【正文】 基因產(chǎn)物的增加 , 從而引起細(xì) 胞正常功能的紊亂 原癌基因 myc, erbB 和 Ras的擴(kuò) 增在人 類腫瘤中最為常見(jiàn) 染色體重排 Overexpression or protein with novel activities 原癌基因 ? 原癌基因中染色體某一部分從一個(gè)位置移動(dòng)到另一位置 , 使原癌基因的結(jié)構(gòu)改變 , 使原癌基因激活 , 這種改變稱為基因重排 ? 通過(guò)對(duì)腫瘤組織和細(xì)胞系的染色體分析，發(fā)現(xiàn)在各種腫瘤中都有染色體結(jié)構(gòu)的異常。22) including the 9q+ and 22q (Ph) chromosomes TranslocationsBcr/Abl Oncogene 21。 ? 一些 DNA甲基化抑制劑 , 例如 5氮雜胞苷和 5氮雜脫氧胞苷 可以使失活的腫瘤抑制基因恢復(fù)其正常功能 ,為白血病和其他相關(guān)疾病的治療提供了新的手段 。 ? 原癌基因 Int1, Int2, Pim1, Lck 等均是通過(guò)插入突變的鑒定而發(fā)現(xiàn)的 ? 不同的癌基因有不同的激活方式，一種癌基因也可有幾種激活方式 ? 例如 cmyc的激活就有基因擴(kuò)增和基因重排兩種方式，很少見(jiàn) cmyc的突變；而 ras的激活方式則主要是突變 大部分腫瘤的基因改變都是后天獲得的，即 體細(xì)胞發(fā)生基因改變 癌基因一般為 顯性基因 ， 即兩個(gè)等位基因中只要有一個(gè)等位基因發(fā)生激活，其功能即表現(xiàn)出來(lái) 大多數(shù)抑癌基因作用方式為 負(fù)隱性 人類腫瘤中常見(jiàn)的癌基因 Ras基因 ? 1980年從膀胱癌細(xì)胞株 T24中克隆了第一個(gè)人癌基因 Hras, 后來(lái)又發(fā)現(xiàn)了 Kras 和 Nras ? 都編碼鳥(niǎo)苷酸結(jié)合蛋白 , 分子量 21000 ? 腫瘤中以 KRas 為主 , HRas, NRas較少見(jiàn) ? Ras蛋白在細(xì)胞增殖分化信號(hào)從激活的跨膜受體 傳遞到下游蛋白激酶過(guò)程中起重要作用 Ras基因的突變與腫瘤 ? Ras基因在腫瘤中的改變以 點(diǎn)突變 為主 ? Kras 基因的點(diǎn)突變主要集中在第 12位氨基酸殘基 , 少數(shù)也有第 13及 61位點(diǎn)突變 ? 已在膀胱癌 ﹑ 乳腺癌 ﹑ 結(jié)腸癌 ﹑ 腎癌 ﹑ 肝癌 ﹑ 肺癌 ﹑胰腺癌 ﹑ 胃癌及造血系統(tǒng)腫瘤中均檢測(cè)到了 Ras基因的異常 ? 不同類型的腫瘤 Ras 基因的突變率明顯不同 胰腺癌（ 90%） ﹑ 結(jié)腸癌 (53%） ﹑ 肺癌 (30%） Ras基因的作用機(jī)理 ? Ras蛋白位于細(xì)胞膜內(nèi)側(cè) ? Ras蛋白對(duì) GTP 和 GDP有高度親和力 ? Ras 蛋白有活化和非活化兩種形式，通常非活化狀態(tài)的 Ras蛋白分子能與 GDP結(jié)合，在受到信號(hào)傳遞通道上游某因子的刺激時(shí)， GDP變成 GTP， 隨后蛋白發(fā)生構(gòu)象改變，成為活化狀態(tài)，活化的 Ras 蛋白與效應(yīng)分子相互作用，實(shí)現(xiàn)生長(zhǎng)信號(hào)的傳遞 Bcl2(B cell leukaemia2)基因 ? 從 B細(xì)胞淋巴瘤中鑒定出來(lái)的癌基因 ,由染色體易位而激活 ? 編碼 25KDa的線粒體膜蛋白 , ? 是一種重要的 抗凋亡基因 ,能抑制多種因素引起的細(xì)胞凋亡 Bcl2家族與腫瘤發(fā)生及轉(zhuǎn)移 ? Bcl2在前列腺癌、乳腺癌、結(jié)腸癌和黑色素瘤中有高頻率的表達(dá) ? Bcl2家族成員的異常表達(dá)還 參與腫瘤的轉(zhuǎn)移過(guò)程 .Bcl2高表達(dá)可導(dǎo)致轉(zhuǎn)移潛能的增加 ,表現(xiàn)為轉(zhuǎn)移出現(xiàn)的時(shí)間縮短和發(fā)生轉(zhuǎn)移的器官數(shù)增加 Bcl2基因與腫瘤治療 ? Bcl2家族成員在細(xì)胞凋亡調(diào)控中的重要作用 , 成為腫瘤治療的新靶點(diǎn) ? 多數(shù)人類腫瘤中均有 Bcl2 的高表達(dá) , 以此為靶點(diǎn)的藥物將具有較廣的抗癌譜 Myc基因 ? 最初是從雞白血病病毒中發(fā)現(xiàn) (主要有 CMyc,NMyc﹑ LMyc,但以 CMyc為主 ) ? 在人類中它的活化方式首次在 Burkitt淋巴瘤中發(fā)現(xiàn) ,可通過(guò) 染色體易位而活化 ? 在某些腫瘤中 ,Myc基因還受 DNA擴(kuò)增影響 ,在肺癌中Myc家族癌基因的激活以擴(kuò)增為主 Myc基因的功能 ? Myc基因 參與細(xì)胞的增殖、分化與凋亡 ? 與多種腫瘤的發(fā)生發(fā)展有關(guān) , 在胃癌、肺癌、乳腺癌及白血病等腫瘤中均有顯著表達(dá) ? 體外實(shí)驗(yàn)證實(shí) cmyc基因可與其他癌基因協(xié)同轉(zhuǎn)化多種細(xì)胞 Mdm2基因 ? 最初在自發(fā)轉(zhuǎn)化的鼠 BALB/c3T3細(xì)胞系中因擴(kuò)增而被發(fā)現(xiàn) ? Mdm2 是一種進(jìn)化保守基因 ? 在多種腫瘤中都發(fā)現(xiàn)有 Mdm2擴(kuò)增 ? 是 p53轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)的靶基因之一 ,也是 p53重要的調(diào)節(jié)因子 Mdm2基因的致癌機(jī)制 ? 依賴于 p53 的致癌機(jī)制 : Mdm2基因的擴(kuò)增和轉(zhuǎn)錄的增加均可導(dǎo)致 Mdm2蛋白的過(guò)表達(dá) ,阻止了 p53基因的表達(dá)使其抑癌作用被抑制 ? 不依賴 p53 的致癌機(jī)制 : 1. Mdm2基因轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物的選擇性剪接 :五種選擇性剪切蛋白中 ,只有一種 (Mdm2ae)與 p53結(jié)合 ,其他都有細(xì)胞轉(zhuǎn)化的能力 2. Mdm2基因的突變 :白血病 ,肝癌 ,骨肉瘤 抑癌基因 (tumor suppressor gene) ? 是一類正常的基因 , 這類基因作為細(xì)胞的剎車而起作用。 如果其功能失活或出現(xiàn)基因缺失、突變等異常，將導(dǎo)致細(xì)胞無(wú)限制地生長(zhǎng)和分裂 , 形成腫瘤。 抑癌基因在理論上需符合的三個(gè)基本條件 ? 在惡性腫瘤的相應(yīng)正常組織中該基因必須正常表達(dá) ? 在惡性腫瘤中這種基因應(yīng)有功能或結(jié)構(gòu)改變或表達(dá)缺陷 ? 將這種基因的野生型導(dǎo)入基因異常的腫瘤細(xì)胞內(nèi) ,可部分或全部改變其惡性表型 抑癌基因的功能 ? 調(diào)節(jié)細(xì)胞生長(zhǎng) ﹑ 增殖 ? 誘導(dǎo)細(xì)胞分化 ? 誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡 ? 調(diào)節(jié)血管生成 ? 維持其他基因的功能 抑癌基因與癌基因的差別 ? 在細(xì)胞水平抑癌基因表現(xiàn)為隱性，原癌基因是顯性的 ? 在功能上抑癌基因?qū)?xì)胞生長(zhǎng)起負(fù)調(diào)節(jié)作用 ， 癌基因則相反 ? 抑癌基因的隱性突變不影響遺傳物質(zhì)的正常傳遞 ,帶 有單一等位基因突變的抑癌基因能夠被傳給下一代 , 使這些個(gè)體具有相應(yīng)疾病的易感性 . 抑癌基因的研究歷史 ? 1960年在研究?jī)和暰W(wǎng)膜母細(xì)胞瘤的基因突變時(shí) ,發(fā)現(xiàn)了抑癌基因的功能 ? 1986年 Weiberg等克隆出了與視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤有關(guān)的抑癌基因 Rb ? 目前已克隆的抑癌基因和未被克隆的候選抑癌基因已超過(guò) 40余種 Rb 基因 ? 視網(wǎng)膜細(xì)胞癌基因 (retinoblastmoma gene, Rb)是 第一個(gè)被克隆的抑癌基因 ，發(fā)現(xiàn)于兒童的視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤 . ? 1986年美國(guó)的三個(gè)實(shí)驗(yàn)室分別獨(dú)立克隆了該基因 ? 在肺癌 ﹑ 骨肉瘤 和乳腺癌中也發(fā)現(xiàn)有 Rb基因的缺失和失活（ 小細(xì)胞肺癌中異常為 50%﹑ 骨肉瘤 47%﹑乳腺癌 32%) Rb 基因缺失 ? Rb基因比較大，全長(zhǎng)約 200kb, 編碼 核內(nèi)磷酸化蛋白（ pRb蛋白）， 定位于核內(nèi) ? 有磷酸化和非磷酸化兩種形式，非磷酸化形式稱活性型，能抑制細(xì)胞增殖 ? pRb的腫瘤抑制作用是通過(guò)其對(duì)細(xì)胞增殖 ,分化和細(xì)胞凋亡的調(diào)節(jié)來(lái)進(jìn)行的 Rb 基因和細(xì)胞周期調(diào)控 1. Rb的磷酸化狀態(tài)為Rb 基因調(diào)節(jié)細(xì)胞生長(zhǎng)分化的主要形式 2. 調(diào)節(jié) Rb功能最為重要的磷酸化事件在 G1和 S期交界處