發(fā)酵工藝原理第六章-在線瀏覽
2025-02-17 11:21本頁面
【正文】 ， 比霉菌 ， 放線菌快 ， 通常用一級(jí)種子 15 ? 確定種子罐級(jí)數(shù)需注意的問題 – 種子級(jí)數(shù)越少越好，可簡(jiǎn)化工藝和控制，減少染菌機(jī)會(huì) – 種子級(jí)數(shù)太少，接種量小，發(fā)酵時(shí)間延長(zhǎng)，降低發(fā)酵罐的生產(chǎn)率，增加染菌機(jī)會(huì) – 雖然種子罐級(jí)數(shù)隨產(chǎn)物的品種及生產(chǎn)規(guī)模而定。如改變種子罐的培養(yǎng)條件，加速了孢子發(fā)芽及菌體的繁殖，也可相應(yīng)地減少種子罐的級(jí)數(shù)。 – 例如在四環(huán)素、土霉素生產(chǎn)中，配制產(chǎn)孢子斜面培養(yǎng)基用的麩皮，因小麥產(chǎn)地、品種、加工方法及用量的不同對(duì)孢子質(zhì)量的影響也不同。 ? 原材料質(zhì)量的波動(dòng)，起它要作用的是其中無機(jī)離子含量不同，如微量元素 Mg2+ 、 Cu2+ 、 Ba2+能刺激孢子的形成。 18 ? 水質(zhì)的影響：地區(qū)不同、季節(jié)變化和水源污染，均可造成水質(zhì)波動(dòng)，影響種子質(zhì)量。 19 ? 措施 – 培養(yǎng)基所用原料要經(jīng)過發(fā)酵試驗(yàn)合格才可使用 – 嚴(yán)格控制滅菌后培養(yǎng)基的質(zhì)量 – 斜面培養(yǎng)基使用前，需在適當(dāng)溫度下放置一定時(shí)間 – 供生產(chǎn)用的孢子培養(yǎng)基要用比較單一的氮源，作為選種或分離用的培養(yǎng)基則采用較復(fù)雜的有機(jī)氮源 20 2，培養(yǎng)條件 （ 1）溫度 溫度對(duì)多數(shù)品種斜面孢子質(zhì)量有顯著的影響。一般各生產(chǎn)單位都嚴(yán)格控制孢子子斜面的培養(yǎng)溫度。例如土霉素生產(chǎn)菌種龜裂鏈霉菌，孢子制備時(shí)發(fā)現(xiàn)：在北方氣候干燥地區(qū)孢子斜面長(zhǎng)得較快，在含有少量水分的試管斜面培養(yǎng)基下部孢子長(zhǎng)得較好，而斜面上部由于水分迅速蒸發(fā)呈干疤狀，孢子稀少。從表中看出相對(duì)濕度在40%~45%時(shí)孢子數(shù)量最多，且孢子顏色均勻，質(zhì)量較好。過于衰老的孢子會(huì)導(dǎo)致生產(chǎn)能力的下降。 23 （ 2）冷藏時(shí)間 ? 斜面冷藏對(duì)孢子質(zhì)量的影響與孢子成熟程度有關(guān)。而培養(yǎng) 5天以后冷藏， 20天未發(fā)現(xiàn)自溶。例如在鏈霉素生產(chǎn)中，斜面孢子在 6? C冷藏兩個(gè)月后的發(fā)酵單位比冷藏一個(gè)月降低 18%，冷藏 3個(gè)月后降低 35%。 25 二、影響種子質(zhì)量的因素及控制 ? 孢子的質(zhì)量 ? 培養(yǎng)基 ? 培養(yǎng)條件 ? 種齡 ? 接種量 26 1，培養(yǎng)基 ? 營(yíng)養(yǎng)成分適合種子培養(yǎng)的需要 – 選擇有利于孢子發(fā)芽和菌體生長(zhǎng)的培養(yǎng)基； – 營(yíng)養(yǎng)上要易于被菌體直接吸收和利用； – 營(yíng)養(yǎng)成分要適當(dāng)豐富和完全，氮源和維生素含量要高 ? 營(yíng)養(yǎng)成分要盡可能與發(fā)酵培養(yǎng)基相近。例如，青霉素的生產(chǎn)菌種在制備過程中將通氣充足和不足兩種情況下得到的種子分別接入發(fā)酵罐內(nèi)，它們的發(fā)酵單位可相差 1倍。 28 3，種齡 ? 種齡：是指種子罐中培養(yǎng)的菌絲體開始移入下一級(jí)種子罐或發(fā)酵罐時(shí)的培養(yǎng)時(shí)間。時(shí)間太長(zhǎng)，菌種趨于老化，生產(chǎn)能力下降，菌體自溶；種齡太短，造成發(fā)酵前期生長(zhǎng)緩慢。嗜堿性芽孢桿菌生產(chǎn)堿性蛋白酶，12小時(shí)最好。 ? 接種量的大小決定于生產(chǎn)菌種在發(fā)酵罐中生長(zhǎng)繁殖的速度，采用較大的接種量可以縮短發(fā)酵罐中菌絲繁殖達(dá)到高峰的時(shí)間，使產(chǎn)物的形成提前到來，并可減少雜菌的生長(zhǎng)機(jī)會(huì)。過大會(huì)引起溶氧不足，影響產(chǎn)物合成；而且會(huì)過多移入代謝廢物，也不經(jīng)濟(jì)；過小會(huì)延長(zhǎng)培養(yǎng)時(shí)間，降低發(fā)酵罐的生產(chǎn)率。因此首先必須保證生產(chǎn)菌種的穩(wěn)定性，其次是提供種子培養(yǎng)的適宜環(huán)境保證無雜菌侵入，以獲得優(yōu)良種子。 32 2，生化指標(biāo) ? 種子液的糖、氮、磷的含量和 pH變化。 34 4，酶活力 ? 種子液中某種酶的活力，與目的產(chǎn)物的產(chǎn)量有一定的關(guān)聯(lián)。 (1) 斜面培養(yǎng)基組成 葡萄糖 ％ 蛋白陳 ％ 牛肉膏 ％ 氯化鈉 ％ 瓊脂 ~％ PH ~ （傳代和保藏斜面不加葡萄糖） (2) 培養(yǎng)條件： 33~34℃ ，培養(yǎng) 18~24h 36 2， 一級(jí)種子培養(yǎng) ?
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