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20xx人教版高中生物選修三12基因工程的基本操作程序ppt精講課件-在線瀏覽

2025-01-19 22:29本頁(yè)面
  

【正文】 PCR技術(shù) 擴(kuò)增 人工合成 基因組文庫(kù) 部分基因文庫(kù) (如 cDNA文庫(kù) ) 過(guò) 程 方 法 基因文庫(kù)的構(gòu)建 PCR技術(shù) 擴(kuò)增 人工合成 基因組文庫(kù) 部分基因文庫(kù) (如 cDNA文庫(kù) ) 優(yōu) 點(diǎn) 操作簡(jiǎn)單 專一性 可在短時(shí)間內(nèi)大量擴(kuò)增目的基因 專一性強(qiáng) ,可產(chǎn)生自然界中不存在的新基因 缺 點(diǎn) 工作量大、盲目性大、專一性差 操作過(guò)程較麻煩 ,技術(shù)要求過(guò)高 需要嚴(yán)格控制溫度 ,技術(shù)要求高 適用范圍小 DNA復(fù)制的比較 : 項(xiàng)目 PCR技術(shù) DNA復(fù)制 不 同 點(diǎn) 解旋方式 DNA在高溫下變性解旋 解旋酶催化 場(chǎng)所 體外復(fù)制 主要在細(xì)胞核內(nèi) 酶 熱穩(wěn)定的 DNA聚合酶 細(xì)胞內(nèi)含有的 DNA聚合酶 溫度條件 需控制溫度 ,在較高溫度下進(jìn)行 細(xì)胞內(nèi)溫和條件 結(jié)果 在短時(shí)間內(nèi)形成大量的DNA片段 形成整個(gè) DNA分子 項(xiàng)目 PCR技術(shù) DNA復(fù)制 相 同 點(diǎn) 原理 DNA雙鏈復(fù)制 (堿基互補(bǔ)配對(duì) ) 原料 四種游離的脫氧核苷酸 條件 模板、 ATP、酶等 【 典例訓(xùn)練 1】 (2020現(xiàn)用基因工程技術(shù)培育藍(lán)玫瑰 ,下列操作正確的是 ( ) mRNA,經(jīng)反轉(zhuǎn)錄獲得互補(bǔ)的 DNA,再擴(kuò)增基因 B B DNA聚合酶將基因 B與質(zhì)粒連接后導(dǎo)入玫瑰細(xì)胞 B直接導(dǎo)入大腸桿菌 ,然后感染并轉(zhuǎn)入玫瑰細(xì)胞 【 解題關(guān)鍵 】 解答本題的關(guān)鍵是明確獲取目的基因的方法、基因工程的工具及基因工程操作的基本步驟。由題意知 :控制藍(lán)色色素合成的基因 B是目的基因 ,提取矮牽牛藍(lán)色花的 mRNA,經(jīng)反轉(zhuǎn)錄獲得互補(bǔ)的 DNA,再擴(kuò)增基因 B,然后導(dǎo)入天然的玫瑰細(xì)胞中 ,經(jīng)培育該受體細(xì)胞即能獲得藍(lán)玫瑰 ,故選項(xiàng) A正確。將目的基因 B與質(zhì)粒連接需用 DNA連接酶 ,而不是 DNA聚合酶 。 【 變式訓(xùn)練 】 下列屬于獲取目的基因的方法的是 ( ) ① 利用 mRNA反轉(zhuǎn)錄形成 ②從基因組文庫(kù)中提取 ③從受體細(xì)胞中提取 ④利用 PCR技術(shù)合成 ⑤利用 DNA轉(zhuǎn)錄形成 ⑥人工合成 A.①②③⑤ B.①②⑤⑥ C.①②③④ D.①②④⑥ 【 解析 】 選 D。對(duì)于一些已知一段核苷酸序列的目的基因 ,可用 PCR技術(shù)擴(kuò)增合成 。受體細(xì)胞是目的基因表達(dá)的場(chǎng)所 ,不能從中提取目的基因 。 二、基因表達(dá)載體的構(gòu)建 : 【 易錯(cuò)提醒 】 啟動(dòng)子和終止子、起始密碼子與終止密碼子的區(qū)別 (1)啟動(dòng)子和終止子都在 DNA上 ,在遺傳信息轉(zhuǎn)錄時(shí)起作用。 (2)起始密碼子和終止密碼子都是 mRNA上三個(gè)相鄰堿基。 【 典例訓(xùn)練 2】 (2020 (2)構(gòu)建基因表達(dá)載體的目的、方法?;虮磉_(dá)載體的構(gòu)建是基因工程的第二步 ,也是基因工程的核心 。目的基因主要是指編碼蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)基因 。 三、目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞 : : 受體細(xì) 胞種類 植物細(xì)胞 動(dòng)物細(xì)胞 微生物細(xì)胞 常用方法 農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法 顯微注射法 Ca2+處理法 受體細(xì)胞 體細(xì)胞 受精卵 原核細(xì)胞 轉(zhuǎn)化過(guò)程 目的基因插入Ti質(zhì)粒的 TDNA上 → 導(dǎo)入植物細(xì)胞 → 整合到受體細(xì)胞的 DNA上 → 表達(dá) 目的
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