發(fā)酵工程原理與技術(shù)第二章-在線瀏覽
2024-10-22 20:42本頁面
【正文】 離方法 有些微生物的產(chǎn)物對篩選沒有任何選擇性優(yōu)勢 。 隨機(jī)分離方法 篩選?。。?！ 生長因子產(chǎn)生菌的篩選 核苷酸等生長因子的生產(chǎn)不能作為分離步驟中的選擇壓力，可用隨機(jī)辦法分離產(chǎn)生菌，并通過篩選試驗檢出產(chǎn)生菌。 隨機(jī)分離方法 篩選 抗生素產(chǎn)生菌篩選 在含有敏感菌的平板上鑒定抗生作用。 隨機(jī)分離方法 篩選 藥理活性化合物的篩選 酶靶法： 基本原理：一種化合物如在體外具有抑制代謝過程的某一關(guān)鍵酶的作用 ， 它在體內(nèi)一般也具有相應(yīng)的藥理作用 。 隨機(jī)分離方法 篩選 隨機(jī)分離方法 篩選 多糖產(chǎn)生菌的篩選 制糖工業(yè)污水中可能含有很多這種菌種 。 隨機(jī)分離方法 篩選 生物進(jìn)化過程中野生型微生物形成完善的代謝調(diào)節(jié)機(jī)制 不會有代謝產(chǎn)物的積累 解除或突破微生物的代謝調(diào)節(jié)控制 目的產(chǎn)物積累 微生物育種的目的 方法：突變、體內(nèi)重組 體外重組（基因工程） 微生物菌種的選育 經(jīng)典育種 ： 自然選育 和 誘變育種 定向育種 ：轉(zhuǎn)化 、 轉(zhuǎn)導(dǎo) 、 接合 、 原生質(zhì)體融合 、 代謝調(diào)控和基因工程等 。 自然突變 ：微生物在沒有人工參與下所發(fā)生的突變 。 自然選育 前 進(jìn) 多因素低劑量誘變效應(yīng) ：自然突變實質(zhì)上是由一些原因不詳?shù)牡蛣┝空T變因素引起的長期綜合效應(yīng) ， 如宇宙空間各種短波輻射 、 自然界中普遍存在的一些低濃度誘變物質(zhì)以及微生物自身代謝活動中所產(chǎn)生的一些誘變物質(zhì) (如 H2O2)的作用等 。 自然突變 NNNHNNH2腺嘌呤(adenine, A) NN HN HNN H 2O鳥嘌呤 (guanine, G) 胞嘧啶 (cytosine, C) NN HN H 2O尿嘧啶 (uracil, U) NHNHOO胸腺嘧啶 (thymine, T) N HN HOOCH 3 五種堿基都能形成酮式 烯醇式或氨基 亞氨基的互變異構(gòu)。 H NH NCN H2+O+H NN H2NN H2亞 氨 基 氨 基+ H+NCO HNCO+ H+酮 式 烯 醇 式互變異構(gòu)效應(yīng) 互變異構(gòu)效應(yīng) ? 平衡傾向于酮式和氨基時， DNA雙鏈中以 AT和 GC堿基對為主。 結(jié)果： 菌種衰退和生產(chǎn)質(zhì)量下降； 對生產(chǎn)有益的突變 。 實際生產(chǎn)中 ， 從高產(chǎn)批號中取樣分離單菌落 ，從中選 出 穩(wěn)定菌株 用于生產(chǎn) 。 誘變育種 自然突變： 自然條件下出現(xiàn)的基因突變 。 誘變劑處理使菌種發(fā)生突變頻率和變異幅度提高 — 獲得特性優(yōu)良變異菌株的幾率高 。 前進(jìn) 出發(fā)菌株誘變處理 包括： 出發(fā)菌株的選擇 誘變劑的選擇 誘變劑量和處理時間的確定 返 回 （ 1） 出發(fā)菌株 出發(fā)菌株應(yīng)產(chǎn)量高 、 對誘變劑敏感性大 、 變異幅度廣 。 青霉菌選育 ：先以氮芥處理很短時間而不引起突變 ，再用 UV處理 ， 可使誘變頻率大為提高 。 幾個應(yīng)注意的問題 乙烯亞胺和 UV復(fù)合處理，氯化鋰和 UV復(fù)合處理，都用得較普遍，且有一定成效。 幾個應(yīng)注意的問題 （ 3） 劑量選擇 變異率取決于誘變劑量 ， 變異率和致死率之間有一定關(guān)系 。 合適劑量 ：同時增加變異幅度與正突變 。 幾個應(yīng)注意的問題 突變體的篩選
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