xxxx-9-16bt第2講基因工程第1講-概論-在線瀏覽
2025-03-30 15:23本頁面
【正文】 基因工程不是發(fā)現(xiàn)，而是創(chuàng)造。 25 2． DNA分子 雙螺旋結(jié)構(gòu) 模型 和半保留復(fù)制 DNA堿基配對規(guī)律和 X衍射研究 DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)模型。 自我復(fù)制，遺傳信息由親代傳給子代； 通過轉(zhuǎn)錄，遺傳信息傳給 RNA； 通過翻譯，信息傳給蛋白質(zhì)和酶； 基因型決定生物的表型。 基因組結(jié)構(gòu) 基因分布 基因表達 基因調(diào)控的原理 酶誘導(dǎo)的本質(zhì) 31 5．破譯了全部生物 遺傳密碼 ， 確定了它在生物界的通用 性，人類更加具體地了解 遺傳信息表達規(guī)律。 解決了信息語言的對應(yīng)關(guān)系。有 3個： UAA、 UAG、 UGA ? 代表氨基酸的密碼 ： 64 ?3 = 61 ? 起始密碼： AUG 在 mRNA起始部位時為起始密碼。 ?密碼 : 43 = 64 35 1) 通用性 遺傳密碼具有的特點 ? 從原核生物到人類都使用同一套遺傳密碼。 2) 方向性 ? mRNA分子上由起始密碼 AUG開始，從5?→3 ?方向閱讀密碼子，直至終止密碼。 36 3) 連續(xù)性 ?三聯(lián)體密碼連續(xù)性表現(xiàn)為中間無標(biāo)點 ，連續(xù)閱讀 。 37 4) 簡并性 目 錄 ?即有多個密碼子特異地破譯同一個氨基酸． ?遺傳密碼中，除色氨酸和甲硫氨酸僅對應(yīng)一個密碼子外，其余氨基酸均有一個以上密碼子為其編碼。 39 生物進化，基因突變、 獲得的性狀可以 遺傳到 后代。 理論上的可行性。 42 1．工具酶的發(fā)現(xiàn) ： DNA分子的切割和連接技術(shù) ? 1970年 Smith發(fā)現(xiàn)了第一個 Ⅱ 型限制性核酸內(nèi)切酶 (restriction endonuclease， RE) HinfⅠ 對 DNA分 子有特異地切割作用。 （縫紉機、漿糊） ? DNA、 RNA聚合酶和反轉(zhuǎn)錄酶等合成酶 。 43 DNA片段 載體系統(tǒng) 的構(gòu)建 目的基因、 DNA片段不能復(fù)制，也易破壞。 載體（ vector) 是能攜帶外源 DNA、能自我復(fù)制的小 DNA分子。 44 大腸桿菌 受體細胞系統(tǒng) 建立 體外獲得的含目的基因或 DNA片段的重組體，雖具有自我復(fù)制的本能，但沒有原料、酶系統(tǒng)和生命活力。 45 大腸桿菌 DNA轉(zhuǎn)化體系 建立 1970年發(fā)現(xiàn)氯化鈣處理過的細胞易于吸收接納外源 DNA； 1972年 Cohen C報道，質(zhì)粒 DNA也能被大腸桿菌吸收。 46 DNA分析、鑒定 技術(shù) 酶切分析技術(shù)（核酸 分辨 儀） 核酸分子雜交技術(shù)（核酸 探測 儀） 序列分析（密碼 復(fù)讀 機） 生物信息學(xué)（ 密碼 破譯 機） 47 DNA分離、純化及鑒定 技術(shù) 凝膠電泳： Agarose, PAGE gel 離心技術(shù) 層析技術(shù) 印跡技術(shù) : Southern blot ???.. 48 技術(shù)上的 可行性 六大技術(shù)方法的建立 實際上的 可操作性 材料、實驗條件、時空條件、 經(jīng)濟條件和政策。 才能得到創(chuàng)新的發(fā)明、發(fā)現(xiàn) 和成果。沒能進行試驗。 50 1972年 Berg等人使用 EcoRI在體外對猴病毒 SV40的 DNA和 λ 噬菌體 的 DNA分別酶消化，再用 T4DNA連接酶將兩種片段連接起來，得到 SV40和 λ DNA 的重組雜種DNA分子 ， 率先完成了世界上第一次成功的 DNA體外 不同物種之間 的 DNA重組實驗（片段重組）。 Berg的開創(chuàng)性實驗 52 1973 年 Cohen 成功地進行了另一個
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