml含菌量。包括金黃色、表皮、腐生、溶血葡萄球菌。葡萄球菌的致病性用凝固酶試驗(yàn)，致病性葡萄糖球菌為陽性，還可以分解甘露醇產(chǎn)酸，耐熱DNA酶陽性。葡萄球菌的細(xì)胞壁上有葡萄球菌A蛋白（SPA），可以與人類IgG的Fc段結(jié)合，可進(jìn)行協(xié)同凝集試驗(yàn)。耐甲氧西林的金葡菌（MRSA），耐甲氧西林的表葡菌（MRSE），耐萬古霉素的金黃色葡萄球菌（VRSA），耐萬古霉素的表皮葡萄球菌（VRSE），MRSA的首選抗生素為萬古霉素。腐生葡萄球菌是導(dǎo)致尿路感染的常見病原菌之一。●鏈球菌屬鏈球菌屬是一大群觸酶試驗(yàn)陰性、在液體培養(yǎng)基上呈鏈狀排列的革蘭陽性（G＋）球菌，但在陳舊培養(yǎng)基或被吞噬細(xì)胞吞