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臨床醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)考試輔導(dǎo)-文庫(kù)吧資料

2024-11-16 02:33本頁(yè)面
  

【正文】 蘭陽(yáng)性(G+)球菌,無(wú)鞭毛和芽胞,某些菌株能形成莢膜。治療有效的藥物主要有碳青霉烯類(lèi)(亞胺培南)和第四代頭(頭孢吡肟、頭孢匹羅)以及某些喹酮類(lèi)和氨基糖苷類(lèi)抗生素。耐甲氧西林金葡菌(MRSA)用β內(nèi)酰胺類(lèi)抗生素治療無(wú)效??菇Y(jié)核分枝桿菌的首選一線藥物是異煙肼、利福平?!锲渌哳l考點(diǎn)MBC為最低殺菌濃度?!?,過(guò)高或過(guò)低的pH值會(huì)影響藥物效能。采用標(biāo)準(zhǔn)菌株是進(jìn)行質(zhì)控的主要措施。抑菌圈的大小可以反映待檢菌對(duì)測(cè)定藥物的敏感程度,與該藥對(duì)待檢菌的最低抑菌濃度(MIC)呈負(fù)相關(guān),即抑菌圈愈大,MIC愈小。(一)擴(kuò)散法(KB法)目前常用的方法,是一種半定量的方法?!舸蟓h(huán)內(nèi)酯類(lèi)的抗生素是抑菌劑?!请念?lèi):屬于殺菌劑,能與一個(gè)或多個(gè)肽聚糖合成中間產(chǎn)物形成復(fù)合物,阻斷肽聚糖合成,阻止細(xì)胞壁合成。分為短效(土霉素、四環(huán)素)、中效(地美環(huán)素、美他環(huán)素)和長(zhǎng)效(多西環(huán)素、米諾環(huán)素)。(五)其他抗菌藥物▲磺胺類(lèi):競(jìng)爭(zhēng)性第與二氫葉酸合成酶結(jié)合,阻止核酸形成。(四)大環(huán)內(nèi)酯類(lèi)作用機(jī)制:可逆結(jié)合細(xì)菌核糖體50S大亞基的23S單位,抑制細(xì)菌蛋白質(zhì)合成和肽鏈延伸;種類(lèi):國(guó)內(nèi)常用有紅霉素、吉他霉素、麥迪霉素、乙酰螺旋霉素。種類(lèi):①第一代:為窄譜抗菌藥物,對(duì)G+球菌無(wú)作用;主要作用于大腸埃希菌,且迅速出現(xiàn)耐藥,較少應(yīng)用于臨床。種類(lèi):①鏈霉菌屬:如鏈霉素、卡那霉素、妥布霉素、核糖霉素、巴龍霉素、新霉素;②小單胞菌屬:如慶大霉素、福提霉素;③半合成氨基苷類(lèi):阿米卡星、奈替米星、地貝卡星等,氨基苷類(lèi)抗菌藥物對(duì)需氧G桿菌有較強(qiáng)的抗菌活性,對(duì)G+球菌有一定的活性。作用機(jī)制:β內(nèi)酰胺類(lèi)抗生素的作用機(jī)制相似,均是與青霉素結(jié)合蛋白(PBP)結(jié)合,抑制細(xì)菌細(xì)胞壁合成,致使細(xì)菌死亡?!舛舅爻S皿w內(nèi)及體外毒力試驗(yàn)檢測(cè),也用ELISA法測(cè)定。奧普托欣(Optochin)試驗(yàn):幾乎所有肺炎鏈球菌對(duì)奧普托欣試驗(yàn)敏感,而奧普托欣試驗(yàn)對(duì)其他鏈球菌則無(wú)抑制作用。O/129抑菌試驗(yàn):O/129抑菌試驗(yàn)為藥敏試驗(yàn),0/129(二氨基喋啶)對(duì)弧菌屬細(xì)菌有抑制作用,而對(duì)氣單胞菌屬細(xì)菌無(wú)抑制作用。在鏈球菌中,只有B群鏈球菌CAMP試驗(yàn)陽(yáng)性,故可作為特異性鑒定。若仍不產(chǎn)生紅色,表示試驗(yàn)為假陰性。硝酸鹽還原試驗(yàn):出現(xiàn)紅色為陽(yáng)性。DNA酶試驗(yàn):細(xì)菌產(chǎn)生DNA酶分解DNA,是菌落周?chē)霈F(xiàn)透明環(huán)。氧化酶試驗(yàn):某些細(xì)菌具有細(xì)胞色素氧化酶,能將二甲基對(duì)苯二胺或四甲基對(duì)苯二胺氧化成紅色的化合物,出現(xiàn)紅色為陽(yáng)性。枸櫞酸鹽利用試驗(yàn)在腸桿菌科中埃希菌屬、志賀菌屬、愛(ài)德華菌屬和耶爾森菌屬均為陰性,沙門(mén)菌屬、克雷伯菌屬通常為陽(yáng)性。枸櫞酸鹽利用試驗(yàn)的陽(yáng)性結(jié)果為深藍(lán)色,陰性為綠色。苯丙氨酸脫氨酶的陽(yáng)性結(jié)果為綠色,氨基酸脫羧酶的陽(yáng)性結(jié)果為培養(yǎng)基從黃色變?yōu)樽仙?。沙門(mén)菌屬中也有硫化氫陰性菌種。主要用于腸桿菌科中屬及種的鑒別。吲哚試驗(yàn)是由于細(xì)菌有色氨酸酶,可以分解色氨酸而產(chǎn)生吲哚,與對(duì)二甲基苯甲醛反應(yīng)生成紅色化合物,本試驗(yàn)呈現(xiàn)紅色為陽(yáng)性。七葉苷水解試驗(yàn)主要用于D族鏈球菌與其他鏈球菌的鑒別,前者為陽(yáng)性(黑色)。VP試驗(yàn)出現(xiàn)紅色為陽(yáng)性,ONPG出現(xiàn)黃色為陽(yáng)性,七葉苷水解試驗(yàn)出現(xiàn)黑色為陽(yáng)性。四、細(xì)菌生化鑒定技術(shù)(一)碳水化合物代謝試驗(yàn)碳水化合物代謝試驗(yàn)包括:糖(醇、苷)類(lèi)發(fā)酵試驗(yàn)、葡萄糖氧化/發(fā)酵試驗(yàn)、甲基紅試驗(yàn)(MR)、VP試驗(yàn)、β半乳糖苷酶試驗(yàn)(ONPG)、七葉苷水解試驗(yàn)。厭氧培養(yǎng)基如皰肉培養(yǎng)基;細(xì)菌L型培養(yǎng)基是針對(duì)細(xì)胞壁缺陷的細(xì)菌L型,由于胞內(nèi)滲透壓較高,培養(yǎng)基必須采用高滲低瓊脂培養(yǎng)基。1特殊培養(yǎng)基:包括厭氧培養(yǎng)基和細(xì)菌L型培養(yǎng)基。如SS瓊脂,其中的膽鹽能抑制革蘭陽(yáng)性菌,因而使沙門(mén)菌、志賀菌容易得到分離。1鑒別培養(yǎng)基:如糖發(fā)酵管、三糖鐵培養(yǎng)基、枸櫞酸鹽培養(yǎng)基、克氏雙糖鐵瓊脂(KIA)、伊紅美藍(lán)瓊脂和動(dòng)力吲哚尿素(MIU)等培養(yǎng)基。1常用的厭氧培養(yǎng)法有:①皰肉培養(yǎng)基法;②焦性沒(méi)食子酸法;③厭氧罐法;④氣袋法;⑤厭氧手套箱法,⑥氣體噴射法。如產(chǎn)氣莢膜梭菌。γ溶血:即不溶血,菌落周?chē)呐囵B(yǎng)基沒(méi)有變化;紅細(xì)胞沒(méi)有溶解或無(wú)缺損。1血瓊脂上的溶血現(xiàn)象:α溶血:又叫草綠色溶血,菌落周?chē)囵B(yǎng)基變?yōu)榫G色環(huán)狀。液體接種法多用于普通肉湯、蛋白胨水等液體培養(yǎng)基接種。斜面接種法主要用于純種增菌及保留菌種或生化反應(yīng)。分區(qū)劃線法下一區(qū)應(yīng)與上一區(qū)接觸3~4次,此方法多用于含菌量多的標(biāo)本,如糞便、濃汁、痰液等標(biāo)本。制備好的培養(yǎng)基放于4℃活冷暗處一般可以保存一周,最多不超過(guò)2周。固體培養(yǎng)基是在液體培養(yǎng)基中加入2%~3%的瓊脂。三、細(xì)菌接種與培養(yǎng)技術(shù)液體培養(yǎng)基是在肉浸液中加入1%%NaCl,蛋白胨的作用為提供細(xì)菌生長(zhǎng)繁殖所需的氮源。二、細(xì)菌不染色標(biāo)本鏡檢▲壓滴法、懸滴法、暗視野聚光法均用于觀察細(xì)菌動(dòng)力。臨床意義:一般用于分枝桿菌屬的檢查,如結(jié)核分枝桿菌、麻風(fēng)桿菌等。染液:苯酚復(fù)紅、3%鹽酸酒精、呂氏堿性亞甲藍(lán)染色步驟:初染5~8min(苯酚復(fù)紅加熱)→流水沖洗→脫色(3%鹽酸酒精)→流水沖洗→復(fù)染1min(呂氏亞甲藍(lán))→流水沖洗→干燥→鏡檢注意事項(xiàng):①苯酚加熱冒氣即可,切勿煮沸或煮干;②脫色要脫到無(wú)紅色染液脫下為止。結(jié)果判定:染紫色為革蘭陽(yáng)性,染紅色為革蘭陰性。染液:結(jié)晶紫、盧戈碘液、95%乙醇、稀釋苯酚復(fù)紅液或沙黃。第四章細(xì)菌檢驗(yàn)技術(shù)常見(jiàn)考點(diǎn)一、細(xì)菌染色標(biāo)本鏡檢▲染色標(biāo)本檢查的基本程序是涂片、干燥、固定、染色、鏡檢。(4)膿毒血癥:化膿性細(xì)菌侵入血流,并在其大量繁殖。(2)菌血癥:致病菌侵入血流,但不在其生長(zhǎng)繁殖。內(nèi)毒素的主要生物學(xué)活性有致熱作用、白細(xì)胞增多、感染性休克、DIC等。(1)外毒素的特性:①主要是革蘭陽(yáng)性菌產(chǎn)生;②具有菌種特異性;③毒性作用強(qiáng);④毒性作用有組織選擇性;⑤具有良好的免疫原性:%的甲醛處理可失去毒性但仍保持免疫原性變?yōu)轭?lèi)毒素,可刺激幾天產(chǎn)生抗毒素;⑥不耐熱;⑦都是蛋白質(zhì),易被酸及蛋白水解酶滅活。(8)IgA蛋白酶:與細(xì)菌的黏附有關(guān)。(6)激酶:將血纖維蛋白酶原激活為纖維蛋白酶,以分解纖維蛋白,防止形成血凝塊。(4)磷脂酶:可水解細(xì)胞膜的磷脂,破壞組織細(xì)胞。(2)膠原酶:分解細(xì)胞外基質(zhì)的膠原蛋白。第三章微生物致病性與感染常見(jiàn)考點(diǎn)病原微生物能否致病與病原體的毒力、數(shù)量、侵入么戶(hù)、機(jī)體的免疫力、環(huán)境因素等密切相關(guān)。質(zhì)粒也是細(xì)菌的遺傳物質(zhì)。(5)原生質(zhì)體融合:兩種經(jīng)過(guò)處理失去細(xì)胞壁的原生質(zhì)體混和可發(fā)生融合,融合后的雙倍體細(xì)胞可發(fā)生細(xì)菌染色體間的重組。(3)接合:受體菌和供體菌直接接觸,供體菌通過(guò)性菌毛將所帶有的F質(zhì)?;蝾?lèi)似遺傳物質(zhì)轉(zhuǎn)移至受體菌的過(guò)程。(1)轉(zhuǎn)化:是受體菌直接攝取供體菌提供的游離DNA片段整合重組,使受體菌的性狀發(fā)生變異的過(guò)程。(6)酶活性變異(7)生化特性的變異細(xì)菌的R質(zhì)粒是耐藥質(zhì)粒,可通過(guò)細(xì)菌間的接合或通過(guò)噬菌體進(jìn)行傳遞。(3)毒力變異:包括毒力加強(qiáng)和毒力減弱。①莢膜變異,從有到無(wú);②鞭毛變異(HO變異),從有到無(wú);③芽胞變異,從有到無(wú)。濫用抗生素會(huì)導(dǎo)致菌群失調(diào)而發(fā)生一
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