20xx人教版高中生物選修三12基因工程的基本操作程序ppt精講課件-閱讀頁
2024-12-06 22:29本頁面
【正文】 基因表達載體的提純 → 取卵→ 顯微注射 → 受精卵發(fā)育 → 獲得具有新性狀的動物 Ca2+處理細胞→ 感受態(tài)細胞 ,表達載體與感受態(tài)細胞混合→ 感受態(tài)細胞吸收 DNA分子 【 思維拓展 】 (1)目的基因?qū)胧荏w細胞后不一定都能夠維持穩(wěn)定和遺傳 : 目的基因能否在植株細胞內(nèi)穩(wěn)定保存并表達的關(guān)鍵是目的基因是否插入到受體細胞染色體上的 DNA中。 (2)Ca2+促進轉(zhuǎn)化的原因 : Ca2+(或 CaCl2溶液 )對微生物細胞的作用是增加細胞壁的通透性。下圖為農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法的示意圖 ,試回答下列問題 : (1)一般情況下農(nóng)桿菌不能感染的植物是 ,利用農(nóng)桿菌自然條件下感染植物的特點 ,能實現(xiàn) 。 (2)根據(jù) TDNA這一轉(zhuǎn)移特點 ,推測該 DNA片段上可能含有控制 (酶 )合成的基因。 (4)植物基因工程中除了農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法之外 ,還可采取 _______ __________________________________。 (2)分析農(nóng)桿菌中 Ti質(zhì)粒中的 TDNA特點及其整合到染色體 DNA的實質(zhì)。利用其感染性 ,可實現(xiàn)目的基因?qū)胫参锛毎?(2)根據(jù) TDNA這一轉(zhuǎn)移特點 ,可以推測該 DNA片段能控制合成 DNA連接酶、限制酶以實現(xiàn)與雙子葉植物細胞染色體DNA的整合。 (4)植物基因工程中除了農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法之外 ,還有基因槍法和花粉管通道法等。 (2)根據(jù)題干分析 ,為什么動植物病毒也可作為基因工程的載體 ? 提示 :病毒能夠侵染正常細胞 ,有的病毒還能將自己的核酸整合到宿主細胞的染色體上 ,所以可以作為基因工程的載體。 : 類型 步驟 檢測內(nèi)容 方法 判斷指標(biāo) 分 子 檢 測 第一步 目的基因是否導(dǎo)入受體細胞 DNA分子雜交技術(shù)(DNA與 DNA之間 ) 是否顯示出雜交帶 第二步 目的基因是否轉(zhuǎn)錄出 mRNA 分子雜交技術(shù) (DNA與 mRNA之間 ) 第三步 目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì) 抗原 — 抗體雜交 個體生物學(xué)水平的鑒定 植物可進行抗蟲或抗病的接種實驗 ,以確定是否有抗性以及抗性程度 。進行翻譯水平的檢測 ,則是利用抗原與抗體特異性結(jié)合的原理。 (3)在 DNA分子、 mRNA分子上檢測目的基因是否插入、目的基因是否轉(zhuǎn)錄時 ,用的探針都是放射性同位素等標(biāo)記的含有目的基因的 DNA片段。若要在限制酶切割目的基因和質(zhì)粒后使其直接進行連接 ,則應(yīng)選擇能使二者產(chǎn)生 (相同、不同 )黏性末端的限制酶。在用表達載體轉(zhuǎn)化大腸桿菌時 ,常用 處理大腸桿菌 ,以利于表達載體進入 。為了檢測胰島素基因轉(zhuǎn)錄的 mRNA是否翻譯成 ,常用抗原 — 抗體雜交技術(shù)。 (2)理解基因工程的操作過程 ,將目的基因?qū)胧荏w細胞后還需要進一步檢測和鑒定目的基因是否成功表達。若用 DNA連接酶連接兩個末端 ,兩個末端必須是相同的。檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄 ,使用分子雜交技術(shù) 。 答案 :(1)平 相同 (2)RNA聚合酶識別和結(jié)合的部位 Ca2+ 分子雜交技術(shù) 蛋白質(zhì) 【 規(guī)律方法 】 解答基因工程基本操作程序題目的一般步驟 ——三辨、三找、一析、一理 (1)三辨 :分辨限制酶的種類及識別序列和切割位點。 (2)三找 :找出標(biāo)記基因、目的基因及其插入位點。明確目的基因的插入位點是在標(biāo)記基因內(nèi)部還是在標(biāo)記基因之外。如果質(zhì)粒中有一個標(biāo)記基因 ,插入后一般不破壞標(biāo)記基因 。 (4)一理 :理清判斷目的基因是否導(dǎo)入受體細胞的方法。
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